Способ моделирования стрессорных повреждений миокарда

Способ моделирования стрессорных повреждений миокарда

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной патологии, может быть применено для моделирования заболеваний сердечно-сосудистой системы. Цель изобретения - воспроизведение вялотекущего дистрофического процесса путем внутривенного введения натриевой соли циклического 3,5-аденозинмонофосфата. Для этого иммобилизованному животному проводят инъекцию в вену хвоста. Вначале вводят 1%-ный раствор кофеина-бензоата натрия из расчета 2,5 мг на 100 г массы тела животного. Затем через 3-5 мин внутривенно вводят свежеприготовленный 10%-ный раствор натриевой соли 3,5-аденазинмонофосфата из расчета 10-20 мг на 100 г массы тела животного. Способ позволяет уточнить механизм повреждающего действия катехоламинов на сердце и производить поиск новых лекарственных средств для защиты миокарда от повреждений и испытания их на модели. . с S

СОЮЗ СОНЕТСНИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИН

„„SU,»1272348 (5ц 4 G 09 В 23 28

"А IPg

Е

I (ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

И АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ (21) 3562978/28-14 (22) 15.03.83 (46) 23.11.86. Бюл, № 43 (7l) Ккевский медицинский институт им. акад. А. А. Богомольца (72) О, В. Сергиенко и А. Ф. Киселева (53) 6! 5.475(088.8) (56) Grubes С. М., Okh "3. «3., Broader В. (3. РЬахптасо ) ехр. Ther., 1933, v. 49, р. 306. (54) СПОСОБ МОДЕЛИРОВАНИЯ СТРЕССОРНЫХ ПОВРЕЖДЕНИЙ МИОКАРДА (57) Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной патологии, может быть применено для моделирования заболеваний сердечно-сосудистой системы.

Цель изобретения — воспроизведение вялотекущего дистрофического процесса путем внутривенного введения натркбвой соли циклического 3,5-аденозинмонофосфата. Для этого иммобилизованному животному прово-. дят инъекцию в вену хвоста. Вначале вводят 1 %-ный раствор кофеина-бензоата натрия кз расчета 2,5 мг на 100 .r массы тела животного. Затем через 3 — 5 мин внутривенно вводят свежеприготовленный

10%-ный раствор натриевой соли 3,5-адеиазинмонофосфата из расчета 10 — 20 мг иа

100 r массы тела животного. Способ позволяет уточнить механизм повреждающего действия катехоламинов на сердце и .производить поиск новых лекарственных средств для защкть миокарда от повреждений и испытания их на модели.

1272348

Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной патологии, и может быть использовано для воспроизведения в эксперименте заболеваний сердечно-сосудистой системы.

Целью изобретения является воспроизведение вялотекущего дистрофического процесса путем внутривеннаго введения нзтриевой соли циклического 3, 5 -аденозннчанафосфата.

Способ осуществляют следующим образом.

Ичмабилизираванначу животному производят инъекцию в вену хвоста, предварительно расширенную путем согревания.

Вначале вводят 10 0-ный раствор кофеинабензаата натрия из расчета 2,5 чг на 100 г массы тела животного, затем через 3 — 5 мин внутривенно вводят свежепригатовленный

1Оо-ный раствор натриевай соли 3;5 -аденазипманафасфата из расчета 10 — 20 чг на

100 r массы тела животного.

Пример l. Крыса белая беспородная, самец массой 180 г. Крысу иччабилизируют. Хвост животного согревают в теплой воде 45 — 50 С) для расширения вен хвоста, В боковую вену хвоста шприцам медленно в течение 1 мин вводят 0,45 чл 1Я-ного раствора кофеина-бензоата натрия. Через

3 мин в вену хвоста медленно в течение 1 чин вводят свежеприготавленный на воде для инъекций )О г -ный раствор натриевой соли циклического 3l5 -аденозинмонафасфата в количестве 0,18 чл (10 мг на ОО г. массы тела).

После инъекции животное нахолилась в клетке.

