Способ получения стероидных соединений или их четвертичных аммонийных солей

Способ получения стероидных соединений или их четвертичных аммонийных солей

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

Изобретение касается замещенных стероидных соединений, в частности, общей формулы CH - сн,СН ,- СИ - ОК(...X)-CR СИ. ,нения формулы II R,W, где R,-W указано вьше, а W - галоген. При необходимости получения соединения I, где R, - низший галоидалкил, обрабатывают указанную соль щелочного металла ненасыщенным амином. Выделение соединения I ведут либо в свободном виде , либо в виде четвертичных гшмонийньгх солей.Испытания соединения I показывают , что они обладают сильным местным противовоспалительным действием без побочных эффектов, которые наблюдаются в известных случаях кортизон, гидрокортизон и др. . 16 табл. i СО X) от:) со см

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК цю а>.

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ /

Н ПАТЕНТУ / а- . "зf

l ,(-.г / сн — Ок(... х) -ск ( э

СН вЂ” — — — — — —. СН т Л

CHZ — — — -СН— (z

Сн — — СН -СН вЂ” С(...R )-СН—

z а <

О = С вЂ” — — Сн =С вЂ” С(...R )-СН

5 (21) 3306552/23-04 (22) 09.07.81 (31) 168453 (32) 10.07.80 (33) US (46) 15.06.87. Бюл. У 22 (71) Оцука Фармасьютикал Ко, ЛТД (JP) (72) Николас Стивен Бодор (US) (53) 547.689.6.07(088.8) где К вЂ” группа -С (О) OR,; Х вЂ” группа

О С(О) — OR К, — низший галоидалкил;

R — низший алкил; К вЂ” Н, оа — или

Р-метил; R — Н, F; R — Н, F, СН, Z — -С-О или -оксиметилен, пунктирная линия — это возможная двойная связь, или их аммонийных солей, которые обладают физиологической активностью и могут быть использованы в медицине. Для выявления активности среди замещенных стероидных соединений были получены новые соединения

Их синтез ведут из соединения I, где вместо R щелочной металл, и соедиgg 4 С 07 Л 1/00, 5/00//А б! К 31 565 (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ СТЕРОИДНЫХ СОЕДИНЕНИЙ ИЛИ ИХ ЧЕТВЕРТИЧНЫХ АИИОНИЙНЫХ СОЛЕЙ (57) Изобретение касается замещенных стероидных соединений, в частности, общей формулы нения формулы ?Т К,И, где R -W указано вьппе, à W — галоген. При необходимости получения соединения I, где

R — низший галоидалкил, обрабатывают указанную соль щелочного металла ненасьпценным амином. Выделение соединения I ведут либо в свободном виде, либо в виде четвертичных аммонийных солей. Испытания соединения I показывают, что они обладают сильным местным противовоспалительным действием без побочных эффектов, которые. наблюдаются в известных случаях кор— тизон, гидрокортизон и др. . 16 табл.

1318169

Изобретение относится к способу получения стероидных соединений обшей формулы

081

С=О

-- - ОС-OB г где R, — низший галоидалкил;

К вЂ” низший алкил;

К вЂ” водород, Ы вЂ” или P — метил;

8. — водород или фтор;, К, — водород, фтор или метил;

Z — карбонил или Р -оксиметилен;

20 пунктирная линия означает возможную углерод-углеродную связь, или их четвертичных аммонийных солей, обладающих рядом ценных фармакологи— ческих свойств.

Цель изобретения — получение новых стероидных соединений, обладающих высокой противовоспалительной активностью при минимальной системной активности.

Пример, 1. IIP-окси †!, †мевоксикарбонилоксиандрост-4-ен-3-он17)3-карбоновую кислоту объединяют с эквивалентным количеством IN гидроокиси натрия в метаноле и этот раствор разбавляют в 100 раз от первоначального объема этиловым эфиром.

Полученную суспензию замораживают в течение 1 ч. Затем образующиеся кристаллы удаляют при помощи фильтрации, сушат в эксикаторе, который откачивают, и растворяют в гексаметилфос— форамиде (10 вес.%/объем). Часть полученного раствора, содержащего

1 моль соли кислоты, т..е. IIP-окси17g, — метоксикарбонилоксиандрост-4-ен3-îí-17Р-карбоксилат натрия, объединяют с 4 моль хлорметилйодида. Реакционную смесь поддерживают при комнатной температуре в течение 3 ч, затем разбавляют до 10 раэ от первоначального объема этилацетатом. Разбавленную реакционную смесь промывают последовательно 5% — ным тиосульфатом натрия, 3%-ным бикарбонатом натрия и водой. Органический слой отделяют, сушат сульфатом магния и фильтруют.

Фильтрат концентрируют под вакуумом до образования пены. Пену очищают путем кристаллизации из подходящего растворителя (этиловый эфир или тетрагидрофуран/гексан). Таким образом получают хлорметил-11)-окси-17 -метоксикарбонил-оксиандрост-4-ен-3-он17Р-карбоксилат с т.пл. 171-173 С после кристаллизации.

ИК (KBr) 3000-2800 (С-Н), !760, I/48 (С ), 1650 (C=C-Ñ=Î) см

ЯМР (Сс1С1 ) о 5,67 (с, !, С=СН), 5,82, 5,62, (ABq, J = 5,5 Hz2, ОСН Сl), 4 47 (в, 1, СНОН).

Вычислено, %;

С 60,72; Н 6,87; Cl 7,79.

С 3

Найдено, %: С 60 50; Н 7,06;

Сl 7306; Cl 7,50.

Замена стероидной кислоты на эквивалентное количество 17 -этоксикарбонилокси-!IP — оксиандрост — 4-ен-3-он-17Ркарбоновой кислоты и повторение указанной методики дает получение проме— жуточной соли 17 -этоксикарбонил-ок— си — 1!P — оксиандрост-4-ен-3-он-17/ -карбоксилата натрия, а в качестве конечного продукта получают хлорметил-17с6этоксикарбонилокси-II(-оксиандрост-4ен-3 — он-17Р-карбоксилат, т.пл. 197о

200 С после кристаллизации.

ИК (KBr) 3600-3200 (О-Н), 30002800 (С вЂ” Н), 1763., 1740 (С=О), !650 (С=С вЂ С) см .

ЯМР (CDC1,)о 5,/ (c, 1, C=CH), 5,81, 5,62 (ABq, 1 = 5HZ, 2, -ОСН,Cl, Вычислено,, %.: С 61,46; Н 7,09.

