Способ определения функциональной активности тимусзависимых лимфоцитов

Способ определения функциональной активности тимусзависимых лимфоцитов

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

Изобретение относится к иммунологии . Цель изобретения - повьпиение точности способа. К взвеси лимфоцитов добавляют эритроциты барана и центрифугируют . Подсчитывают число розеткообразующих клеток. Затем на верхнюю часть плеча накладывают манжету, в которой создают давление, превышающее систолическое на 20-30 мм рт.ст. Через 5 мин манжету распускают и вновь создают в ней давление через 30- 40 мин. После снятия манжеты повторно берут кровь для определения Т-активных лимфоцитов. У здоровых доноров отмечают после пробы прирост числа Т-активных лимфоцитов не менее чем на 15%.. . (С W

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИН

С19> П» (бц 4 G 01 N 33/48 —. «1

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И OTHPbiTHA (21) 3891422/28-14 (22) 26.04.85 (46) 07.07.87. Бюл. 9 25 (71) Сибирский филиал Всесоюзного онкологического научного центра (72) И.И.Тютрин, Е.C..Смольянинов и А.Т.Адамян (53) 6 16.375(088.8) (56) Пухальский А.Л., Гуторова Н,И.

Проблемы микробиологии и иммунологии инфекционных болезней. M., 1979, т. 22, с. 41-53. (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ФУНЩИОНАЛЬНОЙ АКТИВНОСТИ ТИМУСЗАВИСИИХ ЛИМФОЦИТОВ

22 51 А1 (57) Изобретение относится к иммунологии. Цель изобретения — повышение точности способа. К взвеси лимфоцитов добавляют эритроциты барана и центрифугируют. Подсчитывают число розеткообразующих клеток. Затем на верхнюю часть плеча накладывают манжету, в которой создают давление, превышающее систолическое на 20-30 мм рт.ст.

Через 5 мин манжету распускают и вновь создают в ней давление через 3040 мин. После снятия манжеты повторно берут кровь для определения Т-активных лимфоцитов. У здоровых доноров отмечают после пробы прирост числа Т-активных лимфоцитов не менее чем íà 15Х.

1322151

776

Подписное род, ул. Проектная:, 4

Изобретение относится к медицине, в частности к иммунологии.

Целью изобретения является повышение точности способа.

Способ осуществляется следующим 5 образом.

Из периферической вены берут кровь в количестве 5-6 мл в пробирку с гепарином 25 ед/мл. Суспензию лимфоцитов выделяют общепринятым методом в градиенте фиколл-верографин. Для выявления Т-активных лимфоцитов к

0,2 мл взвеси лимфоцитов добавляют

0,2 мл взвеси эритроцитов барана и центрифугируют 5 мин при 1000 об/мин.

Число розеткообразующих клеток подсчитывают в нативном состоянии в камере Горяева. Затем на верхнюю часть плеча накладывают манжету сфигмоманометра, в которой создают давление, превышающее систолическое на 2030 мм рт.ст. Через 5 мин манжету распускают и вновь раздувают до указанных величин через ЗΠ— 40 мин. Через

5 мин манжету распускают и повторно берут кровь для определения Т-активных лимфоцитов.

При этом у здоровых доноров наблюдается прирост числа Т-активных лимфоцитов не менее чем на 15%. В то же время у большинства больных (13 из 15) число Т-активных лимфоци" тов после пробы снижалось и только у 2 наблюдалось повышение не более чем на 57. от исходного уровня. 35

Пример 1. Доброволец Л., 30 лет, здоровая. Исследование проводилось в условиях основного обмена.

Сухой иглой пунктируют левую локтевую вену и забирают кровь в пробирку 40 с гепарином. Иглу удаляют. На верхнюю часть правого плеча накладывают манжету сфигмоманометра, в которой создают давление 140 мм рт.ст. Через

5 мин манжету распускают и вновь раз- 45 дувают через ЗО мин, Через 5 мин манжету снова распускают и забирают кровь для определения Т-активных лимфоцитов до пробы 46,, после пробы 73.

Величина прироста 587. 50

Пример 2. Доброволец А., 35 лет. Исследование проводилось в условиях основного обмена. Локальная гипоксия создавалась двукратно в течение 6 мин с интервалом 40 мин. Ре- 55 зультат: до пробы содержание Т-актив1

ВНИИПИ Заказ 2856/39 Тираж

Произв.-полигр. пр-тие, г. Ужго.ных лимфоцитов 41%, после пробы 607..

Процент прироста 507..

II р и м е р 3. Больная К. Диагноз: рак молочной железы III-В стадии, состояние после комбинированного лечения. Исследование проводилось аналогичным способом. Результат: процент Т-активных лимфоцитов до пробы 78, после пробы 64. Величина прироста составила отрицательную величину — 18%.

Временной интервал 5-6 мин для создания локальной гипоксии является оптимальным, так как за это время происходит статистически значимое снижение рО венозной крови на 7,91,68 мм рт.ст.

Предлагаемым способом можно оценить функциональные воэможности Т-лимфоцитов больного человека, поскольку у здоровых доноров наблюдается прирост числа Т-активных лимфоцитов не менее чем на 15% в то время, как у большинства больных (807) число Т-активных лимфоцитов после пробы снижалось.

Способ опенки функциональной активности Т-активных лимфоцитов позволяет за короткое время (1,5-2,0 ч), используя объективный критерий (снижение pQ венозной крови), определить функциональную недостаточность тимус-, зависимых лимфоцитов у отдельного индивида, что невозможно осуществить при однократном исследовании. Это позволяет своевременно выявлять у больных скрытую иммунодепрессию, быстро осуществлять коррекцию функциональной недостаточности Т-системы иммунитета, используя соответствующие иммуномодулятбры.

Формула и з обретения

Способ определения функциональной активности тимусзависимых лимфоцитов человека путем выявления содержания

Т-активных лимфоцитов в венозной крови верхней конечности, о т л ич а ю шийся тем, что, с целью повышения точности способа, содержание Т-активных лимфоцитов выявляют до и после остановки кровотока и по разнице их содержания определяют функциональную активность лимфоцитов, при этом остановку кровотока осуществляют дважды с помощью манжеты в течение 5 — 6мин с интервалом 30-40 мин.