Способ количественного определения активации лимфоидных клеток

Способ количественного определения активации лимфоидных клеток

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

Изобретение позволяет повысить чувствительность определения активации лимфоцитов. Для этого предварительно полученную биопробу помещают в кювету из нелюминесцирукяцего стекла с дном из оптического кварца, располагаемую непосредственно над фотокатодом ФЭУ, термостатируемуго при 38 С. Определяют величину свечения , кюветы и кюветы с биопробой. Пробу лимфоцитов помещают в кювету и через 2-3 мин регистрируют интенсивность свечения. Добавляют раствор тимостимулина или другой индуктор , через 5-10 мин после введения иммуностимулятора определяют хемолюминесценцию и оценивают активацию лимфоцитов по количеству импульсов в единицу-времени. I табл. С 9 ю 00 г ;о

СОЮЗ СОВЕТСНИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК

„„SU„„123797

15д 4 С О1 Н 33 53 ю,т:.,- "/", pre. ,.1;

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Н А BTOPCHOMV СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (21) 3274009/28-14 (22) 11, 02. 81 (46) 15.06 ° 86. Бюл. ¹ 22 (71) Киевский научно-исследовательский рентгенорадиологический и онкологический институт (72) Ю.А.Гриневич, В.А.Барабой, И.С.Никольский и Л.А.Титоренко (53) Л616-07(088.8) (56) Общие вопросы патологии. М.:

ВИНИТИ, т, 4, 1976, с. 124-151. (54) СПОСОБ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ АКТИВАЦИИ ЛИМФОИДНЫХ КЛЕТОК (57) Изобретение позволяет повысить чувствительность определения активации лимфоцитов. Для этого предварительно полученную биопробу помещают в кювету из нелюминесцирующего стекла с дном из оптического кварца, располагаемую непосредственно над фотокатодом ФЭУ, термостатируемую при 38 С. Определяют величину свео чения, кюветы и кюветы с биопробой.

Пробу лимфоцитов помещают в кювету и через 2-3 мин регистрируют интенсивность свечения. Добавляют раствор тимостимулина или другой индуктор, через 5-10 мин после введения иммуностимулятора определяют хемолюминесценцию и оценивают активацию лимфоцитов по количеству импульсов в единицу -времени. 1 табл.

L Число наблюдений

Иммуностимулят онечная минесценция онцентраия

Лимфоциты человека, Левамизол 0,1 мкг/мл 10

251

Фито гемагглютинин

0,15 мг/мл 9

1,0 мг/мл 10

123 27 27

Тимостимулин (,-клетки, Левамизол

204

0,1 мкг/мл 6

145

1,0 мг/мл б

Тимостимулин

274

Лимфоциты крыTHMOCTH мулин

1,0 мг/мл б

127

BHHHHH Заказ 3283/45 Тираж 778 Подписное

Произв-полигр. пр-тие, г. Ужгород, ул„ Проектная, 4

Изобретение относится к медицине, а именно к иммунологии, и касается способов выявления и объективной регистрации состояния активации лимфоцитов, может быть использовано при диагностике заболеваний, сопровождающихся изменениями иммунологической реактивности организма.

Цель изобретения - повышение чувствительности способа.

Способ осуществляют следующим образом.

1 ..

1 мп. гепарийизйрованной крови

1 е наносят иа f Ьл смеси фиколла и верогрЬфина; (P-1,077) . Пробирки цент, ф1 фуййруют -при 1000 об/мин 30 мин.

Эритроциты оседают на дно пробирки, лим1роциты остаются в интерфаэе, Лимфоциты собирают, дважды отмывают и подсчитывают (из 1 мл крови с нормальным-содержанием лимфоцитов обычно удается получить около 10 клеФормула изобретения

Способ количественного определе ния активации лимфоидных клеток путем добавления к суспензии лимфоцитов иммуностимулятора с последующим учетом полученных результатов, о т37979 2 ток, которые ресуспендируют н 1 мл раствора Хэнкса). Полученную таким образом биопробу помещают в кювету иэ нелюминесцирующего стекла с дном иэ оптического кварца, располагаемую непосредственно над фотокатодом

ФЭУ, термостатируемую при 38 С. о

После эталонных измерений определяют величину свечения кюветы (фон) и кюветы с биопробой, Пробу лимфоцитов в объеме 0,7-1,0 мл (10 мм фоцитов) помещают в кювету и через

2-3 мин регистрируют интенсивность свечения по описанному выше способу.

Затем добавляют 0,7 мл раствора тимостимулина или другого индуктора и через 5-10 мин вновь регистрируют свечение стимулированных лимфоцито в °

Хемилюминесценция иммунокомпетентных клеток через 5 мин после воздействия стимулятора представлена в таблице. личающийс я тем, что, с целью повышения чувствительности спо50 соба, определяют хемолюминесценцию в течение 5-10 мин после введения иммуностимулятора и оценивают активацию лимфоцитов по количеству импульсов .в единицу времени,