С Н С10 .

Найдено, . : С 61,58; Н 7,08.

Таким же образом при замене стероидной кислоты эквивалентным количеством 17 †бутоксикарбонилок-11Р-оксиандрост-4-ен-3-îí-17Р-карбоновой кислотой и при повторении описанной ме— тодики получают промежуточную соль

17 -бутоксикарбонилокси-IIP †оксиандрост-4-ен-3-он-17Р-карбоксилат натрия, а в качестве конечного продукта получают хлорметил — 17о -бутоксикарбонилокси-Ilp-оксиандрост-4-ен-3-оно

17)-карбоксилат с т.пл. 98-100 С после кристаллизации.

ИК (KBr) 3600-3300 (О-Н), 30002800 (С-H), !765 (OpС=О), 1735 (ОС=О), 1650 (С=С-С=О) см .

ЯИР (СРС1 ) о 5,80, о 5,60 (2, ABq, 3 = 4,5НК-ОСН Сl), 5,67 (с, 1, С=СН), 4,45 (в, 1, CHOH), 4,08 (т, 2, 3 = 6HE 0 С0СН Сф .

1318169

Вычислено, 7.: С 62,77; Н 7,44;

С1 7, 14.

С 6Н С10т .

Найдено, 7: С 62, 88; Н 7, 23;

С1 7,30.

При замене стероидной кислоты на эквивалентное количество Ilp-окси17Р-изопропоксикарбонилоксиандрост-4ен-3-он-17Р- êàðáîíîâîé кислоты и при повторении описанной процедуры полу- !О чают, промежуточную соль 11Р-окси-17еСизопропоксикарбонилоксиандрост-4-ен3-он-17 -карбоксилат натрия, в качестве конечного продукта получают хлорметил-llP-окси-17М-изопропоксикарбонилоксиандрост-4-ен-3-он-17)3-карбоксилат с т.пл. 183,5-184,5 С после перекристаллизации из тетрагидрофурана — гексана.

Стероидную кислоту заменяют также 20 на эквивалентное количество !А-этоксикарбонилокси-llew-оксиандрост-4-ен3- он-17 -карбоновой кислоты, хлорметилйодид заменяют на эквивалентное количество бутилхлорида и процедуру повторяют за исключением стадии промывки 5Ж-ным тиосульфатом натрия.

Таким же образом получают промежуточную соль 17м-этоксикарбонилокси11 -оксиандрост-4-ен-3-îí-17Р-карбок- 30 силат натрия и конечный продукт бутил-17о -этоксикарбонилокси-!IP-оксиандрост-4-ен-3-oí-17Р-карбоксилат с т.пл. 148-149 С после кристаллизации из ацетона. 35

После хроматографии и кристаллизации ИК (KBr) 3600-3200 (О-Н), 3000 2800 (С-Н), 1750 (2С=О), 1670 (С=С-С=О) см

SIMP (CDC1)) 6 5,64 (с, 1, -C=CH) 40

4,46 (в, 1, CHOH), 4,32-4,95 (м, 4, СОССН СН, СООСН СН, ).

Вычислено, 7: С 67,99; Н 8,39.

С„Н„О,.

Найдено, 7: С 67,76; Н 7,74. 45

2А — 3: хлорметил-17 -этоксикарбонилокси-9к-фтор-11!1-окси-16к-метиландрост-1,4-диен-Э-он-17!!-карбоксилат, т.пл. 230-235 С (ТГФ/гексан);

2А-4: хлорметил-17 -этоксикарбонилокси-llP-оксиандрост-1,4-диен-3он-17 -карбоксилат, т.пл. 220,5223,5ОС (ТГФ/гексан);

2А-5: хлорметил-11Р-окси-17 -изопропоксикарбонилоксиандрост-1,4-диенЭ-îí-17Р-карбоксилат, т.пл. 197198 С (ТГФ/гексан);

2А-6: хлорметил 17ос-этоксикарбонилокси-9 -фтор-llP-оксиандрост-1,4диен-3-îí-17Р-карбоксилат, т.пл.245248 С (ТГФ/гексан);

2А-7: хлорметил-9к-фтор-llew-oêcè17oL — изопропоксикарбонилокси-!ба †метиландрост-1,4-диен-3-он-17/ -карбоксилат, т.пл. 184,5-186 С (ТГФ/гексан);

2А-8: хлорметил-9 -фтор-11/ -окси17 -изопропоксикарбонилокси-16Р-метиландрост-1,4-диен-3-он-17/!-карбоксилат, т.пл. 174-175,5 С (ТГФ);

2А-9: хлорметил-118-окси-17<-изобутоксикарбонилоксиандрост-4-ен-3-он17Р-карбоксилат, т.пл. 140-141 С (ТГФ/изопропиловый эфир);

2А-10: хлорметил-17 -циклогексил— оксикарбонилокси-llt3-оксиандрост-4ен-3-он-17!!-карбоксилат, т.пл. 148150 С (изопропиловый эфир/гексан);

2А — 11: хлорметил-11(-окси-178— пропоксикарбонилоксиандрост-4-ен-3о

îí-17Р-карбоксилат, т.пл. 181-182 С (ТГФ/гексан);

2А-12: хлорметил-9ы-фтор-Ilp-îêñè16 -метил-17Ы-пропоксикарбонилоксиандрост-1,4-диен — 3-он-17P †карбоксилат, т.пл. 176 †1,5 С (ТГФ/гексан);

2А-13: метил-11Р-окси-17К вЂ изопропоксикарбонилоксиандрост-4-ен-3-он17 -карбоксилат, т.пл. 211,5-213,5 С (ТГФ/гексан);

Пример 2. Следуя методике .примера 1 и заменяя соответствующие реагенты, получают следующие соединения: 50

2А-1: хлорметил-17к-этоксикарбонилокси-9 -фтор-11 -оксиандрост-4ен-Э-îí-17Р-карбоксилат, т.пл. 228229 С (ТГФ/гексан);

2А-2: хлорметил-17gc этоксикарбонилокси-9 -фтор-1 lр-окси-16!1-метиландрост-1,4-диен-Э-îí-17Р-карбоксилат, т.пл. 220-221 С (ТГФ/гексан);

2А-14: этоксиметил-llр-окси-17gизопропоксикарбонилоксиандрост-4-енЭ-îí-17Р-êàðáoêñèëàò, т.пл. 137-138 С (ТГФ/гексан);

2А-15: хлорметил-17 -бензилоксикарбонилокси-11Р-oêñèàíäðîñò-4-ен-3он-17Р-карбоксилат, т.пл. 182-183 С (этанол);

2А-16: 1-хлорэтил-IIP-oêñè-17 изопропоксикарбонилоксиандрост-4-енЭ-îí-17Р-карбоксилат, т.пл. 181182,5 С ТГФ/гексан, т.пл. 199-200 С (ТГФ/гексан);!

