11-дезокси-17 @ -окси-21- @ п-ди(2-хлорэтил) аминофенилацетат @ кортикостерон,проявляющий противоопухолевую активность

11-дезокси-17 @ -окси-21- @ п-ди(2-хлорэтил) аминофенилацетат @ кортикостерон,проявляющий противоопухолевую активность

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

11-Дeзoкcи-17(i-oкcи-21- м-ди(2-. -хлорэтил)аминофенилацетат -кортикостерон формулы сн,-ососн -он CH CHjCl (Л CHgCHjCl

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (594 С 07 Л 5/00 А 61 К 31 565

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Н А ВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

Авторское свидетельство СССР

Р- 391790, кл. А 61 К 17/00, 1971.

Ларионов Л.Ф., Софьина 3.П., Лагова Н.Д., Шкодинская Е.Н. Вопросы онкологии XIV, 1968, вып. 11, 61.

А.Nittelman et all. Cancer.

Chem. Rep, 1975, 59, 219. (54) 11 — ДЕЗОКСИ-17оС-ОКСИ-21-(h-ДИ(2-ХЛОРЭТИЛ)АМИНОФЕНИЛАПЕТАТ)-КОРТИКОСТЕРОН, ПРОЯВЛЯКЩИЙ ПРОТИВООПУХОЛЕВУЮ

АКТИВНОСТЬ (57) 11-Дезокси-17Ф-окси-21- (н-ди(2-.

-хлорэтил)аминофеннлацетат) -кортикостерон формулы

Сн, Сн,С1

СН2-ОСОСН2 У

С=о Сн, Сн, el

-ОН

Ф \

° °

° °

Ъ проявляющий противоопухолевую актив- ность.

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (21) 2795750/23-04 (22) 11,07.79 (46) 07.08.86. Бюл. N - 29 (71) Онкологический научный центр

АМН СССР . (72) К,Н,Курдюмова, Е.Н.Шкодинская, Л.П.Сушинина, В.П,Ягужинская, Н.Д.Лагова, З,П.Софьина, И.М.Валуева, П.В.Лопатин, M.А,Краснова, А.Б.Сыркин и Л.М.Михайлова (53) 547.689.6(088.8) (56) Шкодинская Е.Н., Курдюкова Е.M.

Васина О.С., Берлин А.Я. ЖО, 1962, 32, вып. 3, 959.

SU 1249022 А 1

1 1? 49022 2

Изобретение относится к химическим -дезокси- 17-g-окси-21-(-ди(2-хлорсоединениям, проявляющим противоопу- этил)аминофенилацетат)-кортикостерохолевую активность, а именно к 11- ну формулы

0»

Известны сложные эфиры -ди(2-хлорэтил)аминофенилуксусной кислоты (хлорфенацила) и стеринов (11, стероидных гормонов (2), или их синтетических аналогов (3j .

Некоторые соединения иэ группы гормбноцитостатиков, такие как эстрацит эстра-1,3, 5(10)-триен-3, 17J-диоль.

"З-Бубис(2-хлорэтил)карбамат1-17-, 25

-динатрий фосфат и преднимустин (прегна-1,4-диен-3,20-дион, 11Р

17, 21-.триокои-21- (4-(Ü-Ли (2-хлоре тип) амииофеиил) -Ортират) имеют примеиение в онкологической клинике j4) .

СН2(Н2С1 сн;- a(,01! H

2 2 сн, с=о — ОН.

О ми методами, а также данными ИК-, УФ- и ЯМР-спектров.

Фенкорон проявляет в экспериментальных условиях высокую противоопухолевую активность на ряде моделей опухолей, ° в том числе и на гормоночувствительных опухолях.

Предлагаемое соединение можно получить различными методами — хлорангидридным, ангидридным, а также методом смешанных ангидридов.

Выход продукта (фенкорона) в зависимости от метода его получения приведен в табл, 1.

Синтезированный химическим путем

11-дезокси-17-Ы-окси-21-(h-ди(2-хлорэтил)аминофенилацетат)-кортикостерон (фенкорон) .представляет собой

\ белый с желтоватым оттенком кристаллический порошок с Т„„103-105 С, Препарат практически нерастворим в воде, эфире, мало растворим в спирте, растворим в хлороформе, легко растворим в бензоле и этилацетате. Фенкорон не гигроскопичен, при длительном хранении на .свету приобретает желтую окраску.

Структура фенкорона подтверждена данными микроанализа, идентичностью препарата, полученного тремя разныЭкспериментальные данные показывают, что соединения такого типа проявляют как противоопухолевую, так и гормональную активность, сохраняя специфическое действие именно того гормона, который входит в их молекулу, Цель изобретения — изыскание новых химических соединений, обладающих противоопухолевой активностью.

Поставленная цель достигается химическим соединением 11-дезокси-17- -окси-21 в jv- ди(2-хлорэтил)аминофенилацетат) -кортикостероном формулы

Таблица 1

Метод получения Выход, %, в расчете а гормон на хлорфенацил

1249022 4 бензол — этилацетат (3:2) на пластинах sxlufoluv 254.

