Способ определения адекватных физических нагрузок у спортсменов
Иллюстрации
Показать всеРеферат
Изобретение относится к медицине . Цель изобретения - повышение точности способа. Для выявления спонтанных розеткообразующих лимфоцитов (Т-РОК) и нейтрофилов () взвесь лейкоцитов смешивают с взве; с ью эритроцитов барана. Эту смесь инкубируют,центрифугируют,выдерживают в холодильнике в течение I ч при+6 Си фиксируют глутаральдегидом. Смесь центрифугируют. Осадок переносят на стекло, делают мазок. Фиксируют его и окрашивают азур-эозином. Готовят мазки для выявления комплементарных розеткообразующих лимфоцитов (В-РОК) и нейтрофилов (N(.-POK). Подсчитывают количество розеткообразукяцих клеток. Оставшиеся клетки, которые не принимали участие в розеткообразовании, считали нулевыми лимфоцитами (Лд), и нулевыми нейтрофилами (N). При значениях Т-РОК 14661118, В-РОК 455 :33;-Ng-POK 2063tl99, Nc-POK 549t46; Л 146128; N,, 1123±100 определяют адекватную нагрузку для спортсмена , а при снижении показателей относительно нормы определяют неадекватную нагрузку. . с (Л 4а 05
СОЮЗ СОВЕТСКИХ
СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ
РЕСПУБЛИК
„„SU„; 246009
А1 (512 4 0 01 Й 33 80
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
К ABTOPCHGMV СВИДЕТЕЛЬСТВУ
E «
I
ГОСУДАРСТ8ЕННЫЙ НОМИТЕТ СССР
ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ (21) 3810736/28-14 (22) 14.08.84 (46) 23.07.86. Бюл. N - 27 (71) Центральный научно-исследова— тельский институт вакцин .и сывороток им. М.И. Мечникова и Центральный кожно-венерологический институт (72) И. В. Петрова, С. Н. Кузьмин, Р. С. Суздальницкий, Б. Б. Першин, В. А. Левандо, Т. С. Куршакова, Л. Л. Васильева и Е. В. Коваленко (53) 613.731(088.8) (56) Авторское свидетельство СССР
11 940745, кл. А 61 В 1 О/00, 1 982 . (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АДЕКВАТНЫХ
ФИЗИЧЕСКИХ НАГРУЗОК У СПОРТСМЕНОВ (57) Изобретение относится к медицине. Цель изобретения — повышение точности способа. Для выявления спонтанных роэеткообразующих лимфоцитов (Т-POK) и нейтрофилов (N -РОК) взвесь лейкоцитов смешивают с взве—. cbIo эритроцитов барана. Эту смесь инку- бируют,центрифугируют,выдерживают в о холодильнике в течение I ч при+6 Си фиксируют глутаральдегидом. Смесь центрифугируют. Осадок переносят на стекло, делают мазок. Фиксируют его и окрашивают азур-эоэином. Готовят мазки для выявления комплементарных розеткообразующих лимфоцитов (В-POK) и нейтрофилов (Nc -POK). Подсчитывают количество розеткообразующих клеток.
Оставшиеся клетки, которые не принимали участие в розеткообразовании, считали нулевыми лимфоцитами (Л ), и нулевыми нейтрофилами (N,). При значениях T-POK 1466 118, В-РОК
455- 33; М -РОК 2063 199, Nc РОК
549 46; Л, 146 28; N 1123+100 определяют адекватную нагрузку для спортсмена, а при снижении показателей относительно нормы определяют неадекватную нагрузку.
1246009
Изобретение относится к медицине и касается способов иммунодиагностики экстремальных состояний человека.
Цель изобретения — повышение точности прогнозирования адекватных физических нагрузок у спортсменов.
Определяют число Т- и В-лимфоцитов, спонтанных (Ьз) и комплементарных нейтрофилов N, а также число лимфоцитав (Л„) и нейтрофилов (N,), не вступающих в реакцию розеткообразования, и прн значениях T-POK 1466+
+118,. В-POK 455"33, И -POK 2063+199, Ng РОК 549+46, Л,146 28, М,, 1223+100 определяют адекватную нагрузку для спортсмена, а при снижении данных показателей относительно нормы — неадекватную нарузку.
Способ осуществляется следующим .образом. I
В пробирки с 75 NE гепарина забирают 3 мл крови из локтевой вены, затем добавляют 1 мл 3%-ного раствора желатина и выдерживают при комнатной температуре в течение 40-45 мин для осаждения эритроцитов. Надосадочную жидкость отсасывают в силиконированнь|е пробирки, добавляют среду 199, содержимое пробирки перемешивают и центрифугируют при 7501000 аб/мин в течение 5 мин. Осадок еще дважды отмывают средо" 199 подсчитывают количество лейкоцитов в камере Горяева и доводят до концентрации 2Х10 кл/мл.