3!8169

2А-17: этоксикарбонилметил-11(3окси-17 -изопропоксикарбонилоксиандрост-4-ен-Ç-он-l?(-карбоксилат, т.пл;

73-7.4 С (изопропиловый эфир);

2А-18: 1-хлорэтил-9Ы-фтор-IlloI-ок- 5 си-l?g-изопропоксикарбонилокси-16 метиландрост-1,4-диен-3 — îí-I?P-карбоксилат, т.пл. 167,5-169 С (ТГФ/гексан), т.пл. 163-164 С (ТГФ/гексан);

2А-19: хлорметил-9 -фтор-17 -изопропоксикарбонилокси-16 -метиландрост-l,4-диен-3,11-дион-17-карбоксилат, т.пл. 200-201 С (ТГФ/изопропиловый эфир), 2А-20: хлорметил-9 -фтор-1?<-изо!

5 пропоксикарбонилокси-16К-метиландрост-1,4-диен-3 11-дион-17-карбоксилат, т.пл. 138-140 С (ТГФ/изопропиловый эфир);

2А-21: хлорметил- 9, — — фтор-118-окси- 20

1705, метоксикарбонилокси-!6 -метиландрост-1,4 — диен-3-он-1?Р-карбоксилат, т.пл. 260-263 С (ТГФ/гексан);

2А — 22: фторметил-11!!-окси — 17 -изо25 пропоксикарбонилоксиандрост-4-ен-3

îí-17Р-карбоксилат, т.пл. 207 5210 С (ТГФ/гексан);

2А-23: хлорметил-9< — фтор-IIIo †ozcvr16 -метил-l?o!,-пентилоксикарбонилоксиандрост-1,4-диен-Ç-îí-1?Р-карбокси30 лат„ т.пл. 176- 177 С (ТГФ/гексан);

2А-24: хлорметил-16,1?с — ди(этоксикарбонилокси) -6М-фтор-IIP — оксианд— рост-1,4-диен †-он-l?Р-карбоксилат, т.пл, 153-154 С (ТГФ/гексан); 35

2А-25: фтормерил-17 †этоксикарбонилокси-9к-фтор-11!1-окси-1б .-метиландрост-1,4-диен-З-он-17!1-карбоксилат, т.пл. 239 †2,5 С (ТГФ/гексан);

2А-26: ацетоксиметил-1?or †этоксикарбонилокси-II(-оксиандрост-4-ен-3он-1?Р-карбоксилат jHNP (СРС1 )F 5,76 (с., 2, OCH О), 2,01 (с., 3, СОСИ Д;

2А-27: хлорметил-1?oL-этоксикарбоHHJIoKcH-бм,9 -дифтор-lIP-oêñè-I6eL-ме- 5 тиландрост-1,4-диен-З-он-17 1-карбоксилат, т.пл. !95-197 С (ТГФ/гексан);

2А-28: 2-хлорэтил-I?cr.-этоксикарбонилокси-9 -фтор-11р-окси-16 -метиландрост-1,4-диен-Ç-îí-1?Р-карбокси50 лат, т.пл. 243-245 С (ТГФ/гексан);

2А-29: метил-1?ос-этоксикарбонилокси-9oI.-фтор-llp-окси-lб< -метиландрост-1,4-диен-Ç-он-1? -карбоксилат, т.пл. 258,5-262,5 С (ТГФ/гексан)!

2А-30: 2-хлорметил-1?к-изопропоксикарбонилокси-11ф-оксиандрост-4-енЗ-îí-1?Р-карбоксилат, т.пл. 188,8189,5 С (ТГФ/гексан).

Соединения 2А-16 и 2А-!8 — диастереомеры.

Пример 3. Исходный материал

11Р-окси-l?(x, -метоксикарбонилоксиандрост-4-ен-3-он-17 -карбоновую кислоту, используемую в примере 1, заменяют на эквивалентьое количество IIР, 17g-диоксиандрост-4-ен-3-îí-17$ -кар- боновой кислоты и повторяют методику примера 1. Таким образом, получают в качестве промежуточной соли 11 -17 диоксиандрост -4-ен-3-îí-I?f3-карбоксилат натрия, а в качестве конечного продукта — хлорметил-llew,I?o .-диоксиандрост-4-ен-3-îí-1?Р-карбоксилат с о т.пл. 84-186 С (перекристаллизация из системы тетрагидрофуран/эфир-гексан) .

Пример 4, Хлорметил-1?еа-этоксикарбонилокси-9 -фтор-IIP †окси1бм-метиландрост-1,4-диен-3 — он-17/3карбоксилат (2 г) растворяют в безводном дихлорметане (200 мл) и добавляют при комнатной температуре пиридиний хлорформат (3,5 г) при перемешивании. Полученную смесь перемешивают .в течение 24 ч, затем растворитель концентрируют при пониженном давлеО нии при 10-20 С, Остаток подвергают хроматографии на колонке с силикагелем (Кизель гель 60), используя хлороформ в качестве элюирующего растворителя, с последующей перекристаллизацией из смеси тетрагидрофурана и изопропилового эфира с получением хлорметил-17 <-этоксикарбонилокси-9с фтор-!боем-метиландрост-1,4-диен-3,11дион †?P-карбоксилата с выходом 1,7 г, т.пл.138-140 С.

Пример 5. По примеру 4 получают хлорметил 9 -фтор — 17 -изопроп— оксикарбонилокси-16 1-метиландрост1,4-диен-3,11-дион-l?P-êàðáaêñèëàò, т.пл. 200-201 С.

Пример 6. Используя общую методику примера 1, но заменяя соответствующие реагенты, получают метил-17<а-(2-хлорэтокси)карбонилокси-9м-фтор — 11Р--окси-16 -метиландрост1,4-диен-Ç-îí-I?P-карбоксилат. Продукт после перекристаллизации из изопропанола имеет т„ пл. 223-227 С.

