Способ эксклюзионной жидкостной хроматографии полимеров

Способ эксклюзионной жидкостной хроматографии полимеров

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

Изобретение относится к способам разделения полимеров-в потоке элюента на силикатных сорбентах. Целью изобретения является сокращение процесса разделения и устранение разложения полимеров при разделении . Поставленная цель достигается тем, что в качестве сорбента используют силикагель, а в качестве растворителя и элюента используют вещество, содержащее трифторуксусную кислоту с незначительным количеством воды 0,5-4% и бензола 0,5-2%. с 9 2 3.п. ф-лы. 1 ил. (Л

СОЮЗ СОВЕТСНИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУбЛИН (51) 4 G 01 N 30/34, 30!48

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К A BTOPCHOMV СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССР

Il0 ДЕЛАМ ИЗОбРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ (21) 3960069/23-25 (22) 04. 10, 85 (46) 23. 11. 86. Бюл, М- 43 (71) Ордена Трудового Красного Знамени институт высокомолекулярных соединений АН СССР (72) Б.Г. Беленький, Э.С. Ганкина, Е.Е. Кевер, И.О. Костюк и А.Е. Саминский (53) 543.544(088.8) (56) Николаев А.Ф., Синтетические полимеры и пластмассы на их основе.

N. Химия, 1964, с. 706-725.

Pasche Е. ct а1. 3. Po1.ym. Sci.

Po1ym chem. Ed. 15, 1977, р. 983-989.

„.SV„„1272227 А1 (54) СПОСОБ ЭКСКЛЮЗИОННОЙ ЖИДКОСТНОЙ

ХРОМАТОГРАФИИ ПОЛИМЕРОВ (57) Изобретение относится к criocoбам разделения полимеров-в потоке элюента на силикатных сорбентах.

Целью изобретения является сокращение процесса разделения и устранение разложения полимеров при разделении. Поставленная цель достигается тем, что в качестве сорбента используют силикагель, а в качестве растворителя и элюента используют вещество, содержащее трифторуксусную кислоту с незначительным количеством воды 0,5-47 и бензола 0,5-2Х.

2 з.п. ф-лы. 1 ил.

1272227

Изобретение относится к способам разделения эксклюзионной хроматографией путем фракционирования на пористых силикатных сорбентах синтетических полимеров (лавсана, термотропных 5 полиэфиров) и биополимеров (синтетических полипептидов, пептидов и белков) по размерам и может найти использование в лабораторной практике и в заводских лабораториях в качестве экспресс-метода оценки молекулярной массы (MM) и молекулярномассового распределения (ИМР) полимеров.

Цель изобретения — сокращение процесса, разделения и устранение разложения анализируемых полимеров при разделении.

Трифторуксусная кислота (ТФУК) практически прозрачна в интервале

260-280 нм, который используется для спектрофотометрического детектирования полиэфиров, белков и пептидов.

Новые свойства ТФУК позволяют эффективно испольэовать ее в качестве растворителя и элюента в эксклюзионнои жидкостной хроматографии (ЭЖХ).

На чертеже изображены кривые 1 и 2 спектрофотометрирования элюата двух образцов полиэтилентерефталата (ПЭТФ) с разной характеристической вязкостью. По оси ординат — погло35 щение Э, по оси абсцисс — время удерживания

Пример 1. Эксклюзионную жидкостную хроматографию полиэтилентерефталата (ПЭТФ) проводят на фто40 ропластовой микроколонке с внутренним диаметром 0 5 мм и длиной 40 см. Колонку заполняют смесью микросферических силикагелей Лихросфер

Si-100 и Si-1000, взятых в массовом

45 соотношении 3:2 ° Эффективность колонки составляет 10000 теоретических тарелок (тт).

В качестве растворителя и элюента используют свежеперегнанную ТФУК с т.кип. 72-72,5 С (760 мм рт.ст.), содержание воды 0,57. 0,5 мг ПЭТФ

Ic и = 0,72 растворяют в 1 мл свежеперегнанной ТФУК (d = 1,480) при

20 С в течение 20 мин. На вход колон- 55 ки вводят 0,2 мкл раствора ПЭТФ, т,е. О, 1 мкг полимера. Скорость элюции 5 мкл/мин. Время анализа

"12 мин, время удерживания максимума пика t = 8,8 мин.

В этом случае, если белки и пептиды содержат S-S-связи, проводят предварительное окисление надмуравьиной кислотой.

Пример 2. Эксклюзионную жидкостную хроматографию пептида брадикинина проводят на микроколонке по примеру 1. 0,5 мг пептида с

МИ 1060 растворяют в 0,25 мл ТФУК (ci4 = 1,480) с добавкой 27. воды и 17 бензола при 20 С в течение

1,0 мин. На вход колонки вводят, 0,2 мкл раствора, т.е. 0,4 мкг пептида. В качестве элюента также используют ТФУК с 2Х воды и 1% бенэола.

Скорость элюции 5 мкл/мин. Время анализа 14 мин. Время удерживания максимума пика t „ = 12 мин.

Пример 3. Эксклюзионную жидкостную хроматографию белка химотрипсиногена с MM 25000 проводят на микроколонке по примеру 1. 2 мг белка обрабатывают 0,2 мл надмуравьиной кислоты. Полученную смесь выдерживают в течение 12 ч при 20 С и упаривают. Остаток растворяют в 1 мл ТФУК с 37 воды и 0,5Х бензола. Скорость элюции 5 мкл/мин. Время анализа

14 мин. Время удерживания максимума пика = 9,3 мин. В качестве элюента также используют ТФУК.

Пример 4. Для доказательства отсутствия денатурации полимеров в условиях анализа готовят растворы ПЭТФ и ТФУК с и = 1,480 (исходная) и с добавкой 1, 4 и 57. воды.

Измеряют удельную вязкость » и

У< время удерживания t полученных растворов через 30, 45 и 120 мин.

Удельная вязкость почти не меняется.

Формула изобретения

1. Способ эксклюзионной жидкостной хроматографии полимеров путем растворения полимера в растворителе, введения раствора полимера в хроматографическую микроколонку с сорбентом и разделения в микроколонке в потоке элюента, о т л и ч а ю щ и йс я тем, что, с целью сокращения процесса разделения и устранения разложения полимеров при разделении, в качестве сорбента используют си1272227

7,5

Составитель Л.Жаркова

Texpep, A.Êðàâ÷óê

Корректор E. Сирохман

Редактор А.Козориз

Тираж 778 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Заказ 6333/43

Производственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул. Проектная, 4 ликагель, а в качестве растворителя и элюента используют вещество, содержащее трифторуксусную кислоту.

2. Способ по и. 1, о т л и ч аю шийся тем, что, с целью повышения растворимости, при разделении синтетических полимеров, растворитель и элюент содержит трифторуксусную кислоту и воду, причем . количество ингредиентов равно:трифторуксусная кислота в количестве

99,5-987, остальное вода.

3. Способ по п. 1, о т л и ч аю шийся тем, что, с целью по5 вышения растворимости и подавления адсорбционных взаимодействий полипептидов и белков с носителем, растворитель и элюент содержат трифторуксусную кислоту в количестве 99947., вода 0;5-47., бензол 0,5-2Х.