Способ определения белка

Способ определения белка

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

Изобретение относится к медицине , предназначено для определения содержания белка в растворах и биологических жидкостях лабораторным количественным методом. Цель изобретения - упрощение способа и определение белка в окрашенных мутных растр.орах путем использования 4,4-бис-дифенилендиазонийборофторида (БФ). Для ЭТОГО к растворам белка с последовательным его разведением или к биологическим жидкостям, содержащим белок, добавляют БФ и буферный раствор с рН 7,5. Смесь перемешивают, выдерживают 10-60 мин при комнатной температуре для формирования поликонденсатов и сгустков, которые регистрируют визуально. Количество белков определяют в соответствии с образовавшимися сгустками в испытуемой и тестовой системах. В последней используют белки сходного происхоядения - альбумины , глобулины и т.д. Растворы с 1 мг БФ (0,1%-ные растворы) формируют сгусток в растворах или биологических жидкостях, содержащих 0,25 мг белка.. о S

СОЮЗ СОВЕТСНИХ

СОЦ 4АЛИСТИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИН

А1 (19) (11) (51) 4 С 01 N 33/48

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ, (21) 3765321/28-14 (22) 10.07.84 (46) 07.01.87. Бюл. ))- 1 (71) Киевский медицинский институт им, А.А.Богомольца (72) М.М.Колесников, Л.В.Авдеева, И.Г,Анисимова и В.Г.Войцеховский (53) 612.398(088.8) (56) 3.Biol. Chem., 1951, 193, р.265275. (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ БЕЛКА (57) Изобретение относится к медицине, предназначено для определения содержания белка в растворах и биологических жидкостях лабораторным количественным методом. Цель изобретения — упрощение способа и определение белка в окрашенных мутных растворах путем использования 4,4-бис-дифени-. лендиазонийборофторида (БФ). Для ,этого к растворам белка с последовательным его разведением или к биологическим жидкостям, содержащим белок, добавляют БФ и буферный раствор с рН 7,5. Смесь перемешивают, выдерживают 10-60 мин при комнатной температуре для формирования поликонденсатов и сгустков, которые регистрируют визуально. Количество белков определяют в соответствии с образовавшимися сгустками в испытуемой и тестовой системах. В последней используют бел— ки сходного происхождения — альбумины, глобулины и т.д. Растворы с 1 мг

БФ (0,1Х-ные растворы) формируют сгусток в растворах или биологических жидкостях, содержащих 0,25 мг белка.

12820

Составитель M.Ïîçíÿê

Техред Л.Сердюкова Корректор А.Ильин

Редактор И.Николайчук

Заказ 7258/41 Тираж 776 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Проиэводстненно †полиграфическ предприятие, г.ужгород, ул.Проектная, 4

Изобретение относится к медицине, в частности к лабораторным количественным методам определения содержания белка в растворах и биологических жидкостях. 5

Целью изобретения является упрощение способа и определение белка в окрашенных и мутных растворах за счет использования 4,4-бис-дифенилендиазонийборофторида. 10

Способ осуществляют следующим образом.

К растворам белка с последовательным его разведением или биологическим жидкостям, содержащим белок, додавляют раствор 4,4-бис-дифенилендиазонийборофторида (БФ) и буферный раствор со щелочными значениями рН (более 7,5). Смесь перемешивают и 20 выдерживают в течение 10-60 мин при комнатной температуре для формирования поликонденсатов и сгустков, которые регистрируют визуально. Количество белков в растворе или биоло25 гической жидкости определяют в соответствии с образовавшимися сгустками р испытуемой и тестовой системах. В последней используют белки сходного происхождения (альбумины, глсбулины, продукты жизнедеятельности микроорганизмов и др.). Проведенные исследования показали, .что растворы с 1 мг

БФ (О, 1 -ные растворы) формируют сгусток в растворах или биологичес- 35 ких жидкостях, содержащих 0,25 мг белка.

04 2

II р и м е р. Испытуемую фракцию человеческого альбумина (ЧА) последо— вательно разводят физиологическим раствором в пробирках в объеме 1 мл.

Затем готовят водный раствор БФ

0,1 -ный (растворяют навеску БФ из расчета содержания 1 мг реагента в

1 мл) и добавляют в каждую пробирку в объеме 1 мл, перемешивают и приливают боратный буфер с рН 8,б в объеме

0,5 мл. Снова смесь перемешивают и оставляют при комнатной температуре.

Через 30 мин учитывают визуально образовавшиеся сгустки. Количество

ЧА в испытуемой фракции определяют в сравнении с формированием сгустков B разведениях тестового ЧА, обработанных аналогичным образом. Например, в тестовой системе с содержанием ЧА

1 мг/мл сгусток образовался в третьей пробирке ряда двукратных разведений, а в испытуемой системе — в шестой пробирке, что соответствует 0,8 .-ной концентрации ЧА в исходной фракции.

Формула изобретения

Способ определения белка путем обработки раствора белка химическим реагентом, отличающийся тем, что, с целью упрощения способа и определения белка в окрашенных и мутных растворах, в качестве реагента используют раствор 4,4-бис-дифенилендиазонийборофторида, а содержание белка определяют визуально по образованию сгустка.