Способ определения цистеина в водной среде

Способ определения цистеина в водной среде

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

Изобретение относится к аналитической химии, в частности к спо- , собу фотометрич еского определения цистеина в водной среде,. Цель - повышение чувствительности способа. Определение ведут путем обрабОт ки анализируемой пробы концентрированной минеральной кислотой при кипячении . Полученньй раствор нейтрализуют , обрабатывают азотнокислой ртутью и спиртовым раствором 1-(хиноксалил-2 ) -З-метил-5 (ll -диметил-t аминофенил)-формазана и фотометрируют. ОбрэГ Отку желательно проводить при рН 5,5-12,5. Чувствительность способа 0,32 мкг/мл. 1 з.п. ф-лы, 1 ил. ko о DO СО ел

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК

А1 ии SU uu (511 4 G Ol N 21 78

Ц ъ .Э@, J3 Э б б 4 Д

OllMCAHHE ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМ,Ф СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (21 ) 3818837/23-04 (22) 22.10.84 (46) 23.06.86..Бюл. 11 23 (71) Свердловский научно-исследовательский институт курортологии и физиотерапии (72) 3.М. Жернакова, Л.Ф. Дубинина и 10.А. Седов (53) 543.42.063 (088.8) (56) Коренман И,М. Фотометрический анализ. М.: Химия, 1970, с.272-276.

Авторское свидетельство СССР

Р 1144037, кл. G 01 Н 21/78, 1983. (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЦИСТЕИНА В

ВОДНОЙ СРЕДЕ (57). Изобретение относится к аналитической химии, в частности к способу фотометрического определений цистеина в водной среде, Цель — повышение чувствительности способа.

Определение ведут путем обработки анализируемой пробы концентрированной минеральной кислотой при кипячении. Полученный раствор нейтрализуют, обрабатывают азотнокислой ртутью и спиртовым раствором 1-(хиноксалил-2 )-3-метил-5(4 -диметил-. ф аминофенил)-формазана и фотометрируют. Обработку желательно проводить при рН 5,5-12,5. Чувствительность способа 0,32 мкг/мл, 1 s.n. ф-лы, I ил.

1239564

Изобретение относится к аналитической химии, к способу фотометрического определения микрограммовых количеств цистеина-аминокислоты, содержащей $Н-группу, относящейся к меркаптанам и может быть применено для анализа природных и сточных вод, грязевых растворов лечебных грязей, биологических материалов и других природных и промьппленных объектов.

Целью изобретения является повышение чувствительности способа.

На чертеже представлен градуировочный график для определения концентрации цистеина методом добавок.

Пример 1. а) Каждую пробу грязевого раствора подвергают гидролизу концентрированной соляной кислотой при кипячении в течение 2030 мин, охлаждают, нейтрализуют, доводят уровень до первоначального дистиллированной водой.

К 1 мл спиртового раствора реа/ гента — 1-(хиноксалил- 2 )-3-метил5(4"-диметиламинофенил)-формазан

Моль концентрации 10 ----- добавляют л

О,I мл водного раствора азотно-кисмоль лой ртути концентрации 10 затем 0,1 мл гидролизованного грязевого раствора с хорошим санитарнобактериологическим показателем (SHгруппы отсутствуют), добавляют буфер (универсальная буферная смесь: фосфорная, уксусная, борная кислоты

0,04 M â отношении каждой из,них и

О,2 н. ЖОН), доводят этиловым спиртом до 5 мл. Полученный раствор должен быть с рН 5,5. Предварительно в контрольном растворе также устанавливают рН 5,5. Полученный раствор фотометрируют в тех же условиях, что и контрольный раствор: при Я =580 ммк, толщине поглощающего слоя Х = 1 см.

Найденное значение оптической. плотности исследуемого раствора А,, а h Aj= А ц„ -А =О. Используя метод добавок, получают прямолинейный график, проходящий через начало координат, что свидетельствует об отсутствии цистеина в грязевом растворе с хорошим санитарно-бактериологическим показателем. б) Приготовление ртутно-формазанового комплекса с пробой грязевого раствора, имеющего плохой санитарнобактериологический показатель. К 1 мл

Пример 2. a) Приготовленйе. г ртутно-фармазанового комплекса с пробой грязевого раствора, имеющего хороший са;итарно-бактериологическйй показатель. К 1 мл спиртового раствора реаген-. та 1- (хиноксалил-2 )-3-метил-5(41

f 1 I ,циметиламинофенил )-формазан концент- моль рации 10 - добавляют 0,1 мл вод-: ного раствора азотно-кислой ртути .-З моль концентрации 10 — —, затем 0,1 мп

40 гидролизованного, как указанного в примере 1, грязевого раствора с хорошим санитарно-бактериологическим показателем, добавляют буфер,.дово45 дят этиловым спиртом до 5 мл. Полу-. ченный раствор должен быть с рН 12,5.

