Способ определения витаминов @ и @

Способ определения витаминов @ и @

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

Изобретение относится к химическим методам определения витаминов группы Д. Цель изобретения - сокращение времени анализа и повышение чувствительности способа. Образец растворяют в хлороформе. Полученный, раствор наносят на пластинку с закрепленным слоем сорбента. графическое разделени е витамина Д осуществляют в системе гексан - . эфир - н-бутанол (49:49:2). Затем опрыскивают пластинку 0,2%-ным раствором хлорида железа в этаноле. Пластинку высушивают и помещают в камеру , насыщенную парами йода. Пластинку извлекают из камеры, прогревают до полного удаления следов йода. После этого пластинку опрыскивают 0,5%-ным раствором 2,2 -дипиридила в этаноле. Производят элюирование целевого продукта. Полученный элюаТ фотометрируют. (Л с 1C ел 4 СО ч1 Ц9

СОЮЗ СОВЕТСНИХ

СООИАЛИСТИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИН пи 4 С О1 N 30 00

)pe = -" "- 1 3 х

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (21) 3810052/28-14 (22) 06. 11.84. (46} 30.08.86. Бюл. У 32 (71) Украинский научно-исследова. тельский институт птицеводства (72} П.Ф. Сурай, И,А. Ионов и М.С. Жедек (53) 612 015.6(088.8) . -(56) Раствор эргокальциферола в масле, 500 ИЕ, в капсулах ВФС

42-, 212-73.

Богуславский Н.А. и др. Определение витаминов Д, и Д э в белковом препарате видеин с помощью тонкослойной хроматографии. — Хим.-фарм. журнал, 1974, т. 8, 9 5, с. 56-58. (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ВИТАМИНОВ

g, B nç.SU„, 1254379 А1 (57) Изобретение относится к химическим методам определения витаминов группы Д- Цель изобретения — сокращение времени анализа и повышение чувствительности способа. Образец растворяют в хлороформе. Полученный. раствор наносят на пластинку с за" крепленным слоем сорбента. Хрометографическое разделение витамина Д осуществляют в системе гексан— эфир — н-бутанол (49:49:2). Затем опрыскивают пластинку 0,2Х-ным раствором хлорида железа в этаноле. Пластинку высушивают и помещают в камеру, насыщенную парами йода. Пластинку извлекают из камеры, прогревают Я до полного удаления следов йода.

После этого пластинку опрыскивают

0,5Х-ным раствором 2,2 -дипнридила в этаноле. Производят элюирование целевого продукта. Полученный элюат Я фотометрируют.

leek

1 12

Изобретение относится к химическим методам определения витаминов группы Д с применением хроматографических методов очистки, в частности, тонкослойной хроматографии и может быть использовано при определении содержания витаминов группы Д в масляных концентратах, тривитамине, тетравитамине и других объектах в зоотехнических, ветеринарных, медицинских и прочих биологических исследованиях, а также для контроля производства витаминов группы Д (преимущественно Д ) для медицинских целей и ветеринарии (применяется для крупного рогатого скота) и витамина Д для нужд птицеводства.

Э . Целью изобретения является сокращение длительности анализа и повы-! шение чувствительности способа.

Поставленная цель достигается тем, что согласно способу определения витамина Д путем хроматографической очистки на пластинке с закрепленным слоем сорбента в подвижной фазе, содержащей органический растворитель, удалением целевого компонента с пластинки и фотометрированием в качестве подвижной фазы используют смесь гексан:эфир:н-бутанол при объемном соотношении компонентов (45-53):

:(53-45):(1-3), а цветную реакцию проводят непосредственно на пластине путем последовательной ее обработки треххлористым железом, парами йода и 2,2 †.дипиридилом.

Пример 1. Определение витамина Д в масляном растворе.

2,5 r препарата витамина Д растворяют в 2 мл хлороформа, переносят в.мерную колбу на 25 мл и,доводят до .метки хлороформом. На. стартовую линию пластинки "Силуфол с закрепленным слоем силикагеля размером 15х15 см наносят 0 1 мм полученного раствора в виде полосы длиною 80 мм, рядом наносят точки стандартного раствора витамина Дз (1 мкг холекальциферола).

