Способ определения активности фагоцитов крови

Способ определения активности фагоцитов крови

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

Изобретение относится к иммунологии . Цель изобретения - повышение точности определения. Цельную кровь обрабатывают ультразвуком в импульсном режиме, смешивают ее с раствором нитросинего тетразолия и инкубируют. Делают мазки, фиксируют их, окрашивают и подсчитьгеают формазанположительные клетки. Чувствительность реакции в выявлении нарушения активности фагоцитоза существенно возрастает при стимуляцииультразвуком. ОО: 1C О) UD 00

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИН (19) (И) 26998 А1 (5()4С 01 М 33 48

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ н вторСКомУ свиДКтеЛьСТВЬ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ HOMHTET СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ (21) 3763930/28-14 .(22) 11.04.84

: (46) 30.07.87. Бюл. и 28

I (71) Минский государственный медицинский институт (72) Г,П.Матвейков, Ю.М.Досин, Е.С.Калия и С.А.Крюк (53) 615.375(088.8) (56) Park В.Н. Good В.А. -NBT-test

stimulated Luncet, 1970, 2, 616. (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АКТИВНОСТИ

ФАГОЦИТОВ КРОВИ (57) Изобретение относится к иммунологии. Цель изобретения — повышение точности определения. Цельную кровь обрабатывают ультразвуком в импульсном режиме, смешивают ее с раствором нитросинего тетразолия и инкубируют.

Делают мазки, фиксируют их, окрашивают и подсчитывают формазанположи- тельные клетки, Чувствительность реакции в выявлении нарушения активности фагоцитоза существенно возрастает при стимуляции ультразвуком.

98 2 за не обнаружено. При стимуляции фагоцитирующих клеток УЗ (интенсивность 7 мВа/см, резонансная частота

2,5 мГц, время воздействия 5 мин) у данной больной получен результат—

16Х формазанположительных клеток, т.е. имеется значительное счижение по сра.внению с результатами, полученным в норме (26,0 + 2,617).

Таким образом, чувствительность реакции в выявлении нарушения активности фагоцитоэа существенно возрастает при стимуляции ультразвуком.

Пример 2. Определение активности фагоцитоза со стимуляцией УЗ

{с укаэанными ранее параметрами) проведено у донора Ц-ко в 10 параллель ных пробах. Результа.ты исследования:

25, 24, 21, 22, 24, 25, 21, 21, 23, 227 формаэанположительных клеток, Данные статистической обработки;

М .+ гп 22,7 + 0,45, 6 = 1,7; В =4(21-25). Как свидетельствуют приведенные данные, воспроизводимость реакции достаточно велика, в особенности в сравнении с другими способами стимуляции фагоцитоза.

Точность способа по сравнению с известным возрастает примерно в 2-3 раза. Предлагаемый способ может быть использован в клинической практике и при скрининг-обследованиях.

Способ определения активности фагоцитов крови путем их стимуляции и оценки фагоцитоэа в присутствии нитросинего тетраэолия с последующим подсчетом клеток, содержащих нитросиний формаэан, о т л и ч а ю щ и йс я тем, что, с целью повьппения точности, стимуляцию осуществляют путем обработки крови ультразвуком интенсивностью 6,0-8,0 Вт/см с резонансной частотой 2,64+57. мГц.

Составитель В, Фролова

Редактор M. Петрова Техред И.Попович Корректор Л. Патай

Заказ 3382/40 Тираж 776 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, R-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул. Проектная, 4

1 13269

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для определения активности фагоцитоэа при диагностике обширной группы заболеваний ,) (аутоиммунных, инфекционных, наследственных и т.д.).

Цель изобретения — повышение точности определения.

Способ осуществляется следующим образом.

Цельную кровь в количестве 3 мл, помещенную в пластмассовую пробирку диаметром 12 мм, обрабатывают ультразвуком в импульсном режиме (датчик с резонансной частотой 2,64 + 5R мГц и диаметром 10 мм) в течение 5 мин, после чего производят постановку

НСТ-теста путем смешения равных количеств (1,0 мл) обработанной крови 2б

-и О, 1Ж"ного раствора НСТ в забуференном фосфатным буфером физиологическом растворе (рН 7,2) с последующей инкубацией смеси в термостате при 37 С 15 мин и 15 мин при комнат- 25 ной температуре (20-22 С). Далее иэ смеси кровь — НСТ делают мазки, которые фиксируют метиловым спиртом 3 мин и окрашивают смесью пиронин — метиловый зеленый по Папенгейму. Производят подсчет () формаэанположительных клеток (увел.х1000).

Пример 1. Вольная М-я С.В., 21 г., история болезни У 676/48 эа

1984 r. Диагноз: системная красная Ф о р м у л а и з о б р е т е н и я волчанка, активная фаза,, II степень активности, подострое течение, люпуснефрит, полиартралгия, миокардиодистрофия.

При определении активности фаго- 4О цитоза тестом с нитросиним тетраэолием беэ стимуляции УЗ получены результаты: 87 формазанположительных клеток (в группе доноров — 9,0 +

+ 1,2X). Таким образом, существенных отклонений от нормы со стороны данного показателя активности фагоцито