Способ стимуляции икры карповых рыб (его варианты)
Иллюстрации
Показать всеРеферат
1, Способ стимуляции икры карповых рыб, предусматривающий однократную обработку половых продуктов п-аминобензойной кислотой, отличающийся тем, что, с целью повышения жизнеспособности и продуктивности рыб в течение первого года жизни, п-аминобензойной кислотой обрабатывают икру рыб непосредственно после оплодотворения в течение 60- . 120 мин, при зтом п-аминобензойную кислоту берут Б концентрации 0,01250 ,1%. 2. Способ стимуляции икры карповых рыб, предусматривагадий однократную обработку половых продуктов п-аминобензойной кислотой, отличающийся тем, что, с целью повышения жизнеспособности и продуктивности рыб в течение первого года жизни, п-аминобензойной кислотой обрабатывают зрелые спермии рыб перед осеме (О нением ими икры в течение 30-60 мин, при зтом п-аминобензойную кислоту берут в концентрации 0,00312-0,05%.
СОЮЗ СОВЕТСНИХ
СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ
РЕСПУБЛИК g 4 А 01 К 61/00
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
К А ВТОРСКОМЪ СВИДЕТЕЛЬСТВУ
ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР
ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ (21) 3562265/28-13 (22) 04.03 ° 83 (46) 15.11.86. Бюл. В 42 (71) Казахский научно-исследовательский институт рыбного хозяйства (72) P.Ì.Öîé, Т. С.Зак и И.В.Пак (53) 639 ° 3.034(088.8) (56) Авторское свидетельство СССР
У 789065, кл. А 01 К 61/00, 1978.
Авторское свидетельство СССР
У 867874, кл. А 01 К 61/00, 1979.
Авторское свидетельство СССР
9 1076051, кл. А 01 К 61/00, 1982. (54) СПОСОБ СТИМУЛЯЦИИ ИКРЫ КАРПОВЫХ
РЫБ (ЕГО ВАРИАНТЫ) (57) 1. Способ стимуляции икры карповых рыб, предусматривающий однократную обработку половых продуктов и-аминобензойной кислотой, о т л и ч а ю шийся тем, что, с целью
„„SU„„1269770 А1 повышения жизнеспособности и продуктивности рыб в течение первого года жизни, и-аминобензойной кислотой обрабатывают икру рыб непосредственно после оплодотворения в течение 60- .
120 мин, при этом и-аминобенэойную кислоту берут в концентрации 0,01250,17.
2. Способ стимуляции икры карповых рыб, нредусматривакнций однократную обработку половых продуктов и-аминобензойной кислотой, о т л и ч а ю шийся тем, что, с целью повышения жизнеспособности и продуктивности рыб в течение первого года жизни, п-аминобензойной кислотой обрабаты- Е вают зрелые спермии рыб перед осеменением ими икры в течение 30-60 мин, при этом и-аминобензойную кислоту ( берут в концентрации 0,00312-0,05Х.
I 269770
Целью изобретения является повышение жизнеспособности и продукт|лвности рыб в течение первого года жизни.
Согласно предлагаемому способу стимуляции икры промысловых рыб, предусматривающему однократную обработку половых продуктов и-аминобензойной кислото л, по первому варианту и-амиИзобретение относится к рыбоводству, а именно к способам стимуляции икры рыб для повышения их продуктивности, и может найти применение как
Ф на рыбоводных предприятиях, занимающихся искусственным воспроизводством рыб, так и в некоторых областях животноводства, Известен способ стимуляции икры промысловых рыб, заключающийся в инкубации оплодотворенной икры в воде с биологически активными соединениями, такими как смесь а -картотина, Р-токоферола, убихинона Ч „, пирогаллола и аскорбиновой кислоты.
Действие данного способа ограничивается только эмбриональным и личиночным периодами жизни рыб, так как он регулирует обменные процессы, не затрагивая генный материал„
Известен также способ стимуляции икры рыб, предусматривающий инкубацию оплодотворенной икры рыб до начала гаструляции в биологически активном веществе — фосфорнокислом калии, Этот способ также позволяет повысить жизнеспособность рыб только на ранних стадиях развития. Кроме тего, использование данного способа затруднено в промышленных масштабах:в связи со сложностью поддержания нужной концентрации биологически aKTHBHbKK веществ в течение длительного периода в условиях заводского воспроизводства.
