Способ диагностики гломерулонефрита у детей
Иллюстрации
Показать всеРеферат
Изобретение относится к нефрологии . Цель изобретения - повышение точности диагностики путем определения в моче холинэстеразы. Расчет активности холинэстераэы мочи проводят на ммоль креатинина .данной порции мочи. Определение креатинина в моче проводят на приборе ФЭК при 500-510 им следующим образом: в три кюветы добавляют по 0,5 мл цветного реактива. В 1-ю кювету добавляют 1,0 мл дистиллированной воды, во 2-ю - 1,0 мл стандартного раствора, в 3-ю - 1,0 мл исследуемой мочи. Пробы перемешивают, инкубируют. Измеряют адсорбцию креатинина мочи по отношению к контрольной и стандартной кюветам. При нефротической форме гломерулонефрита (ГН) активность холинэстеразы мочи 0,6-9,0 Е/ммоль креатинина. При смешанной форме ГН значение этого показателя колеблется от 15,0 до 49.0 Е/ммоль креатинина. g (О ю ел IND IS9 00
СОЮЗ СОВЕТСКИХ
РЕСПУБЛИН 5ц 4 G 01 N 33/68
f (@A/
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
К А ВТОРСКОМ,Ф СВИДЕТЕЛЬСТВУ
ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР
ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (21) 3711019/28-14 (22) 16. 01. 84 (46) 23.08.86. Бюл. Ф 31 (71) Московский ордена Трудового
Красного Знамени научно-исследовательский институт педиатрии и детской хирургии Министерства здравоохранения РСФСР и Институт сердечно-сосудистой хирургии им. А.Н. Бакулева (72) В.В.Длин, В.В. Фокеева н Б.И. Жш1енко (53) 616.07 (088.8) (56) Вестник Академии медицинских наук СССР, 1972, с. 50-55. (54) СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ГЛОМЕРУЛОНЕФРИТА У ДЕТЕЙ (57) Изобретение относится к нефрологии. Цель изобретения — повышение точности диагностики путем определения в моче холинэстеразы.
„„80„„1252728 A 1
Расчет активности холинэстераэы мо чи проводят на ммоль креатинина .данной порции мочи. Определение креатинина в моче проводят на приборе ФЭК при 500-510 нм следующим образом: в три кюветы добавляют по
0,5 мл цветного реактива . В 1-ю кювету добавляют 1,0 мл дистиллирован. ной воды, во 2-ю — 1,0 мл стандартного раствора, в 3-ю — 1,0 мл исследуемой мочи. Пробы перемешивают, инкубируют. Измеряют адсорбцию креатинина мочи по отношению к контрольной и стандартной кюветам.
При нефротической форме гломерулонефрита (ГН) активность холинэстеразы мочи 0,6-9,0 Е/ммоль креатинина.
При смешанной форме ГН значение этого показателя колеблется от 15,0 до 49.0 Е/ммоль креатинина.
1252728
1О
Иэобрет ние относится к медицине, точнее к нефроло гни, Цель изобретения — повышение точности при дифференциальной диагностике нефротической и смешанной форм гломерулонефрита (ГН) с помощью оценки степени нарушения проницаемости гломерулярных мембран за счет определения активности в моче холин— эс "еразы.
Способ осуществляют следующим образом.
Для исследования используют разовую порцию мочи, которую подвергают предварительному пентрифугированию (5 мин, 3000 об/мин) и цнухчасоному диализу с помощью диализных .мешочков (1 мл мочи на 20 мл физиологического раствора). Определение активности холинэстераэы (ХЭ) мочи проводят известным оптимизированным кинетическим методом. Для проведения одного исследования берут
1,0 мл 50 мМ фосфатного буфера, содержащего 0,24 мл 5,5-дитио-бисвЂ(2-нитробензойная к-та), рН 7,2 и добавляют 0,05 мл предваритель-, но подготовленной мочи, размешивают, о подогревают до 37 С. После этого добавляют 0,1 мл субстрата бутирилтиохолиниодид (готовят из расчета
24,4 мг на 1 мл дистиллированной ноды), размешивают и производят измерение или оптимизированным кинетическим методом на аппарате ЛКБ, или на приборе Спектроник при
405 нм. Расчет активности ХЭ мочи йроводят на 1 ммоль креатинина данной порции мочи и выражают в Е/ммоль креатинина. Определение креатинина в моче проводят на приборе ФЭК при
500-510 нм. Определение проводят следующим образом: в 3 кюветы добавляют по 0,5 мл цветного реактива (9 ч. пикриновой кислоты и 1 ч гидроксида натрия), затем в первую кювету добавляют 1,0 мл дистиллированной воды (контрольная проба), во вторую — 1,0 мл стандартного раствора (10 ммоль/л, стандартная проба), н третью — 1,0 мл исследуемой мочи, предварительно разведенной в
500 раэ дистиллированной водой; пробы перемешивают, инкубируют 20 мин при комнатной температуре. Измеряют абсорбцию креатинина мочи по отношению к контрольной и стандартной кюветам.