Для выявления спонтанных розеткообразующих лимфоцитов (Т-POK) и нефтрофилов (Nq-РОК) 0,1 мл получен.ной взвеси лейкоцитов смешивают с
0,1 мл 0,4%-ной взвеси эритроцитов барана, которые предварительно отмывают 3 раза физиологическим раствором. Полученную смесь инкубируют о
5 мин при 37 С в термостате, центрифугируют 5 мин при ?50-1000 об/мин и выдерживают в холодильнике в тече4 ние 1 ч при +6 С. Затем в течение
20 мин фиксируют глутаральдегидом, который добавляют в конечной концентрации 0,6%. После этого смесь заливают дистиллированной водой, пипетируют и центрифугируют 5 мин при 7501000 об/мин. Насадочную жидкость сливают, а осадок переносят на предметное стекло и делают мазок, который высушивают при комнатной температуре, фиксируют 10 мин в метиловом спирте и окрашивают азур-эоэином., 5 l0
l5
Для выявления комплементарных роэеткообразных лимфоцитов (В-POK) и нейтрофилов (И -РОК) 0,1 мл взвеси лейкоцитов (2х10 кл/мл) смешивают с
6 о,1 мл 0,5%-ной взвеси аллогенных эритроцитов, которые предварительно сенсибилизируют кроличьей антисывороткой к эритроцитам человека в субагглютинирующем разведении и комплементом в разведении 1:10. Смесь ино кубируют 5 мин при 37 С, центрифугируют при 750-1000 об/мин в течение
5 мин и фиксируют глутаральдегидом
20 мин. Фиксацию и окраску мазков проводят аналогично спонтанному розеткообразованию.
Подсчет роэеткообразующих клеток проводят под имерсионной системой микроскопа при увеличении OKxlO
ОБх60. Просчитывают 200 лимфоцитов и 200 нейтрофилов, вычисляют из них процент розеткообразующих и, исходя из общего количества лейкоцитов и формулы крови, производят пересчет на абсолютные числа. Оставшиеся клетки, которые не принимают участия ни в спонтанном, ни в комплементарном розеткообразований, считают нулевыми лимфоцитами (Л ) и нулевыми нейтрофилами (N,).
Пример. Спортсмен М. А. Г., l9 лет, студент, спортивный стаж превышает 3,5 года, кандидат в мастера спорта, противопоказаний к участию в соревнованиях не имеет. Обследование в процессе тренировок при аэробно-анаэробном энергообеспечении выявило резкое уменьшение числа нулевых лимфоцитов и нейтрофилов которое для Л составляет 53, а для N 72 в l мкл крови. Участие в соревнованиях этого спортсмена привело к полному исчезновению как Л,, так и N, все лимфоциты и нейтрофилы у него стали розеткообразующими. Количество Т-POK составляет 910, ВРОК 38, N -POK 98, 11, -РОК 51. Сделан вывод о срыве адаптационно-приспособительных механизмов имунной системы, что в дальнейшем подтвердилось, ибо продолжение тренировочных занятий вместо рекомендованного значительного снижения объема и интенсивности привело у этого спортсмена к исчезновению из крови В-лимфоцитов и резкому снижению числа Т-лимфоцитов, их число было всего 610 в 1 мкл крови, что в 2 раза ниже, чем у здорового человека
1246009
Составитель Л. Артюшина
Редактор Н. Яцола Техред О.Сопко корректор М, Пожо
Заказ 3993/37 Тираж 778 Подписное
ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий
113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5
Производственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород. ул. Проектная, 4 без физических нагрузок. Спортсмен временно отстранен от участия в соревнованиях, у него обострился кариес с кистогранулемой. Параллельно с лечением кариеса проведена иммунокоррегирующая терапия.
Формула изобретения
Способ определения адекватных фиI зических нагрузок у спортсменов путем иммунологического исследования крови, отличающийся тем, что, с целью повышения точности способа, у пациента определяют число T- и В-лимфоцитов, спонтанных и комплементарных нейтрофилов, а также число лимфопитов и нейтрофилов, не вступающих в реакпию розеткообразования и при значении Т-POK 1466 -118, В-POK 455- 33, Б8-POK 2063+1.99, 11с-POK 549 46, Л 146 - 28 Ng 1123»100
1О определяют apeKBB ную нагрузку для . спортсмена, а при сн гкении данных показателей относительно нормы определяют неадекватную нагрузку.