Наиболее близким к предлагаемому является способ стимуляции икры рыб, предусматривающий однократную обработку половых продуктов и-аминобензойной кислотой.
При осуществлении этого способа и-аминобензойной кислотой обрабатывают икру на стадии двух бластомеров до выклева, что активирует жизненно важные процессы, протекающие в момент воздействия и в ближайшее время. после воздействия, но не способствует повышению жизнеспособности и продуктивности рыб в течение всего первого года жизни рыб. нобензойной кислотой обрабатывают икру рыб непосредственно после оплодотворения Е3 течение 60-120 мин, при этом и-аминобензойную кислоту берут в концентрации 0,0125-0, 12.
Согласно предлагаемому способу стимуляции икры промысловых рыб, предусматривающему однократную обработку половых продуктов и-аминобензойной кислотой,.по второму варианту и-аминобензойной кислотой обрабатывают зрелые спермии перед осеменением ими икры в течение 30-60 мин, при этом и-аминобензойную кислоту берут в концентрации 0,00312-0,057.
Предлагаемый способ осуществляют следующим образом.
Первый вариант. С помощью гипофизарных инъекций получают зрелые половые продукты рыб. Икру оплодотворяют обычным образом и обесклеивают в аппаратах Вейса, добавляя в обесклеивающий раствор и-аминобензойную кислоту и создавая ее концентрацию
0,00125-0, 1/, Время обработки икры и-аминобензойной кислотой составляет 60-120 мин, затем икру инкубируют обычным способом, например в кристаллизаторах.
Второй вариант. Также получают с помощью гипофизарных инъекций половые продукты рыб. Свежеотцеженную сперму обрабатывают в течение 3060 мин и-аминобензойной кислотой в концентрации: 0,00312-0,057. Затем этой спермой осеменяют икру рыб, которую затем обесклеивают и инкубируют обычным способом.
Способ по первому варианту выполнения проще, так как в этом случае совмещаются процессы обработки икры и-аминобензойной кислотой и ее обесклеивание, Выбор концентраций п-аминобензойной кислоты (ПАБК) при обработке икры рыб в пределах 0,0125-0, 17. связан с тем, что при использовании концентраций ПАБК вьш е О,IX препарат действует на икру угнетающе, а с применением концентраций ПАБК ниже 0,0125Х способ не может быть осуществлен в связи с тем, что стимуляция устойчиво проявляется лишь в повышении жизнеспособности рыб на ранних стадиях, но угнетающе влияет на показатели роста рыб в течение первого года выращивания (см.табл.1).
1269770
Концентрация п-аминобенэойной кислоты (ПАБК) при обработке спермиев рыб выбрана в пределах 0,00312-0,05Х в связи с,экспериментом, при котором был установлен пик стимулирующего действия ПАБК при использовании концентрации 0,003Х (30 мг в 1 л).
При использовании концентрации и-аминобензойной кислоты ПАБК вьппе
0,05Х стимуляционный эффект ПАБК Не проявляется и наблюдается подавление роста рыб, что связано с токсичностью дозы (по известному фармакологическому принципу действия биологически активных препаратов: высокие дозы— яд, малые дозы — стимулятор).
Выявлено также, что стимуляционный . эффект снижается при снижении концентрации ПАБК ниже 0,00312Х (см. табл.2). 20
Временной режим обработки икры рыб, равный 60-120 мин, связан с тем, что этот процесс совмещается с процессом обесклеивания икры.
Известно, что в период обесклеивания происходит набухание икры, котороЕ связано-с интенсивным всасыванием водных растворов и длится около 60 мин, . с прекращением набухания проникновение раствора ПАБК к зародышу сквозь оболочку икры затрудняется. Период же обесклеивания продолжается 60120 мин. Чувствительность зародьппей к воздействию генетических и физиологических факторов по мере развития З5 снижается, поэтому воздействие биологически активными веществами в период образования зиготы является наиболее эффективным. Таким образом, выбранная экспозиция 60-120 мин необходима и 40 достаточна для осуществления поставленной цели.
Временной режим, установленный для обработки спермиев рыб и-аминобензойной кислотой,.связан с тем, что обработка спермиев промысловых рыб генетически активными соединениями обычно проявляется после 30 мин экспозиции. С другой стороны выдерживание спермы рыб in vitro при комнатной температуре более 1 ч отрицательно сказывается на оплодотворяющей способности спермиев. Таким образом, экспозиция в пределах 30-60 мин является наиболее благоприятной, так . как позволяет избежать влияния побочных факторов и получить максимальный стимуляционный эффект.