Пример 7, По примеру I получают 2-хлорэтил-1?ññ-этоксикарбонилокси-9 -фтор-II(-окси-16Ф;метиландрост1,4-диен-Ç-îí-1?Р-карбоксилат.Продукт

1318169 после перекристаллизации иэ тетрагидрофурана — гексана имеет т. пл. 243245 С.

Пример 8. Хлорметил-17«этоксикарбонилокси-11 -оксиандрост4-ен-3-îí-178-карбоксилат (0,01 моль) и 1,2-диметилпирролидин (0,01 моль) растворяют в ацетонитриле.(80 мл) и нагревают до температуры кипения с обратным холодильником.. Реакционную смесь выдерживают при этой температуре при перемешивании в течение 4 ч. Примерно 65 мл ацетонитрила выделяют„ затем смесь охлаждают до комнатной температуры и избыток этилового эфира добавляют для осаждения. Осадок отделяют фильтрацией, промывают и сушат в вакууме, таким образом, получая соответствующую четвертичную аммониевую соль.

Пример 9. Следуя общей методике, описанной в примере 1, и используя соответствующие реагенты, получают следующие новые промежуточные продукты:

9С-I: 17с-аллилоксикарбонилокси9 -фтор — IIP — окси-16 †метиландрос

1,4-диен-3 îí-17 -карбоновая кислота;

9С вЂ” 2: 1 Х» — н-пропоксикарбонилокси6,9к — дифтор-IIP-окси — 16 -метиландрост-1,4-диен-3-îí-17Р-карбоновая кислота;

9С-3: 17 -èçîïðîïîêñèêàðáîíèëoêcu-6,9o .-дифтор-11р-окси — 16«-метиландрост-1,4-диен-3-он — 17P-карбоновая кислота;

9С-4: 17сс-этоксикарбонилокси-6 фтор-llP-окси-!баас-метиландрост-1,4диен-3-oí-17pj-êàðáîíîâàÿ кислота;

9С-5: 17aL-н-пропоксикарбонилокси 6 -фтор-11Р-окси-16oL-метиландрост1,4-диен-3-он-I7$-карбоновая кислота;

9С-6: 17а изопропоксикарбонилокси6 -фтор-11 !-окси- 16o ;метиландрост1,4-диен-3-îí-17Р-карбоновая кислота;

9С-7: !А,-метоксикарбонилокси-11 оксиандрост-1,4-диен-3-он-17Р-карбоновая кислота;

9С-8: 17о -метоксикарбонилокси-6«,фтор-11(-окси-lбм-метиландрост-1,4— диен-3-îí-17Р-карбоновая кислота;

9С-9: 17ос-этоксикарбонилокси-IIP— оксиандрост-l,4-диен-3-îí-17 -карбоновая кислота;

9С-10: I7sc-метоксикарбонилокси-9*фтор-lIP-окси-16Р-метиландрост-1,4диен-3-он-17Р-карбоновая кислота;

9С-II: 17g-н-пропоксикарбонилокси9 -фтор †!1 -окси-16р-метиландрост1,4-диен-3-он-170-карбоновая кислота.

Промежуточные продукты представлены в табл. 1.

Пример 10. Следуя методике, описанной в примере 1, и используя соответствующие реагенты, получают следующие соединения:

IОС-I: хлорметил-17 -изопропоксикарбонилокси — 6«,9«. — дифтор-11 !-окси16<-метиландраст-1,4-диен-3 он-17/ карбоксилат;

10С-2: хлорметил-17«-н-пропоксикарбонилокси-бм,9 -дифтор-1!!!-окси16 — метиландрост — 1,4-диен-3 — îí-17Ркарбоксилат;

IОС-3: фторметил-1 -н-пропоксикарбонилокси-9«-фтор-IIP окси-16«.— метиландрост-1,4-диен-3-он-17 !-карбоксилат;

IOC-4: 2-хлорэтил — 17o."-изопропоксикарбопилокси-II)-оксиандрост-1,4-диен-3-он-17Р-карбоксилат;

IOC-5: метил-17«.-(2-хлорэтокси) карбонилокси-9 -фтор-11 -окси-1бы.— метиландрост-1,4-диен-3 — он — 17f3-карбоксилат;

IОС вЂ” 6: хлорметил — 17«-этоксикарбо— нилокси-6к;фтор-Ilp-oêñè-16к-метиландрост-1,4-диен-3-он-le-карбоксилат; ! ОС-7: хлорметил — 17 .-н-пропокси35 к ар 6онилок си-6«,-фтор- l I Я-ок си-16«метиландрост-1,4-диен-3-он-17(3-карбоксилат;

IОС-8: хлорметил-17«,-изопропоксикарбонилокси-6«-фтор — IIP-oKси — 16К—

40 метиландрост-1 4-диен-3-он-I7P карбоксилат;

IОС-9: хлорметил-17

I ОС-10: хлорметил-17«,— метоксикарбонилокси-lIP-оксиандрост-1,4-диен3-îí-17Р-êàðáîêñèëàò;

IOC — 11: хлорметйл-17,-метоксикарбонилокси-6м-фтор-II/-окси-16ы-метил5< андрост-1,4-диен-3-он-17/3-карбоксилат;

lOC-12: хлорметил-17о -метоксикарбонилокси-9ы-фтор-11 — окси-16Р-метиландрост-1,4-диен-3-îí-17Р-карбокси55

IOC-13: хлорметил-17<-н-пропоксикарбонил-окси-9<-фтор-IIP-окси-16/3метиландрост-1,4-диен-3-îí-17Р-карбоксилат.

9 131

Полученные соединения представлены в табл. 2.

Пример 11. К раствору 3 г хлорметил — IIР-окси — 17o. †èçîïðîïîêñèкарбонилоксиандрост-4-ен-3-он-1?/1карбоксилата в 100 мл ацетонитрила добавляют 7,9 г (10 моль) AgI и ука" занную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 12 дн., закрывая реакционную систему от света. Затем реакционную смесь фильтруют и твердый осадок на фильтре полностью промывают этилацетатом. Фильтрат и раствор этилацетата соединяют и смесь промывают водой и насыщенным водным раствором хлористого натрия и высушивают над безводным сульфатом натрия. Растворители отгоняют, получая 2 г неочищенного кристаллического продукта. Продукт подвергают препаративной тонкослойной хроматографии (силикагель 60 F 254, Merck) исполь— зуя в качестве растворителя для элюирования смесь хлороформа и метанола (15:1). Затем продукт перекристал— лиэовывают из смеси тетрагидрофурана и н-гексана с получением 180 мг фторметил-11)-окси-1? -изопропоксикарбонилоксиандрост-. — ен — 3-он-1?P— карбоксилата в. виде бесцветных игл, плавящихся при 207,5-210 С.

