Способ диагностики функциональной недостаточности эндометрия при привычном невынашивании беременности

Способ диагностики функциональной недостаточности эндометрия при привычном невынашивании беременности

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

Изобретение относится к медицине , точнее к акушерствз . Цель изобретения - повышение точности способа . Для этого берут биопт ат эндометрия на 21-24-ый день менструального цикла. Биоптат многократно отмывают в физиологическом растворе, гомогенизируют и центрифугируют 15 мин при 3000-8000 об/мин. В супернатанте определяют активность креатинфосфокиназы (КФК) и концентрацию белка. Для определения КФК берут 20 мкл исследуемого гомогената эндометрия к 525 мкл субстрата, содержащего 100 ммоль 3-эталонаминового буфера, рН 7,0, 35 ммоль/л креатинфосфата, 20 ммоль/л глюкозы, 9 ммоль/л глютадиона, 10 ммоль/л уксуснокислого магния, 1 ммоль/л АДФ, 0,6 ммоль/л НАДФ, 10 ммоль/л АМФ, 1,2 кЕ/л мин глюкозо- -6-фосфатдегидрогеназы, 1,2 кЕ/л мин гексокиназы. Смесь инкубируют при 5 мин. Затем при 340 им измеряют изменение оптической плотности в 1,0 см кювете через 1,0 мин в течение 3;-х мин. Активность фермента рассчитывают по формуле А/мин-3524, выражают в мкмоль/мин-мл. Методом Лоури определяют содержание белка и выражают в мг/мл. Удельную активность КФК выражают в мкмоль/мин-мг. При величине удельной активности КФК более 20 мкмоль/мин.мг диагностируют функциональную недостаточность эндометрия . § (Л ю со 00 О5 О5

СОЮЗ СОВЕТСНИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИН ()9) SU (II) (5D4 G 01 N 33 48

Д .„Ä)3

И =.;. ."::Т ЯА

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К А ВТОРСИОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ (21) 3976357/28-14 (22) 11. 11.85 (46) 23.03.87. Бюл, В 11 (71) Всесоюзный научно-исследовательский центр по охране здоровья матери ч ребенка (72) B.A.Бурлев и Е.М.Демидова (53) 618.2/3 (088.8) (56) Авторское свидетельство СССР

У 1085589, кл. А 61 В 10/00, 1982. (54) СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ФУНКЦИОНАЛЬНОЙ НЕДОСТАТОЧНОСТИ ЭНДОМЕТРИЯ ПРИ

ПРИВЫЧНОМ НЕВЫНАШИВАНИИ БЕРЕМЕННОСТИ

{57) Изобретение относится к медици-: не, точнее к акушерству. Цель изобретения — повышение точности способа, Для этого берут биоптат эндомет.рия на 21-24-ый день менструального цикла. Биоптат многократно отмывают в физиологическом растворе, гомогенизируют и центрифугируют 15 мин при

3000-8000 об/мин. В супернатанте определяют активность креатинфосфокиказы (КФК) и концентрацию белка. Для определения КФК берут 20 мкл исследуемого гомогената эндометрия к 525 мкл субстрата, содержащего 100 ммоль

3-эталонаминового буфера, рН 7,0, 35 ммоль/л креатинфосфата, 20 ммоль/л глюкозы, 9 ммоль/л глютадиона, 10 ммоль/л уксуснокислого магния, 1 ммоль/л АДФ, 0,6 ммоль/л НАДФ, 10 ммоль/л АИФ, 1,2 кЕ/л мин глюкозо-б-фосфатдегидрогеназы, 1,2 кЕ/л мин гексокиназы. Смесь инкубируют при

25 С 5 мин. Затем при 340 нм измеряют изменение оптической плотности в

1,0 см кювете через 1,0 мин в течение

3-х мин. Активность фермента рассчи- а тывают по формуле А/мин 3524, выраиают в мкмоль/мин мл. Методом Лаури определяют содержание белка и выражают в мг/мп. Удельную активность КФК вы- С» ражают в мкмоль/мин мг. При величине удельной активности КФК более

20 мкмоль/мин мг диагностируют функ- >. циональную недостаточность эндомет- р рия. Ж

1298бб7

ВНИИПИ Заказ 883/47

Тираж 777 Подписное

Изобретение относится к медицине, а именно акушерству, Цель изобретения — повышение точ ности способа.