Крысу умертвляют лека под легкич эфирным наркозом через 15 мин после инъекции. Сердце останавливают погружением в охлажденный физиологический раствор (4 С). Из боковых стенок правого и левого желудочков и чежжелудочковай перегородки через всю толщу миокарда продольно иссекают кусочки для фиксации в формалине и для низкотечпературнога хранения. Кусочки, фиксированные в

1ОО-ноч забуференном форчалице, заливают в парафин и серийные срезы толщиной 5 чкл окрашивают гематакснлинам и эазиноч; гечатокгилинач -- основным фуксином — пикриновой кислотой (ГОФФ).

Для гHcToxHMH÷eñêèõ и гистоэнзичалагических исследований кусочки миокарда замораживают в изооктане, охлажденном жидким азотом и на параллельных криостатных срезах толщиной 10 чкч выявляют липиды по Z1son, зк> ивиасть чо>цичиш>ксилазы (MAO), а-глицерафосфатдегидрагеназы (аГФДГ), лактатдегидрагеназы (ЛДГ), глюкоза-6-фасфатдегидрогеназы (Г-6-ФДГ), сукцннатдегидрагенззы (СДГ), изацитратдегидрогеназы (ИДДГ), НАД- и ИАДФ-дегидрогеназ, )>-оксибутиратдегилрогеназы (P ОБДГ) методами с использованием солей тетра5

ЗО

4О

55 залия (THCT); кислой фосфатазы по Burstone. Для исследования состояния сокр»тительнаго аппарата кардиомиоцитав используют метод поляризационной микроскопии.

Степень контрактурных изменений кардиомиацитов оценивают па известным критериям.

При изучении полученного материала в миокарде боковых стенок левого и правого желудочков и, в меньшей степени, межжелудочковой перегородки выявляют изменения структуры, гистохимические и гистоэнзимологические особенности кардиомиоцитов. В сократительном миокарде преимущественно боковой стенки левого желудочка и межжелудочковой перегородки обнаруживают группы кардиомиоцитов и отдельные клетки с поляризационно-микроскопическими признаками контрактуриых повреждений

1, 11 и 111 степени. Кардиомиоциты с сегчентарными контактурами И вЂ” f f f степени выглядят несколько укороченными, саркоплазма их не выявляет поперечную и продольную исчерченность, окрашивается базофильно и обнаруживает фуксинаррагию при окраске ГОФП, которая свидетельствует о нарушении проницаемости сарколеммы. Клетки сакратнтельного миокарда с сегментарными контрактурными изменениями 1 степе- ни и субсегментарнымн контрактурами отличаются неравномерной эозинофилией н так называемой «бусовидной» и «зональной» фуксинаррагией. Гистохимнческие особенности чонтрактурно поврежденных клеток включают также перераспределение гранул диформазана вдоль мышечных волокон при выявлении ферментов, локализованных на митохондриальных мембранах (СДГ, р ОБДГ, ИЛД-дегидрогеназа), что может быть отражением смещения мнтохондрией из зон контрактуры.

В целом гистохимические и гистоэнзимологические изменения миокарда свидетельствуют о быстрой утилизации внутриклеточных запасов гликогеиа и угнетении активности ряда оксидоредуктаз, в особенности связанных с пластическим обменом (НАДФ-зависимой ИЦДГ, Г-6-ФДГ, НАДФдегидрогеназы) и обменом катехоламинов (МАО). Активность ферментов цикла Кребса, Р-окисления жирных кислот и дыхательной цепи (СДГ, р-ОБДГ, КАД-дегидрогеназа) близка к таковой у интактных животных.

Изменения гемомикрациркуляции в изученном материале были незначительны, s виде единичных, расширенных, переполненных кровью венул и капилляров.

Пример 2.. Криса белая беспородная, самец массой 220 г. Методика проведения эксперимента н используемые гистологические, гнстохимические и гистоэнзимологические методы исследования соответствуют описанным в примере I. Раствор кофеина-бензоата натрия вводят в количестве

1272348

Формула изобретения

Составитель М. Позняк

Редактор С. Патрушева Техред И. Верее Корректор М. Максимишиие

Заказ 634 I!49 Тираж 455 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

l l 3035, Москва, Ж вЂ” 35, Раушская наб., д. 4/5 Филиал ППП Патент>, r. Ужгород, ул. Проектная, 4

0,55 мл, раствор натриевой соли циклического 3, 5 -адено.".инмонофосфата — в количестве 0,22 мл (12 мг на 100 r массы тела).