Пример 12. По примеру 11, заменяя реагенты, получают следующие соединения:

12-1: фторметил-1?o! этоксикарбонилокси-9к-фтор — 11P-окси-16о †метиландрост-1,4-диен-3-îí-I?P-карбоксилат;

12-2: фторметил — 17o. — н-пропокси— карбонилокси-9 -фтор-II(-окси-16Мметиландрост-1,4-диен-3-он-i?(†карбоксилат.

Пример 13. ITo методике, описанной в примерах 1 или 12, с заменой соответствующих реагентов получены соединения, представленные в табл. 3.

Мягкие стероиды формулы I и их четвертичные аммониевые соли являются сильными местными противовоспалительными агентами. Однако в силу того, что их легкое разрушение in vivo ведет только к неактивному стероидному метаболиту, соединения обладают гораздо меньшей системной активностью, чем известные глюкокортикостероиды, из чьих неактивных метаболи8!69 1G

20 тов они происходят. Многие из соединений совершенно лишены системной активности.

Результаты исследований активности предлагаемых соединений указывают на сильную противовоспалительную активность и минимальную системную активность (токсичность) мягких стероидов формулы I. Благодаря этому соединения могут быть использованы при лечении топических или других локализованных воспалительных процессов, не вызывая серьезных системных побочных действий, обычно проявляемых известными природными и синтетическими глюкокортикостероидами, такими как кортизон, гидрокортизон, гидрокортизон-17Ы;бутират, бетаметазон-17-валерат, триамцинолон, бетаметазон дипропионат и др.

Испытание по инволюции тимуса.

Испытуемыми животными были самки крыс Spague-Davley весом приблизительно по 40-45 r. Одну сторону каждого уха каждой крысы обрабатывали

25 мкл раствора (этанол/изопропилмиристат или ацетон/изопропилмиристат

90:10), содержащего испытываемое соединение. Контрольных животных обрабатывали аналогичным образом, но без испытываемого соединения. Через

24 ч всех крыс умерщвляли и взвешивали, их тимусы (вилочковой железу) удаляли и взвешивали.

В табл. 4 показано влияние топического назначения стероидов на вес тимуса, где SD — стандартное (среднеквадратичное) отклонение.

Изменение веса тимусов является мерой системной активности, а следовательно„ токсичности. Чем ниже вес тимусов, тем выше системная активность.

Как видно из приведенных данных, даже гидрокортизон, природный глюкокортикоид„ вызывает значительное снижение веса тимуса по сравнению с контролем. Снижение веса тимуса, вызванное равными дозами предлагаемых соединений, гораздо менее значительно, следовательно„ эти соединения имеют гораздо меньшую системную активность, чем гидрокортизон.

Изучение побледнения.

Исследования побледнения людей типа Nekenzie предпринимали для изучения эффектов побледнения, вызываемых испытываемыми соединений, в частКак видно из табл. 5, хлорметил17 -этоксикарбонилокси-11Р-оксианд рост-4-ен-3-он-17Р-карбоксилат существенно ингибирует образование опу- холи (а следовательно и увеличение веса) уха, вызываемое кротоновым маслом, т.е. соединение проявляет значительную противовоспалительную активность. С другой стороны, в противоположность действию, вызываемому.

55

13181 ности хлорметил-17 -этоксикарбонилокси-1113-оксиандрост-4-ен-3-îí-17р.карбоксилатом. Способность соединений вызывать побледнение у людей, как было обнаружено, связано с их противовоспалительной активностью.

Испытываемое соединение растворяли в смеси этанол/изопропилпиристат (90:10 или 70:30) в концентрациях

0 031 0 01 0 003 0 001 и 0 0003 М 10

Кусочки марлевого бинта пропитывали раствором по 50 мкл и повязку накладывали на предплечье. После 6-часовой выдержки повязку удаляли. Через 1-5ч после удаления повязки наблюдали по- 15 бледнение даже при самых низких концентрациях испытываемого соединения.

При испытании гидрокортизона побледнение не наблюдалось при концентрациях гидрокортизона ниже 0,03 М. 20

Кроме того, замечено, что гидрокортизон в концентрации 0 03 M вызывал приблизительно ту же степень побледнения, что и хлорметил-17к-этоксикарбонилокси-111б-оксиандрост-4-ен-17ркарбоксилата в концентрации 0,001 M.

Испытание с отеком уха.

Опытными животными были крысы

Sprague-Dawley весом приблизительно по 150 г. Испытываемое соединение 30 растворяли в ацетоне, содержащем 5Х кротонового масла, и 50 мкл раствора наносили на внутреннюю поверхность правого уха крысы. Контрольную группу обрабатывали идентично только носителем, т.е. 57-ным раствором крото-! нового масла в ацетоне. Через 6 ч после нанесения кротонового масла одну и ту же область каждого уха удаляли путем рассечения под анестези- 40 ей. Через 48 ч после обработки стероидом животных умерщвляли и тимусы и надпочечники удаляли и взвешивали.

Результаты испытаний; показывающие ингибирующее действие топически при- 45 меняемых стероидов .на опухоль уха, вызванную кротоновым маслом, сведе-ны в табл. 5.

69 12 бетаметазон-17-валератом, предлагаемое соединение не вызвало значительного уменьшения веса тимуса по сравнению с контролем, т.е. оно не обнаружило значительной степени системной активности.

Испытание с образованием гранулемы.

Испытываемое соединение растворяли в ацетоне и определенные дозы с различными концентрациями инъецировали в хлопковые пилюли-шарики. Пилюли высушивали, а затем по одной пилюле имплантировали под кожу каждой подопытной крысе-самцу Sprague-Dawley весом 152-189 r. Через шесть дней животных умерщвляли и грануляционную ткань (гранулему), которая образовывалась внутри шарика и вокруг имплантированного шарика, удаляли, высушивали и взвешивали. Кроме того, удаляли и взвешивали тимусы и надпочечники. Способность соединения ингибировать образование гранулемы в данном опыте указывает на локальную противовоспалительную активность: чем ниже вес грануляционной ткани, тем выше противовоспалительная активность.

