Способ определения лизоцима в лейкоцитах

Способ определения лизоцима в лейкоцитах

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

Изобретение позволяет повысить точность определения лизоцима (ЛЦ) в лейкоцитах путем приготовления мазков крови, нанесения на одну половину мазка 0,01% раствора гистамииа, на другую,- 0,2 М фосфатный буфер рН 7,2, инкубирования во влажной камере при комнатной температуре, всполас . кива1шя, высушивания и окрашивания фермента раствором анионного красителя амидочерный 10Б в конечной концентрации 0,05-0,15% в том же буфере . Ядро докрашивают 0,1% водным раствором азураЛ в течение 30 с и по разнице полуколичественного учета гранул на двух частях мазка рассчитьшают активность интралейкоцитарного ЛЦ. Табл.1.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ РЕСПУБЛИК (50 4 С 01 33/48

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

ГОСУДАРСТВЕЯЯЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ

Н А BTOPCH0MV СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 3757042/28-14 (22) 20.06.84 (46) 23.06.86. Бюл, Ф 23 (71) Томский ордена Трудового Красного Знамени государственный медицинский институт (72) Л.П. Бушмелева, В.В. Климов и Л.И. Огородова (53) 616.07 {088.8) (56) Sckolnik Kass-J. Histochem.

Cytochem, 1973,, v. 21. с,65,-72. (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЛИЗОЦИМА В

ЛЕЙКОЦИТАХ (57) Изобретение позволяет повысить точность определения лизоцима (ЛЦ).

„„SU„„1239597 А I в лейкоцитах путем приготовлеиия мазков крови, нанесения на одну половину мазка 0,017 раствора гистамина, на другую, — 0,2 И фосфатный буфер рН

7,2, инкубирования во влажной камере при комнатной температуре, всполас- . кивания, высушивания и окрашивания фермента раствором анионного красителя амидочерный 1ОВ в конечной концентрации 0,05-0,152 в том же буфере. Ядро докрашивают 0,17. водным раствором азураД в течение 30 с и по разнице полуколичественного учета гранул на двух частях мазка рассчитывают активность интралейкоцитарного ЛЦ. Табл,1.

1239597

Изобретение относится к области ,медицины, а именно к клинической медицине.

Целью изобретения является повышение точности способа эа счет окраски фермента раствором анионного красителя амидочерного 1ОБ.

Способ осуществляется следующим образом.

Свежеприготовленный, .высушенный на воздухе мазок крови фиксируют спнртово-формалиновым раствором (9:1) в течение в течение 30 с, расчерчивают продольно на две части, затем на-1/2 мазка, располагающегося горйзонтально, наносят 0,01 -ный раствор гистамнна, на другую часть0,2 И фосфатный буфер рН 7,2, инкубируют во влажной камере при комнатной температуре 30 мин, всполаскивают, высушивают, опускают на 60 мин в раствор анионного красителя амидочерного 10Б в конечной концентра ции 0 05-0,15 . в том же буфере. Ядра докрашивают 0,1 -ным раствором азура Й в течение 30 с, по разнице полуколичественного учета гранул на двух частях мазка рассчитывают активность интралейкоцитарного ЛП.

2.

11редлагаемый способ дает возможность диагностировать первичные и вторичные дефициты интралейкоцитарного ЛЦ вЂ” параметра, который в отличие от сывороточного показателя более достаточно отражает состояние естественной защиты организма, характер течения вспомогательного заболевания, его возможные исходы, целе10 сообразность дополнительной биологической стимуляции, В таблице приведен сравнительный анализ положительного эффекта от применения амидочерного 10Б и извест1 ного красителя. Из таблицы видно, что при использований прочного зеле- . ного нет возможности получения достоверных данных с их .полуколичественной оценкой.

Формула изобретения

Способ определения лиэоцима в лейкоцитах путем приготовления мазков . крови с последующей окраской их кис" лым цитохимическим красителем, о тл и ч а ю шийся .тем, что, с целью повышения точности способа, в качестве красителя используют амидочерный 1ОБ в конечной концентрации

ЗО 0 05-0 15, l239597

3 л

А f

Е

О о °

Х 1-(В! Ф (»!

1

I ..

1!! л

СЧ

И

О л

СЧ

О сп Ю

Ю О л вт са

1 а ж

I ф

fl!

00

О л

О л

О

О!!

Ю л СФ) а ч О!

С! . л л

О (/\ л л

I. I

СЧ л

О (7

О л

О л О

О СО п л

Ю м о

О1 СЧ . CV л л

О СЧ ю

С ) л

СЧ м л л

Ю п

Ю

С Ъ . л

Ю а а о

Ф л

Ф i

U ca о м

С! л

СЧ .

М СЧ л О л ° \

1

Р1

СГ) л

О. со

Ю о

I м м \

С (л! л ° \, CO!

С!

СЧ л л

О л

C) I

y o

Ы (el о фи

Ц !о !» м

О1 Р ) л

СЧ

Ф л

СЧ! ж !

» ф !

" и

1

И

3 ж ж ф ф. о

Ц

Ф к

О

О

Ю!

1

I .I !

a! I 3 1

Р 14

I P 1

xl ex

ca I са1 Оф

ВВ I. !О I 14 1 .1 Ю I. I

ca u

I I !О М I

I I Ü Г» Х и о

1 О g I

1 Ж I

I 85 14Е

Ф I 1

N ) 1

1

Р I Ф cD о в к о.ж

1 И Ж ф 1 1

14 1 1

U 1 1 ф 1 1 а l 1

Ф

Ф

Ц

0I !!! о а о

В .

С0 н

О Ю М

vi

Ю л л

П О СЧ

Щ

О В М

° CCc ь л л

-ч О .сч о а

U Ф о Ф .Ж. 4 !В к Ф о ж

S4 I»

Я !

В о о

В