Крысу умерщвляют через 3 ч после инъекции.

Морфологическое изучение миокарда боковых стенок левого и правого желудочков сердца и межжелудочковой перегородки позволило выявить прогрессирование дистрофических изменений кардиомиоцитов до появления признаков необратимых повреждений некоторых из них на фоне незначительных нар шений гемомикроциркуляции. аряду с углублением контрактурных повреждений клеток сократительного миокарда, увеличением количества сегментарных контрактур III степени при неизменном общем числе поврежденных клеток в них при гистохимическом и гистоэнзимологическом исследовании обнаруживают признаки повреждения митохондриальных мембран и: плаэматического пропитывания. В части кар- зВ диомиоцитов с сегментарными контрактурами 11 — III степени при выявлении активности СДГ, р-ОБДГ, НАД-дегидрогеназы иа фоне перераспределения гранул диформазана обнаруживают участки диффузной закраски саркоплазмы, чередующиеся с неокрашенными. Вместе с тем в контрактурно поврежденных клетках сократительного миокарда выявляют накопление ШИК-положительных амилазоустойчивых веществ, свидетельствующих о плазматическом пропитывании их.

В целом в миокарде оставалась пониженной активность ферментов, сопряженных с процессами биосинтеэа (НАДФ-зависимой ИДДГ, Г-б-ФДГ, НАДФ-дегидрогеназы) Активность моноаминоксидазы во. 35 всех исследованных отделах миокарда соответствует таковой у интактных животных, что косвенно указывает на нормализацию концентрации биогенных аминов в миокарде. С этим связаны незначительные нарушения гемомикроциркуляции в виде спаз- 4О мов единичных артериальных сосудов и нереэко выраженной очаговой гиперемии.

Пример 3. 6 крысам белым беспородным весом 100 †1 г в вену хвоста вводят

1 Я-ный раствор кофеина бенэоата натрия в дозе 2,5 г на 100 г массы тела живот- 45 ного и через 5 мин производят. инъекцию свежеприготовленным 10о-ным раствором натриевой соли циклического 3, 5 аденозинмонофосфата в дозе 20 мг на 100 г массы тела. После инъекции у животных наблюдается учащенное дыхание н сердцебиение, электрокарднографически выявлены признаки гипоксии миокарда.

Материал для исследбвання забран через

1 и 3 ч после инъекций. В, исследованном миокарде животных наблюдак тся выраженные дисциркуляторные изменения в виде полнокровия миокарда, расширения капилляров и артерий наряду со спазмом некоторых из них, расширения капилляров и венул со стаэами в них, переваскулярного и интерстицмального отека, геморрагий и плазморрагий, преимущественно в стенке левого желудочка и перегородки. Изменения в миокардиоцитах выражаются в неравномерном окрашивании цитоплазмы их с чередованием слабо окрашенных участков с исчезновением поперечной исчерченности и появлением поперечной зернистости в цитоплазме и участков пересокращения миокардиоцитов. В миокарде формируются очаги повреждения из групп дистрофически измененных миокардиоцитов, частью гнстопографически связанных с очагами кривоизлияний, обнаруживаются отдельные мышечные волокна миокарда с явлениями очагового мноцитолизнса. Перечисленные изменения обнаружены преимущественно в стенке левого желудочка и межжелудочковой перегородки.

Способ позволяет уточнить механизм повреждающего действия катехоламинов на сердце и производить поиск новых лекарственных средств для защиты миокарда от повреждения и испытание их на модели.

Способ моделирования стрессорных повреждений миокарда путем введения животным кофеина-бензоата натрия, отличающийся тем, что, с целью воспроизведения вялотекущего дистрофического процесса, после инъекции кофеина внутривенно однократно вводят раствор натриевой соли циклического 3;5 -аденозннмонофосфата в дозе 10—

20 мг на 100 г массы тела животного.