С другой стороны, значительное снижение веса тимуса является свидетельством высокой системной активности; и наоборот, незначительное снижение веса тимуса испытываемым соединением по сравнению с контролем свидетельствует об отсутствии (или наличии минимальных) системных побочных эффектов.

Влияние стероидов при местном назначении на вес тела, вес тимуса и образование тканевой грануляции, вызванной имплантацией крысам хлопковых шариков показано з табл.6-9.

Приведенные в табл. 6-9 данные . свидетельствуют о том, что предлагаемые соединения проявляют значительную противовоспалительную активность при более низких дозах, чем известные стероиды (гидрокортизон-17-бутират и бета-метазон-17-валерат). С другой стороны, все известные стероиды резко снижают вес тимусов и, таким образом, показывают очень высокую системную активность, в то время как предлагаемые соединения почти не снижают вес тимусов. Таким образом, предлагаемые соединения имеют гораздо больший терапевтический коэффициент, т.е. разграничение локальной

13 I31 противовоспалительной и системной активности, чем известные стероидные противовоспалительные агенты.

Па результатам испытаний. вычисляли величины Egao ЕД5о " ЕДбо и относительную силу действия (относительную активность) предлагаемых соединений, которые показаны в табл.!О .

Сила .действия хлорметил-1!Р-окси-17аизопропоксикарбонилоксианцрост-4-ен3-он-176-карбоксилата принята за 1 т при каждом уровне ЕД, а силы действия других соединений выражены относительно данной величины. Величины ЕДщо, ЕД и ЕД представляют собой дозы, требуемые для достижения соответственно 40, 50 и 607 снижения веса грануляционной ткани.

Испытание по ингибированию тимуса.

Определяли действие отдельных соединений на вес тимусов у крыс при систематическом назначении лекарства (подкожно). В каждом из исследований использовали самцов крыс Sprague-Dawley. Испытываемые соединения суспендировали в 0,57.-ной карбоксиметилцеллюлозе и инъецировали подкожно один. раз в день в течение трех дней. На пятый день (через 48 ч после последней обработки) животных умерщвляли и регистрировали вес тимусов. Увеличейие (прирост) веса тела измеряли через 24 ч после последней обработки.

Результаты опытов представлены в табл. 11 — 13.

Величины ТЕД о, ТЕД о (тимолитические эффективные дозы, требуемые для достижения 40 и 50Х ингибирования веса тимусов соответственно) и относительная сила действия предлаГаемых соединений и известных стероидов, назначаемых подкожно, показаны в табл. 14, причем относительная сила известного стероида бетаметазон-17валерата.принята за 1, а сила других соединений выражена относительно данной величины. Очевидно, что чем выше ингибирование активности тимуса в заданной дозе, тем более токсичным является соединение.

Определяли тимолитическую активность предлагаемых соединений по сравнению с бетаметаэон-17-валератом.

Лекарство вводили крысам внутривенно, при этом испольэовали слепой анализ на гранулему в хлопчатобумажном шарике. Использовали самцов крыс Spra8!69 14

5

1О !

20

gue-Dawley весом по 185 r (166-196 г).

Два хлопчатобумажных шарика по 30 мг, не содержащих испытываемых соединений, стерилизовали и имплантировали подкожно в спину кажцого опытного животного. Данный цень считался днем нулевой имплантации. Испытываемые соединения, суспендированные в 0,8Х-ном полисорбате-80, вводили внутривенно один раз в день последовательно в течение трех дней, начиная с первого дня. На 5-й день животных умерщвляли и два шарика с соответствующими гранулемами удаляли, высушивали в печи в течение ночи при 58 С и взвешивали (сухой вес гранулемы).

Вес тимусов и конечный вес тела так>ке регистрировали. Результаты даны в табл. 15.

В предыдущих опытах определяли дезактивацию мягких стероидов, вводимых внутривенно крысам. Соотношение между силой действия испытываемых стероидов и бетаметазон-17-валерата против локального воспаления было

283:0,7 (табл. 11). Это означает, что испытываемые соединения проявляют локальную противоспалительную активность, которая приблизительно в

400 раз выше активности бетаметазон17-валерата. Испытываемые соединения вводили крысам внутривенно для проверки на системную противовоспалительную активность по сравнению с бетаметазон-17-валератом. Испытываемые соединения обладают более низкой активностью по торможению образования грануляционной ткани, а также в отношении активности обратного развития тимуса, чем бетаметазон-17-валерат. Из результатов опытов можно сделать предположение, что соедине-. ния, которые нелегко подвергаются метаболизму (дезактивации), обладают системной противовоспалительной акитвностью, как это имеет место в случае с бетаметазон-17-валератом.

Величины ЕД, вычисленные по данным анализа на локальную гранулему в хлопчатобумажном шарике, и величины

ТЕД, вычисленные на основе опытов по ингибированию тимуса, испольэовали для определения относительной силы действия и терапевтического коэффициента (индекса) предлагаемых соединений по сравнению с известными стероидами (табл. 16).

1318169

OH. с=о о

11 — — ос-ов, R3

f5

Более

<(О

25 оц

c=o о

II

---ос-ов

Соединение

Температура о плавления, С з 4 5

4 5 он

F H iÑi Н

1,4 227-229 (ТГФ/гексан) он

С 1,4 Н

148-155 (разложение этанол/вода) 1,4 157-159 (этанол/вода) Данные табл. 16 показывают сильную противовоспалительную активность и минимальную системную токсичность предлагаемых соединений.

Токсичность определяли путем подкожного введения соединения мьппам, лишенным пищи в течение 12 ч перед испытанием.