Пример 1. Икру рыб, например карпа, осемененную обычным способом, обрабатывают рабочим раствором и-аминобензойной кислоты из такого расчета, чтобы после смешивания раствора и икры концентрация п-аминобензойной кислоты составила 0,1Х. Рабочий раствор витамина готовят на обесклеивающем растворе. Для обработки 0,5 кг икры данной дозой витамина в 4,5 л обесклеивающего раствора растворяют
5 г ПАБК. Осемененную икру и рабочий раствор витамина помещают в аппарат
Вейса. Обработку икры и-аминобензой ной кислотой совмещают с процессом обесклеивания икры. Экспозиция 2 ч.
Перемешивание икры воздушное.
Пример 2. Икру рыб, например карпа, осемененную обычным способом, обрабатывают п-аминобензойной кислотой в концентрации 0,05Х. Для этого в 4,5 л обесклеивающего раствора растворяют 2,5 г и аминобензойной кислоты и добавляют 0,5 кг икры.
Обработку икры стимулятором совмещают с ее обесклеиванием. Перемешивание икры в рабочем растворе витамина осуществляется сжатым воздухом. Экспозиция обработки икры 1 ч.
Пример 3. Икру карпа, осемененную обычным образом, обрабатывают и-аминобензойной кислотой в концент рации 0,025Х. Для этого в 4,5 л обесклеивающего раствора растворяют 1,25r п-аминобенэойной кислоты и добавляют
0,5 кг икры. Далее, как в примере I.
Время обработки 2 ч.
Пример 4. Икру рыб, например карпа, осемененную обычным способом,. обрабатывают и-аминобензойной кислотой в концентрации 0,0125Х. Для этого в 4,5 л обесклеивающего раствора растворяют 0,625 г ПАБК и добавляют 0,5кг икры.
Обработку икры стимулятором сонмещают с ее обесклеиванием. Перемешивание икры в рабочем растворе витамина осуществляется сжатым воздухом.
Экспозиция обработки икры 2 ч.
Пример 5. То же, что и в примере 1, но концентрация и-аминобензойной кислоты составляет 0,0060Х, время обработки 60 мин (1 ч).
Приме р 6. Тоже, что и в примере 1, но концентрация и-аминобензойной,кислоты составляет 0,0015Х.
Пример 7. То же, что и в примере 1, но концентрация и-аминобен5 1269 зойной кислоты составляет 0,001257. время обработки 60 мин.
Пример 8, Оплодотворенную икру карпа, осемененную обычным образом, помещают в культиваторы са стадии 2-х бластомеров до момента выклева, инкубируют в растворе и-аминобензойной кислоты концентрацией
0,00157. (по известному способу), Пример 9. То же, что и в при- 10 мере 8, но концентрация и-аминобензойной кислоты составляет 0,00127..
Данные по получению сеголеток и их продуктивности приведены в табл.3.
Из табл, видно, что обработка ик- 15 ры Tl-àìèíoáåíçîéíoé кислотой кс>нцентрацией 0,00125-0,17. оказывает в течение первого года жизни рыб стимулирующее действие, выражаюшееся в повышении выхода сеголеток„ по сравнению с известным способом.
Пример 10. Свежеотцеженную сперму рыб, например карпа, обрабатывают п-аминобензойной кислотой в концентрации 0,057. Для этого сначала готовят О, 1Х-ный маточный раствор витамина, растворяя 0,1 г и-аминобен,эойной кислоты в 100 мл физиологического раствора Рингер-Локка. Рабочий раствор витамина готовят:из маточного З0 и физиологического растворов с таким расчетом, чтобы после разбавления
1 ч. спермы 3-мя ч. рабочего раствора получить заданную концентрацию. Концентрация и-аминобензойной кислоты, равная 0,05Х, соответствует разведению -1 ч. витамина в 2000 ч. разбавленной физиологическим раствором спермы.
Для этого к 1О мл маточного раствора
ПАБК добавляют 5 мл физиологического 4О раствора и 3 ч. полученного раствора с 1 ч, спермы.
Экспозиция обработки 30 мин. Затем, этой спермой осеменяют нормальную икру. Обесклеивание и инкубацию икры проводят обычным способом. Оплодотворение составило 74Х.
