Способ электрофоретического разделения смесей веществ

Способ электрофоретического разделения смесей веществ

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

Изобретение относится к области аналитического приборостроения и может найти применение для разделения и анализа растворимых электрофоретических соединений, например высокои низкомолекулярных пептидных соединений, коллоидных частиц, включая субклеточные частицы и клетки и др., а также в медицине, биологии, сельском хозяйстве, пищевой промышленности. Целью изобретения является улучшение разделения смеси и упрощение детектирования разделенных веществ за счет вывода их в разное время через один канал с выхода электрофоретической камеры. Цель изобретения достигается тем, что разделение осуществляют в потоке цилиндрической формы. Электрическое поле создают с помощью электродов между зоной с максимальной величиной скорости потока электролитаносителя и зоной с минимальной величиной скорости потока. Ввод смеси разделенных веществ в поток электролита-носителя осуществляют периодически в виде дозированных порций. После введения порций разделенной смеси на вход электрофоретической камеры поток электролита-носителя останавливают на время, достаточное для перемещения заряженных электрофоретических частиц, затем подачу электролита-носителя возобновляют и одновременно меняют направление электрического поля на противоположное путем изменения полярности элект родов. Способ реализуют в пульсирующем электрическом поле путем подачи на электроды импульсов напряжения одинаковой полярности. Это позволяет упростить детектирование и улучшить разделение компонентов смеси. 1 сл со N5 СО ;о со

СОЮЗ СОВЕТСНИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИН

„.SU 1323937 А 1 (51) 4 G 01 iV 27 26

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ

К А BTGPCHGMV СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 3901265/24-25 (22) 27.05.85 (46) 15.07.87. Бюл. № 26 (71) Всесоюзный научно-исследовательский и конструкторский институт хроматографии (72) Э. П. Скорняков, П. П. Золотарев, В. Н. Хохлов и Ю. А. Леликов (53) 543.257 (088.8) (56) Лабораторное руководство по хроматографическим и смежным методам / Под ред. О. Микеш. М.: Мир, 1982, ч. II, с. 685—

689.

Авторское свидетельство СССР № 836573, кл. G 01 N 27/26, 1981. (54) СПОСОБ ЭЛЕКТРОФОРЕТИЧЕСКОГО РАЗДЕЛЕНИЯ СМЕСЕЙ ВЕЩЕСТВ (57) Изобретение относится к области аналитического приборостроения и может найти применение для разделения и анализа растворимых электрофоретических соединений, например высоко- и низкомолекулярных пептидных соединений, коллоидных частиц, включая субклеточные частицы и клетки и др., а также в медицине, биологии, сельском хозяйстве, пищевой промышленности.

Целью изобретения является улучшение разделения смеси и упрощение детектирования разделенных веществ за счет вывода их в разное время через один канал с выхода электрофоретической камеры. Цель изобретения достигается тем, что разделение осуществляют в потоке цилиндрической формы.

Электрическое поле создают с помощью электродов между зоной с максимальной величиной скорости потока электролитаносителя и зоной с минимальной величиной скорости потока. Ввод смеси разделенных веществ в поток электролита-носителя осуществляют периодически в виде дозированных порций. После введения порций разделенной смеси на вход электрофоретической камеры поток электролита-носителя останавливают на время. достаточное для перемещения заряженных электрофоретических частиц, затем подачу электро. пита-носителя возобновляют и одновременно меняют направление электрического поля на противоположное путем изменения полярности элект родов. Способ реализуют в пульсирующем электрическом поле путем подачи на электроды импульсов напряжения одинаковой полярности. Это позволяет упростить детектирование и улучшить разделение компонентов смеси.

OflHCAHHE HSOEPETEHNR

1323937

СоставительИ.Рогаль

Редактор A. Лежнина Техред И. Верес Корректор B. Бутяга

Заказ 2959/48 Тираж 776 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж вЂ” 35, Раугиская наб., д. 4/5

Производственно-полиграфическое предприятие, r. Ужгород, ул. Проектная, 4

Изобретение относится к аналитическому приборостроению и может быть использовано для разделения и анализа растворимых электрофоретических соединений, например высоко- и низкомолекулярных пептидных соединений, коллоидных частиц, включая субклеточные частицы и клетки и др., в медицине, биологии, сельском хозяйстве, пищевой промышленности и т. п.

Целью изобретения является улучшение разделения смеси и упрощение детектирования разделенных веществ за счет вывода их в разное время через один канал с выхода электрофоретической камеры.

Способ осуществляют следующим образом.

Пример. Разделению подвергали смесь нуклеиновых кислот, включающую аденозинмонофосфат, аденозиндифосфат и аденозинтрифосфат. Для разделения использовали трубчатую колонку из нержавеющей стали длиной 35 см и диаметром 8 мм. В качестве центрального электрода использовали платиновую проволочку диаметром 0,5 мм.

В качестве электролита-носителя применяли буферный раствор ацетата аммония при рН 5,0. Подачу электролита в колонку осуществляли с помощью насоса. Скорость подачи составляла 30 мл/ч. Напряженность электрического поля между электродами составляла 50 В/см. В качестве детектора использовали УФ-фотометрический детектор, имеющий фильтр с длиной волны поглощения 260 нм. Пробу разделяемой смеси вводили в поток электролита-носителя дозированной порцией 0,5 мкл с помощью кранадозатора.

После ввода пробы смеси на вход колонки поток электролита-носителя останавливали

5 и в остановленном потоке разделяемые вещества подвергали действию электрического поля напряженностью 50 В/см в течение

3 мин, осуществляя концентрирование веществ в узкой зоне одного из электродов.

Затем возобновляли поток электролитаносителя и переключали полярность электродов на обратную. На хроматограмме было отчетливо зафиксировано разделение всех компонентов.

Формула изобретения

Способ электрофоретического разделения смесей веществ под действием радиального электрического поля, включающий введение разделяемой смеси в поток электролита-носителя и детектирование разделенных компонентов смеси, отличающийся

20 тем, что, с целью улучшения разделения смеси и упрощения детектирования разделенных компонентов, ввод разделяемой смеси осуществляют периодически дозированными порциями, причем после введения порции смеси поток электролита-носителя останавливают, производят разделение анализируемой смеси на положительно и отрицательно заряж-нные фракции, а затем возобновляют подачу электролита-носителя и одновременно изменяют направление электричеЗ0 ского поля на противоположное, и проводят окончательное разделение компонентов смеси.