Получены следующие значения LD 50, мг/кг:

2Р-2 Более 5000

2А-3

tt

2А-5

2А-7

2А-8

2А-12

2А-19 5000

2А-20

2А-21

2А-23

2А-27

Формула изобретения

Способ получения стероидных соединений общей формулы Т где R, — низший галоидалкил;

RI — HH3HIHH (IJIKHSI

9С-1 -СН СН=СН о(.-СН

9С-2 -СН СН СН î -CH F F

3 3 г 3

9С-3 -СН < -СН F F

СН

16

К3 Водород, < — или /(-MeTHJI>

R — водород или фтор;

Ф

К вЂ” водород, фтор или метил;

Z — карбонил или 8 -оксиметилен, 5 пунктирная линия означает возможную углерод-углеродную связь, или их четвертичных аммонийных солей, отличающийся тем, что, соединение общей формулы II

f0 где R2 IRÇ-.RÔ R и пунктирная линия имеют указанные значения;

М вЂ” щелочной металл, подвергают взаимодействию с соединением формулы

R W где R имеет указанные значения;

W — гелоген, и прй необходимости полученные со единения формулы I, где R< — низшая галоидзамещенная группа, подвергают взаимодействию с третичным амином или с ненасьпценным амином, с последующим выделением целевых продуктов в свободном виде или в виде четвертичных аммонийных солей. (Таблица 1

1318169

18

Продолжение табл.l

9С-4 -С Н т

1,4 105-108 (ТГФ/н-гексан) ы-Сн Н Р

1,4 150-152 (ТГФ/н-гексан) 1,4 124-127 (ТГФ/н — гексан) 1,4 178-180 (ТГФ/н-гексан) 9С-7 -СН

3 .

Н Н

1,4 182-183 (ТГФ/н-гексан) 9С-8 -СН

Ы-СН Н F

1,4 153-156 (ТГФ/н-гексан) Н Н

9С-9 - С Н

1,4 186-188 (разложение

ТГФ/н-гексан) 9С-10 -СН

Р СН, F Н

1,4 143-144 (ТГФ/н-гексан) Соединение

Температура о плавления, С

I ОС- I

22 2-224

-(ТГФ/гексан) 1,4

I0C-2

-СН Cl г

-СН СН СН м-СН

F F

10С-3

-СН Р

СН СН СН,е СН Р Н

Н Н

9С-5 — (СН,) СН о -Снз Н Р

z 3

9С 6 — СИ М-СН, Н F сн

9С-1i -СН,-СН,СН, -СН,, Р Н сн, СН С1 сн .СИЗ

I ОС-4 -CH CH Cl — СН

СНЗ он .С, Н

OH

-С, Н

Он г

Г он с.

Н

ОН .С.

Н

0Н .С, Н

Он

С, Н ОН

С, Н .

ОН с, И

ОН с H он

С, Н он .С, н

Таблица 2

l,4 180,5-181,5 . (ТГФ/гексан) 1,4 165-165,5 (ТГФ/гексан) 1,4 188,5-189,5 (ТГФ/гексан) 1318169

4 5 6

-СН СН Cl е -СН

IОС-5 -СН

Р Н ес-СН з

Н F (СН ) СН М, СН

Н F

-СН Cl г

IОС-7

I0C-8 -СН С1

Н Н

Н Н

kCH, Н F

РСН, Н

IOC-13 -СН С1

F =Н

-СН -СН СН3 р-СН

Температура о плавления, С

Соединение

4 5

ОН Ñ.

Н ОН

-С.

Н оН .-С. н

ОН с Н. 239-240,5 (ТГФ/гексан) 1,4

С Н

12-1 ос-СН з

-СН F г

165-165,5 (ТГФ/гексан) 1,4

1 2-2

-СН F

226-233 (этанол/н-гексан) 1,4

Н Н

214-218 (этанол) Н Н

1,4

IОС-6 -СН С1 -С Н .

CHü

-CH -, Н сн, 10С 9 «СН С1 -(CH ) СНз H

IОС-IO -СН Cl -СН

2 э

10С-II -СН С1 -CH

IОС-12 -СН С1 -СН

-СН, СН,СН, eL-CH F H

13А-1 . -СН F -С Н

IЗА-2 . СНгР СН(СНэ)а H он с, Н он гс Н

0Н

С, Н оН

С, Н

ОН с, Н он

Сг Н он

С, H г

С, Н

ОН с, Н

Продолжение табл.2

1,4 223-227 (иэопропанол) l,4 153,5-154,5 (ТГФ/н-гексан) 1,4 98,5-99,5 (этилагетат/нгексан) 1,4 124,5-126 (этилацетат/нгексан) 1,4 180,5-181,5 (ТГФ/н-гексан) 1,4 235-237 (ТГФ/н-гексан) 1,4 244,5-245,5 (ТГФ/н-гексан) 1,4 236-236,5 (ТГФ/н-гексан) 1,4 183,5-184 (ТГФ/н-гексан) Таблица 3 1318169

Таблица 4

Вес тимуса, мг/100 r живого веса крысы

Коли- Количество чество

Соединение

Общий вес крысы г .к

Прирост, Ж

+52

Начало

Конец ввеподопытденного соньцс единенияя, живот

364>29

48,44 61,42 27 +6

Контраль—

Гидрокортиэон 0,75 8

49,44 61,15 24+ 7

2741 45

ХлормеТКп-1 1ргидрокси17 -метоксикарбонилоксиандрост-4ен-3-он17)-карбоксилат 0,75 8

Хлорме; тил-17k48,06 62,10 2945

34713! этоксикарбонилокси11 -гидроксиандро ст4-ен-3он-17J5карбоксилат

0,75 7

309+4

45,57 60,60 33+6

Таблица 5

Увеличение, 3

Замедление>

5ес уха, мг

Относительжб1 вес органа, мг/100 г хивогс веса

Соедииеес спаленка- невылеченкого од" пмтТимус Надпочечник во

5 75,214,5 46,611,4

0,3 5 62,2i3 0 50,812,4

61,4+8,9

333415 23,3+1,7

290>25 . 26,012,5

Контроль

23,317,2

62,1

3,7й8,1 94,0 288+21 20,3+0,8

3 5 52611 8 51е &й3в2

Хлорметил"

l7et-втокснкарбонилокси-1115-гидрокснакдрост-4"ен3-он-176"" карбоксилат

l 5 55эбе216 48э4tl ьО, 14е0б бз5 7?92 293121 18ý7 1 ° 4

1. 31 81 69

23

Продолжение табл.5

Довировка мг/кг

Вес уха, мг

Увеличение, ЗамедХ ление, Х

Относительный вес органа, мг/100 г киного веса

КоличестСоединение воспаленно- невыпеченво подопытго ного

Тнмус Надпочечник ных кнвот

Гндрокорти9ОН-)7-бутнрат

БетамезонI7-валерат 1 5 55,4+ 1,2 50,4+2,0 10,9+6,3 82,2 267+19 18,911,9

Т а б л н ц а 6 тносительный вес орга, мг/100 r киного ве(Х уменьиения) оочечиик

23,7+1,1

10 40,5i0,8 43,7+4,2

326i22

20,6

22,9+2,6 (3,4) 282i13 (13,5) 34,7+4,3

8 36,0т2,8

0,1

22,А!,0 (3,8) 298i16 (8, 6) 42,1

25,3+2,3

8 33,011,3

0,3

2l,8+1,3 (8, О) 304 10 (6, 7) 14,0i!,8

68,0

8 32,8+0,9!