При нефротической форме ГН понреждение гломерулярной мембраны минимально и активность ХЭ мочи 0,69,0 Е/ммоль креатинина, при смешанной форме 1 Н отмечается выраженное нарушение проницаемости клубочконой мембраны, активность ХЭ мочи колеблется от 15,0 до 49,0 Еlммоль креатинина.
Пример 1. Больной К., 1974 года рождения. Клинический диагноз: ГН, смешанная форма, непрерывно рецидинирующее течение, А III, ПН, а.
Болен 4 года. Заболевание началось остро, через 7 дней после перенесенной ангины в ниде общих отекон, гипертенэии (АЛ до 180/140), смешанного моченого синдрома в виде протеинурии, микрогематурии и лейкоцитурии. Заболевание носило прогрессирующий характер. При поступлении состояние тяжелое, выражен общий отечный синдром, гипертензия.
В крови ныявлена гипопротеинемия, диспротеинемия н виде гипер-а.-глобулинемии и гиперлинидемии, отмечалось повышение азота мочевины до
28 ммоль/л и снижение клиренса эндогенного креатинина до 0,65 мл/с.
Суточная потеря белка в моче колебалась от 3,3 до 33 r. Селектинность протеинурии проводилось электрофоретическим методом на бумаге. У ребенка протеинурия этим методом определена как селективная. Параллельно проводят исследование активности мочи оптимизированным кинетическим методом. Для исследования используют разовую порцию мочи, собранную с 8 до 9 ч утра. В течение 5 мин мочу подвергают центрифугированию при 3000 об/мин. В течение 2 ч 2 мл мочи поднер гают диализу с помощью диализных мешочков протин физиологического растнора. Затем к 1,0 мл
50 мМ фосфатного буфера, содержащего 0,24 мл 5,5-дитио-бис-(2-нитробензойная к-та), рН 7,2 добавляют
0,05 мл диализированной мочи, размешивают, подогревают до 37 С. После о этого добавляют 0,1 мл субстрата бутирилтиохолиниодид (готонят из расчета 24,4 мг на 1 мл дистиллированной воды), размешивают и проводят ,измерение при 405 нм на приборе ЛКБ.
Параллельно проводят определение креатинина в данной порции мочи. Для
3 1252728 4 этого в 3 кюветы добавляют по 0,5 мл селективная. Исследование активности цветного реактива (9 частей пикрино- ХЭ мочи, пронедекное предлагаемым вой кислоты и 1 часть гидроксида методом, ныянило умеренно выраженное натрия), затем в первую кювету добав- нарушение проницаемости гломерулярляют 1,О мл дистиллированной воды 5 ного фильтра — 15 Е/ммоль креатинина во вторую — 1,О мл стандартного (корма О, 1 + О, 01 Е/ммоль креатинираствора и в третью — 1,О мл исследу- на) . Морфологическое исследование емой недиализированной мочи, предва- почечной ткани показало что у ребеналоэ рителько разведенной в 500 раэ дис- ка имеет место мембрако-пролифератиллированной водой. Пробы перемеши- !р тинный ГН с фокальным гломеруловают, инкубируют 20 мин при комнат- склерозом и б ту улеинтерстициальным ной температуре. После этого изме- компокектом. Таким образом выявлен1 ряют абсорбцию креатиника мочи по ное умеренное наруш ое умеренное нарушение проницаемосотношению к контрольной и стандарт- ти гломерулярного фильтра предланой кюветам на приборе ФЭК при 500- <5 ???????????? ???????????????? ?????????? ?????????????????? ????510 ????. ???????? ?? ?? ???????????????????? ???? ???????? ???????????? ?????????????????????????????? ?????????????????? ?? ???????????????? ?? ?????????????? ???? ?????????? ????????????- ???????????????? ?????????? ???? ?????????????????? ?? ???????????? ???????????? ???????????? ????????. ???????????????????? ??????????????. ?????????????????? 48 ??> 0,01 Е/ммоль креатинина). 2Р 1969 года рождения. Клинический диаг.