Способ осуществляют след лощим образом, Биоптат эндометрия получают путем взятия цуга эндометрия Хаммеровской кюреткой с передней поверхности стенки ма тки на 21-24 день мен стру ально го 0

1 цикла. Биоптат многократно отмывают в физиологическом растворе. После . отмывания ткань гомогенизируют и центрифугируют при 3000-8000 об/мин в течение 10-15 мин. В супернатанте

f5 определяют активность креатинфосфокн —назы и концентрацию белка.

Определение креатинфосфокиназы осуществляют по изменению оптической плотности субстрата при 340 нм в

2О течение 1 мин при 25 С.

Для определения активности креатинфосфокиназы реакционная смесь содержит 29 мкл исследуемого образца гомогената эндометрия к 525 мкл.субстрата, содержащего 100 ммоль 3-этанол амин oso r o буфера, рН 7, О, 35 ммол ь /л креатинфосфата, 20 ммоль/л. глюкозы, 9 ммоль/л глютадиона, 10 ммоль/л уксуснокислого магния, 1 ммоль/л АДФ, 0,6 ммоль/л НАДФ, 10 ммоль/л АМФ., 1,2 кЕ/л мин глюкозо-6-фосфадегидрогеназы, !,2 кЕ/л мин гексокиназы.

Полученную смесь перемешивают и ин-" о, кубируют нри 25 С в течение 5 мин.

Затем при 340 нм измеряют изменение оптической плотности в 1,0 см кювете через 1,0 мин в течение 3 мин. Активность фермента рассчитывают по .формуле А/мин 3524 и выражают в

40 мкмоль/мин мл.

Для определения содержания белка в гомогенате используют метод Лоури и выражают в мг/мл. Удельную активность креатинфосфокиназы в гомогенате 5 эндометрия выражают в мкмоль/мин.мг.

Пример 1, Больная Н., группа крови А (II}, резус положительный, муж 28 лет, группа крови А (II) резус положительный, По данным тестов функциональной диагностики гормональной недостаточности не выявлено, базальная температура двухфазная, при

Произв.-полигр. пр-тие, г. гистологическом исследовании на 24 день цикла — фаза секреции. В анамнезе 3 беременности, закончившиеся самопроизвольными выкидышами в сроке

8-9 недель. Консервативная терапия во время беременности была неэффективной. Прецлагаемым способом установлено, что удельная активность креатинфосфокиназы в гомогенате эндометрия на 24 день цикла составила

54,3 мкмоль/мин мг, что свидетельствует о функциональной недостаточности энцометрия, Диагноз подтвержден независимыми диагностическими методами.

Проведено патогенетическое лечение.

Наступившая беременность закончилась рождением живого доношенного ребенка.

Пример 2. Больная К., в анамнезе б самопроизвольных выкидышей в сроки от 5 до 27 недель беременности, одни преждевременные роды мертвым плодом. Несовместимости по резус-фактору и системы АВО с мужем не выявлено. Ректальная температура двухфазная. При гистологическом исследовании на 22 день менструального цикла — фаза секреции. Исследование гомогената эндометрия по предлагаемому способу показало, что уровень удельной активности креатинфосфокиназы составляет 20,3 мкмоль/мин мг, что свидетельствует о функциональной недостаточности эндометрия. Правильность диагноза была подтверждена независимыми диагностическими методами, Проведено патогенетическое лечение.

Последующая беременность закончилась рождением здорового доношенного ребенка.

Формула и з о б р е т е н и я

Способ диагностики функциональной недостаточности зндометрия при привычном невынашивании беременности путем исследования гомогената г эндометрия, отличающийся тем, что, с целью повышения точности способа, в гомогенате эндометрия определяют креатинфосфокиназу и при величине удельной активности более

20 мкмоль/мин мг диагностируют функциональную недостаточность эндометрия.

Ужгород, ул. Проектная, 4