9,6+1,1 (l7,3}

278+21 (14,7) 57;2

7 30,7il,5!

8,7i2,3

7 33,4+1,3

19,1+ I 1 (!9,4) 218+15 (33,1) 43,7

24,6+2,6

33,4i1,4 32,2 5,0

27,1il 4 (-14,3) 73i5 (77,6) 26,3

1Ъидрокортн- -I вон-1 7-бутират

50 ° 6!

6,5 1,2 (30 ° 4) 47+3 (85,6) 1S,9i1,4 2l,6i2,2

10 8 4,9+1,0

32+3 (90,2) l6,8+1,2 (29,1) 33,3

29,2й3,1

l9,0

15,511,3 (34,6) 16,6М,9 35,4 7, 3

47,2 (85,6) .8

Ветамезон- 1

17-валерат

14,9i1,7, 31,612,1

38 3 (88>3) 27,7

l3,6i0,9 (42,6) 12,6i0,9 (46,8) 17,0+2, 1

43 4 (86,8) 40,7i2,6 ° 6,9

I0 8

Хлорметнл1 76с-9токсикарбоннлокси ! 1g1-гидроксиандрост-4-ен3-он-17 карбоксилат

Хлорметнп-, 11р-гидрокcs-1 7в -метоксикарбонилоксиандрост-4-ен-3он-1 78-карб-1 .оксилат

1 5 50,0й 2 Э 52 ° 01 2 ° 5 Зз 6i3> 5 106 0 303i21 20 ° 2+Ою 7

1318169

Замедлениее, Х

Сухой вес,мг

33онтролъ

445+20

t3,8 452i29

37,3 469+25

81,2+6,3

566i28

32,И1,4

34,9i2 7

33 9il,6

485136

Хлорметил" 100

1113-гидрокси-37g-изо» ЗОО лролоксикарбонил- 1000 оксиакд рост-4-ек- 3000 .З -!76карбокси»

431+ 20

34,0+2,6 305i16

70,3 464630

75,0 459+24

292+ 7

32,492,3

37,2 523+26

30 8 .. 32,411,2

100 7

300 .8

1000 8

49,4

537+ 31

35,0i1,5

34,44 1,3

525+28

53,1

29,4i),5

423i26

77,2

472+23

388+31

32,4il,t

Хлорметил . О,Э

17к-зтохснкарбоннлок- 1 си-%а-фторl 113-гкдрок- Э си-1 Ы-метиландрост- 10

3,4-диен-зон-17 -кар- 30 бокснлат

37,3й1,5

331+ I l

34,3+l,l

36,1+1>1

31,3+1,4

313+ l 3

2ООНО

45,3 526130

66,9 47!< 20

423+19

Хлорме тки-

М-4уор- l 133-. гкцрохси 3

3 Ук=и9опрон оксккарбо- tO нклокси36ф-метил» 30 андрост3,4-диен 3 он-37(""кврбоксилат

35)i I 9

63,2 474+25

362й 8

315+12

75,5 489+26

3 ндрохорти- 300 6 зок-17-бу тират 3000 .6

26,2+1,7

26,211,2

3000 6 6,74 2,2

87,0

65,5 58+5

66,5 46i7

49,0 364i24

10000 6

-290i2 i 4

89,7

400919, Зетамеъон- 300 7

3У-налерат

300 8

24,9it 9

18,2

22,3+! ° 2

347il5

ЗЬЭ+28

5 3+3,0

1000 -У

82 ° 7

53,1 77т5

47,0 6313

374i33,9 33,9 43,0t4,1. -3000 8

6,621,4

85,8

Хпорметил11Р-гидрокси«17к-ивонролоксикарбонилоксианд рост-1,4дне н-3-ои1713-карбоксил

33,0i3,7

30,4+1, 1

33,0+3,5

31,8Т1,7

4Э2+ 15

417127

369+18

289212

333>21

366+24

329114

31 ti7 вая грануляцкя

l4,3 70,0т6,0

23,9 50,912,8

46 1 24i I42i7

48,4 20.,3it,3

23,У 51,0+2,8

26,3 43,1é5,8

34 ° 8 38э 1 5е9

48,9 18,5+2,4

16,6 57,3+5,0

31,4 36,0+2,4

41,5 27,4+2,9

44 7 22 1+ Э 6

48,8 20,4 2,4

25,3 44,4+5,4

38,0 26,9 4,4

36,0 29,9 3,3

44,3 19,9+2,3

4l,2 34,0+5,3

35,3 35,3i4,2

41 ° 9 28,012,7

45 1 27,2+2,4

29,3 41,142,7

38,7 ЗЗ,З З,6

35,9 38,1й4,8

Таблица 7

Тимус

Вес,мг Умекьиение, Х

29,4 492+ 26

55,2 519022

66,3 472+16

72,8 521+ 35

74,9 505+26

58,1 - 353йЭУ 20,7

56,5 99+7 .77,8

59,0 264i29 40,7

1318169

28 Т аблнпа 8 лн- Приб ство веса и

Соед меньенне, й

Контроль

33,5il,O 525il9

32,5%1,I 499 36

80,1+5,1

495 36

5,0 61,8i5,7 22,8 50li29

36,310,9 437 24

16,0 57,016,2 28,8 566831

19,6 47,525,0 40,7 500427

33, 8 1, 3 422+ 32

29,5 34,8+-5,5 56,6 421230

35,6И,О 454+27

31,9i0,8 415630

13,5 55,1+ 6,2 31,2 523+28

21,0 42,9 5,! 46,4 453<21

34,Р 1,9 350+18

33,3 28 .5 2 8 64,4 547й26

547i 26

33, 1+1,6 350+13

479 25 3,2

31,8+1,6 375 19

Ветамеэои-17- 10 валерат

21,5

46,2+7,4

42,3 484+23 2,2

41,014,2 48,8 378i30 23,6

20,2

1 00

3,4

478i22

Клобетазол- 1

17-пропионат

449+21

9,3

30,7 37,9+6,8 52,7 322+22 30,9

68,2 174+26 60,8

39,0 25,5 2, 1

38,! 23,9+3,3 70