Предварительно в контрольном растворе рН также устанавливают 12,5. Раст-. вор фотометрируют в тех же условиях, что и контрольный раствор: при Я

580 ммк, толщине поглощающего слоя 7 = 1 см. Найденное значение оптической плотности исследуемого раствора A a dA =A „,р -A<=0

55 что свидетельствует об отсутствии цистеина в грязевом растворе с хорбшим санитарно-бактериологическим показателем. спиртового раствора реагента концент- моль рации 10 " †- добавляют 0,1 мл растл вора азотно-кислой трути концентра-Э моль ции 10 -- — затем 0 1 мп гидролил

Э .зованного грязевого раствора с плохим санитарно-бактериологическим показателем (SH-группы присутствуют), 1О добавляют буфер, доводят этиловым спиртом до 5 мл. Полученный раствор должен иметь рН 5,5. Предварительно в контрольном растворе также устанавливают рН 5,5. Полученный раствор !

5 фотометрируют в тех же условиях, что и контрольный раствор: =580 ммк, 3 = 1 см. Найдено значение оптической плотности исследуемого раствора

А,, а А А =А„„, -А . Это значение

20 6А откладывают на оси ординат. Используя метод добавок, получают прямолинейный график, проходящий через точку А 0,17 в нашем случае и точку С . Абсолютное значение отрез25 ка ОС =3,6 мкг/мл выражает искомую концентрацию цистеина в растворе, Результаты преДставлены на чертеже.

1239564

Формула изобретения

С, МКг/мл.

Составитель С. Хованская

Техред Л.Олейник.Редактор В. Иванова

Корректор М.Пожо

Заказ 3388/42

Тираж 778 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5,Производственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул. Проектная, 4 б) Приготовление ртутно-формазанс ного комплекса с пробой грязевого раствора, имеющего плохой санитарно-бактериологический показатель.

К 1 мл спиртового раствора реагента концентрации 1О Моль добавл ляют 0 1 мл гидролизованного грязевого раствора и 0,1 мл раствора азотно-кислой ртути концентрации

-э. моль

10 †.--- добавляют буфер, доводят л этиловым спиртом до 5 мл. Полученный раствор должен иметь рН )2,5.

Предварительно в контрольном растворе также устанавливают рН 12,5.

Раствор фотометрируют в тех же условиях, что и контрольный раствор: ф = 580 ммк, М = 1 см. Найденное значение оптической плотности исследуемого раствора А, а Ь Аg =

А какч р А г Это значение h, А откладывают йа .оси ординат. Используя метод добавок, получают.прямолинейный график, проходящий через точку

ЬА =0,17 в нашем случае и точку С .

Абсолютное значение отрезка ОС„

= З,б мкг/мл выражают искомую концентрацию цистеина в растворе. Количество определяемого вещества в грязевом растворе с плохим санитарнобактериологическим анализом с учетом разведения исходного грязевого раствора (графическим способом) составляет 4,32 г/л

Результаты представлены на чертеже.

Предлагаемый способ позволяет повысить чувствительность определения до 0,32 мкг/мл (в известном способе

1,3. мг/мл) . !

1. Способ определения цистеина в водной среде путем обработки анализируемой пробы концентрированной минеральной кислотой при кипячении с последующей нейтрализацией, обработки азотно-кислой ртутью и спиртовым раствором производного формазана с последующим фотометрированием полученного раствора, о т л и ч а ю— шийся тем, что, с целью повышения чувствительности способа, в качестве кислоты используют соляную .кислоту, в качестве производного формазана — 1-(хиноксалил-2 )-Э-метилII

-5 (4 -диметиламинофенил)-формазан.

2. Способ по п. 1, о т л и ч а юшийся тем, что обработку спиртовым раствором производного формазана ведут при рН 5,5-12,5.