При выращивании рыб, полученных из икры, оплодотворенной этой спермой, выживаемость составила, Х от икры:
770 ь личинки 39,3; мальки 32,7; сеголетки
25,7.
Пример 11. Свежеотцеженную сперму рыб, например карпа, обрабатывают и-аминобензойной кислотой в концентрации 0,0062Х. Для этого 1 мл маточного 0,1 7-ного раствора ПАБК соединяют с 11 мл физиологического раствора и 3 ч. полученного рабочего раствора смешивают с 1 ч. спермы.
Экспозиция обработки 60 мин. Оплодотворение, обесклеивание и инкубацию икры проводят обычным способом. г Выживаемость икры составила 91Х.
Выживаемость составила, от икры; личинки 59,3; мальки 49,8; сеголетки
32,8.
Пример 12. Свежеотцеженную сперму рыб, например карпа, обрабатывают и-аминобензойной кислотой в концентрации 0,00312 . Для этого
0 5 мл 0,1 7-ного маточного раствора и-аминобензойной кислоты смешивают с 11,5 мл физиологического раствора
Рингер-Локка. 3 ч. полученного рабочего раствора соединяют с 1 ч. спермы, Экспозиция обработки 60 мин. Оплодотворение, обесклеивание и инкубацию икры проводят обычным способом. Оплодотворение икры составило 87,2Х. Выживаемость составила, X от икры: личинки 69,0; мальки 60,2; сеголетки
49,6.
Предлагаемый способ (его варианты) позволяет повысить продуктивность рыб при более простом его осуществлении.
П-аминобензойная кислота, активи руя жизненно важные биохимические процессы (в том числе и репарационные), в конечном итоге приводит к подъему жизненности организма и максимальному проявлению его продуктивных свойств.
Способ дает возможность в короткие сроки увеличить получение рыбной продукции с единицы прудовой площади и снизить ее себестоимость и может быть использован во всех прудовых хозяйствах, в которых организован заводской метод воспроизводства карповых рыб.
1269770
Выживаемость> I
Концентрация
ПАБК, I редняя масса сеголеток, r личинок мальков сегалетак ат мальков от икры от личинок
7!,7
144,7
187,0
137,4
47,8 144,9+5,12
61,5 150>3+5,24
80> О
82,0
0,0067
0>0017
0,0008
0 0006
Контроль
81,5
77,8
95,7
146, 4+5, 18!
01, 1
75,0
66,7
103>6
72,3
48>5 144> 1i5>09
84,0
55>4
184+6>50
100, О
69,0
52,5
46,1
Оплодотворение икРы>
Продуктивность> I к контролю (с учетом выживаемости
ll8 всех стадиях) Выживаемость, I
Средняя масса се
Концентрация ПАБК, I родуктивость, I к онтролю голеток сеголеток от мальков ин ов ик
200, 7 !
53,8
209,0
115, О
108,7
112,9
104,9
89,6
42,4
93,5
100
0,0025
О, 00125
0,00062$
91>1
37,2
86 ° 5
100
103,6
108, t
84,3
79,0
58,0
98,4
100
100
114,5
76,8
25,5
89,0
Контроль 98, 2 Продуктивность сеголеток, Х х прототипу
Получено сеголеток
Вариант аныта радуктнвност еголеток, I онтролю
Концентрация 1Экспознция
ПАБК, I обработки от личинок,I средняя масса, г
131,6
116 ° 1
133,3
117,6
65,3
120
68,0
120,1
121,6
71>3
120
129,7
128 1
80,0
120
84,!
85,1
67,8
111,4
108,5
112,8
109,9
101,3
8Ü,8
120
86,6
7 0,00125
100
76,9
8 О, 0015
9 0,012
98,2
75,2
99,5
98,7
Контроль (чистая вада) 100
62>7
1 0,100
2 О> 050
3 . 0,0250
4 0,0125
5 0,0060
6 О, 0015
Со стадии 2-х бластомеров
До вылупления (по прототипу) 106,5+4,56
90,2+3,08
89,0+2,72
84,6+3,98
65,5+3, 14
67,8+4,03
66,2+3,76
68,7+4,11
69,0+3,96
83,2+2.,98
Таблица!
Продуктивность1Продуктивсегалеток, в ость с
Х к контролю четам выживаемости а всех стаиях, в I к онтролю
Та блиц а 2 >
ТаблицаЭ