Таким образом у ребенка выянлено ноз: ГН, нефротическая форма, А III резкое нарушение проницаемости гло- . ПН а.
2 мерулярного Фильтра, что соответ- года. а олевание раэвиствовало клинико-лабораторной кар- налось постепенно с появления отека тине заболевания. Очень высокие и протеинури и протеинурии после переохлаждения. цифры активности ХЭ указывали на При поступле ри поступлении "остояние тяжелое, неблагоприятное течение заболевания выражен оте чныи синдром. В крови что подтвердилось в дальнейшем гипопротеинемия, диспротеинемия н прогрессирующим течением заболена- виде гипер-а -глобули улинемии, гиперния, которое закончилось летальным Зр холестеринемии мии, отмечалось повышение исходом ° азота мочевины до 21,4 ммоль/л и
Предлагаемый способ диагностики снижение клире с клиренса эндогенного креатипо сравнению с известным характе- о, мл с. уточная потеря нина до О 87 / . С белка до 15,6 г, протеинурия селекризуется большей точностью.
Пример 2. Больной
p ° os HoA A° .1, 35 тинного характера. Исследование ак1968 года о ения. К ини д р жд я. К инический ди- тивности ХЭ, проведенное предлагаеагноз: ГН смешанная фо ма волноЭ мым способом, выявило умеренное наобраэное течение. А ?1 ПН а. в рушение проницаемости гломерулярБолен 13 лет. Заболевание нача- ного фильтра. Активность ХЭ не прелось остро через 2 недели после пе- 4р вышала 9,0 E/ììoëü креатинина.4иагренесенной пневмонии в виде мочево- ностируют нефротическую форму ГН.
I го синдрома, который с самого нача- Пример 4. Больной В., ла носил смешанный характер, отме- 1968 года рождения. Клинический чался выраженный отечный синдром и диагноз: ГН, нефротическая форма, гипертензия (АД до 180/120) . Заболе- 45 А III ПН ,а. ванне носило прогрессирующий характер. При поступлении в кликику сос- Б олен ч года. Начало постепенное таяние тяжелое, выражен отечный с появления отеков, протеинурии. синдром, гипертекзия. В крови выяви- П ри поступлении состояние средней лись гипопротеинемия, диспротеинемия 5р тяжести, выражен отечный синдром. н виде гепер-а,-глобулинемии, ги- B крови гипопротеинемия, диспротеиперхолестерикемии, отмечалось повы- немия в виде гипер-а,-глобулинемии шение азота мочевины и снижение кли2 " °, гиперхолестеринемии, отмечалось лоренса эндогенного креатинина до вьппение азота моченины до 15,4 ммоль/л
0,72 мл/с. Суточная потеря белка 55 и снижение клиренса экдогенного с мочой колебалась от 3,8 до 14 г. креатинина до 1,05 мл7с. Суточная
Определена селектинность протеину- потеря белка ч, ч-9, 9 г, протеин ия рии электрофоретическим методом— поте б ч, ч-9,, Ур .определена электрофоретическим ме1252728
Морфологическое исследование почечной ткани показало, что у ребенка имеет место пролиферативный мезангиальный и миннмаЛьный гломерулонефрит.
Составитель М. Позняк
Редактор О. Бугир Техред В.Кадар Корректор Е. Сирохман
Заказ 4618/46
Тираж 778 Подписное
ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий
113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5
Производственно-полиграфическое предприятие, r. ужгород, ул. Проектная,4
5 тодом - селективная. Исследование активности ХЭ предлагаемым способом показало, что у ребенка имеет место незначительное нарушение проницаемости гломерулярного фильтра, несмотря на высокую активность нефротического процесса: 0,6 Е/ммоль креатинина (норма 0,1 t 0,01). формула изобретения .
Способ диагностики гломерулонеф. рита у детей путем определения активности ферментов в моче, о т л ич а ю шийся тем, что, с целью повышения точности при дифференциальной диагностике нефротической и смешанной форм гломерулонефрита, определяют активность холинэстераэы
1О и при значении этого показателя 0,69,0 Е/ммоль креатинина диагностируют нефротическую форму гломерулонефрита, а при значении 15,0-49,0 Е/ммоль креатинина-смешанную форму.