Отгоняют растворитель в вакууме и кристаллизуют конечный продукт из эфира, Выход 3,5 г (41,6%. в расчете на исходный гормон или 34,8% в расо чете на хлорфенацил, Т и„ 103-105 С

Хлорангидридный

11,4-231 0 10 ° 0 19ю 2

48,4-62,5 23,0-29,6

Ангидридный

Смешанных ангидридов

38,7-43,8 33,0-36,5

Получение смешанного ангидрида

25 проводят в среде апротонного раствоо рителя, например бензола, при 5 С в присутствии молярного количества триэтиламина. Смешанный ангидрид вводят в реакцию ацилирования оксигруппы в боковой цепи 11-дезокси-1730

-и,-оксикортикостерона.

Пример. 9,6 г (0,035 г/моль) хлорфенацила растворяют в сухом бензоле и прибавляют 3,52 г (4,8 мп, 0,035 г/моль) триэтиламина и 4,28 г 35 (4,3 мл, 0 035. г/моль) хлорангидрида изовалериановой кислоты при 5 С.

Реакционную массу перемешивают при 5 С в течение двух часов, после чего прибавляют 100 мл сухого ацето- 40 нитрила,и 10,0 r 11-дезокси-17-4-оксикортикостерона (0,028 г/моля). Реакционную массу нагревают 11 ч при

80 С, прибавляют 100 мл бензола и промывают органический слой после- 45 довательно водой, 10%-ным раствором бикарбоната калия и опять водой.

Отделяют органический слой и высушивают безводным сульфатом натрия, отгоняют растворитель в вакууме при 50 температуре не вьппе 50 С досуха. о

Остаток растворяют в бензоле и наносят на колонку, заполненную силикагелем. Злюируют смесью бензол— этилацетат (6: 1). Отбирают фракции, содержащие 11-дезокси-17-Ы-окси-21-(и-ди(2-хлорэтил)аминофенилацетат)—

-кортикостерон с R< 0,50 в системе

Лучшие результаты в расчете на хлорфенацил дает метод смешанных ангидридов, основанный на реакции аци- 2р лирования стероидного оксисоединения смешанным ангидридом хлорфенацила и изовалериановой кислоты, (с разложением).

Вычислено, %: С 65,55; Н 7,16;

С1 11,73.

Найдено, %: С 65,44; Н 7,12;

С1 11,56.

С з) 4 С1 110

УФ-спектр (в спирте):Амс ?56 нм, Е 1%, 1 см 440, ИК вЂ спек (в KBr), 3, см : 1742, 1236 (С-О сложный эфир); 1722, 1652 (1 С-О), 1618, 1519 (C6H 6)

1155 (С-ОН): 803 (3„ = С Н ); 654, 740 (3 С-С1).

ПМР-спектр (в СЭС1 при ?0 C), м.д.: 7,20, 6,65 (ароматический мультиплет); 5,71, синглет (С4Н), 5, 13, 483, дублеты IAB — 17,6 Гц, (С 2Н), 3,64/ОН, С 2Н; 1,16, 0,69, синглеты (С ЗНу С 93Н) .

Для исследования биологической активности используют мышей линии

DBA/2, СВА, BALB/с, С,В1, гибридов первого поколения ВЭР„ (С В1 DBA/2), г а также беспородных крыс. Противоопухолевую активность изучают на лимфобластном лейкоэе T., аденокарциноме г е толстой кишки АКАТОЛ, плоскоклеточном раке преджелудка ПРЖ, раке шайки матки РШМ-5, аденокарциноме молочной железы Са-755, саркоме С-37 мьппей, а также на альвеолярном раке молочной железы РМЖ-1 беспородных крыс. В некоторых опытах используют спонтанные опухоли молочной железы беспородных машей (SHK). Лечение начинают через

48 ч после перевивки опухоли. Лечение спонтанных опухолей начинают, когда средний размер опухоли составляет не менее 3000 мм . Препарат вводят в оливковом или косточковом масле подкожно ежедневно в течение 5 дн.

После окончания лечения продолжают наблюдение эа ростом опухолей и состоянием животных до их гибели, Противоопухолевый эффект оценивают IIo из< вестной методике. первичного отбора потенциальных противоопухолевых препаратов.

Изучение противоопухолевой активности фенкорона показывает, что пре, парат в разовых дозах 10-50 мг/кг после

S i с490

5-кратного курса введения оказывает ны сокое противоопухолевое действие на

Са-755, АКАТОЛ, РШИ-5, С-37 (72-98Х торможения роста опухоли) и спонтанные опухоли молочной железы мышей (уменьшение размеров на 25% по сравнению с исходным) . Фенкорон малоэффективен при лимфолейкозе Е и не действует на штамм ПРЖ. Чувствительность опухолей к фенкорону не зависит от их чувствительности к компонентам молекулы препарата: хлорфенацилу и 11-дезокси-i7-К-оксикортикостерону.