Хроматографическое разделение ви— тамина Дд осуществляют в камере, насыщенной парами подвижной фазы (гекса:эфир:н-бутанол, смешанных в объемных соотношениях 49:49,2), через которую в. течение 15 мин продували азот. Когда фронт растворителя приблизится к. верхнему краю пластинки, ее извлекают из камеры и высушивают о, в токе азота при 40 С. Затем опрыскивают пластинку 0,2%-ным раствором

5437 9 2 .хлорида железа (III) в зтаноле. Пластинку высушивают при комнатной температуре и помещают на 10 с в камеру, насыщенную парами йода. После этого пластинку извлекают из камеры, про\ гревают в токе теплового воздуха до, полного удаления из пластинки следов йода с последующим опрыскиванием ее

0,5Х-ным раствором 2,2-дипиридила в

Ю этаноле. На пластинке появляется розово-красная полоса целевого продукта на белом фоне.

Локализацию витамина Д определя3 ют по свидетелю и окрашенный участок силикагеля количественно переносят в пробирку с притертой пробкой. Затем в пробирку приливают 3 мл элюирующей смеси, состоящей из этанола, О соляной и фосфорной кислот и дистиллированной воды в объемных соотношениях 6:3:1:2, энергично встряхивают в течение 20 с и отфильтровывают через беззольный фильтр (красная лента).

25 Ополаскивают пробирку 1 мл элюирующей смеси, которую переносят на тот же фильтр. Полученйый розово-красный элюат фотометрируют при 492 нм.

Содержание витамина Д в препарате определяют по формуле

A 40 d Y, ш-7 где М вЂ” количество витамина Д, най35 денного в препарате, ЙЕ/мл;

А - количество витамина Дз, найденного по калибровочной кривой, мкг;

40 — коэффициент пересчета в интернациональные единицы (ие);

d — плотность масла„ г!мл;

Y — объем хлороформа, в котором растворена навеска препараф5 та. (25 мл);

Y — объем хлороформенного раствора препарата, нанесенного на хроматографическую пластинку (0,1 мл);

5Î

m — навеска препарата (2,5 r) .

Fl p и м е р 2.. Определение витамина Д в спиртовом растворе.

1 мл спиртового раствора препарата витамина Д разбавляют хлороформом в мерной колбе до 100 мл. На

55 стартовую линию хроматографической пластинки наносят О, 1 мл полученного раствора в виде полосы длиной 80 мм и рядом наносят точки стандартного

Преимущества способа заключаются в следующем: применение в качестве подвижной фазы предлагаемой системы растворителей дает возможность селективно определять витамины групСоставитель В. Каюкова

Редактор М. Циткина Техред А.Кравчук Корректор С. Черни

Заказ 4713/47 Тираж, 778 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-полиграфическое предприятие, r. Ужгород, ул. Проектная, 4

3 1?543 раствора витамина Д (1 мкг). Хроматографическое разделение и все дальнейшие процедуры проводят .так же, как описано в примере 1.

П р и и ер 3. Определение витамина Д в масляном растворе тетравиэ

Ъ тамина (смесь витаминов А, Е, Д з и F).

5 r масляного раствора тетравитамина вносят в .мерную колбу на 25 мл 10 и доводят до метки хл6роформом. На стартовую линию хроматографической пластинки наносят 0,1 мл полученного раствора в виде полосы длиной

80 мм, рядом наносят точки стандарт- 15 ного раствора витамина Д (l мкг).

Хроматографическое разделение и все дальнейшие операции. проводят так же, как описано в примере 1.

Пример 4. Определение вита- 20 мика Д в масляном етабилизирован9 ном растворе триэитамина (смесь ви таминов А, Е, Д и сантохина).

4 г масляного раствора тривитамина вносят в мерную колбу на 25 мл 25 и доводя до метки хлороформом. Все дальнейшие операции проводят так же, как описано в примере 1.

79 4 пы Д в присутствии других жирорастворимых витаминов и антиоксидантов; проведение цветной реакции непосредственно на пластинке согласно предлагаемому способу позволяет повысить чувствительность способа, применение предлагаемой †.,-движной фазы,и цветной реакции непосредственно на пластинке .сокращает продолжительность анализа более чем в 3 раза; йсключение из рабаты треххлористой сурьмы значительно улучшает условия труда ° аналитиков и расширяет возможности использования метода-.

Формула и з о б р е р- е н и я

Способ определения витаминов Д и Д путем растворения образца в хлороформе, нанесения на пластинку с закрепленным слоем сорбента, хром .таграфирования в системе органических .растворителей, проявления, элюирования и фотометрирования целевых соединений, отличающийся тем, что, с целью сокращения времени анализа и повышения чувствительности способа, в качестве системы органических растворителей используют гексан — эфир — н-бутанол (49:49:

:2), а проявление проводят последовательной обработКой раствором хлорного железа,, парами иода и раствором

2,2 -дипиридила.