Оптимальная ежедневная терапевтическая доза фенкорона для мышей при 15

5-дневном курсе введения определена, равна 10-20 мг/кг (в зависимости от вида опухоли) .

Проведено сравнивательное изучение противоопухолевой активности фенкоро- 20 на с гормоноцитостатиком дистроном (21.

Дистрон является производным гормона дигидротестерона. Фенкорон отличается от дистрона по спектру противоопухолевого действия, сила и длительность 2Ç противоопухолевого действия у фенкорона превышает активность дистрона (табл. 2). Эти данные получают на штамме Са-755 и спонтанных опухолях молочной железы мьппей. 30

При сравнении противоопухолевой активности фенкорона и дистрона на спонтанных опухолях молочной железы мьппей обнаружено, что фенкорон актиВен на этой модели опухоли при приме З5 нении в двух режимах: 15 мг/кг еже" дневно в течение 5 дн. и 20 мг/кг через день в течение 6 дн., а дистрон активен только в одном режиме: 30 мг/кг через день в течение 6 дн. 40

На спонтанных опухолях молочных . желез мьппей установлено также, что особенностью фенкорона является эффективность при повторном курсе вве" дения (большинство химиотерапевтичес-45 ких препаратов мало эффективны при

:повторных, введениях) °

При изучении гормональных свойств фенкорона обнаружено, что препарат сохраняет специфическое глюкокорти- gp коидное действие соответственно природе кортикоидного ряда гормонов.При

22 6 определенном режиме применения фенкорон увеличивает продолжительность жизни 25-дневных адреналэктомированных крысят (биологический тест на глюкокортикоидную активность) в той же мере, как и вхопящий в его молекулу 11-дезокси-17-d. — oêñè-кортикостерон (соответственно на 113 и 115X)

Другой особенностью гормонального действия фенкорона является возможность его метаболизма по типу стероидов эстрогенного ряда.

Показателем эстрогенной активности фенкорона в терапевтических дозах является отчетливая 2-4-дневная течка у кастрированных самок мьппей и крыс, наблюдаемая при действии синэстрола в дозе 0,5 мг/кг. Полученные данные показывают, что фенкорон отличается от гормоноцитостатика дистрона специфичностью гормонального действия.

Побочное действие фенкорона на организм проявляется в уменьшении массы кроветворных органов (тимуса и селезенки) и массы легких у крыс, но эти изменения обратимы и не наблюдаются через месяц после окончания введения препарата.

Для определения МПД и ЛД 5р фенко рон в этилолеате вводят мышам-самкам

SHK однократно подкожно в дозах 750, 500, 250, 125, 100, 63 и 50 мг/кг.

Величины КЯ и ЛД р найдены методом интерполяции по методу Литчфильда и Уилкоксона и определены соответственно равными 45 и 86 мг/кг, для дистрона они составляют 200,и

433 мг/кг, а для хлорфенацила 15 и

24 мг/кг соответственно. Таким образом, фенкорон обладает в 3 раза меньшей токсичностью, чем хлорфенацил.

Данные о том, что ИПД при однократном введении в три раза выше, чем разовая курсовая доза, показывают, что фенкорон не обладает кумулятивным действием, что является положительным свойством препарата

Результаты сравнения противоопухо-. левой активности фенкорона и дистрона приведены в табл. 2 и 3.

12490-?2

Таблица 2

Доза, мг/кг/

/интервал, ч х число введений

Торможение роста Са-755 после курса лечения, %

Соединение

Увеличение на на на

1 день 6 день 16 день

69 99 98

Феяк ор о н

65

79 с 7-го дня после перевивки

25/24 х 5 85 38

19

Дистрон

Таблица 3

Соединение

Уменьшение или увеличение (+) размеров спонтанных опухолей молочных желез после курса лечения, 7 на на на

9 день 23 день 36 день

+330

+156

+42

Контроль

Фенкорон

15/24 х 5* 37

+64 50

20/48 х 6 Оста- +70 новка роста

25/24 х 10 +50

-30

+200 +390

Дистрон 30/48 х 6 Остановка роста

Два курса с 20-дневным интервалом, **

Знак {-) означает уменьшеиие продолжительности жизни.

Таким образом, результаты изучения биологической активности фенкорона позволяют характеризовать его, как . активный противоопухолевый препарат, 4

50 обладающий широким спектром противоопухолевого действия, а также длительностью противоопухолевого действия и меньшей токсичностью по сравнению с хлорфенацилом.

BHHKlH Заказ 4197/25 . Тираж 343 Подписное

Произв.-полигр. пр-тие, г. Ужгород, ул. Проектная, 4

15/24 х 5

15/24 х 5

Доза, мг/кг/

/интервал, ч х число введений продолжительности жизни, 7

Увеличение продолжительности жизни, Ж