Способ отбора штаммов дрожжей-сахаромицетов @ -типа спаривания

Способ отбора штаммов дрожжей-сахаромицетов @ -типа спаривания

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

Изобретение относится к микробиологической промышленности и касается генетико-селекционных работ с дрожжами-сахаромицетами. Цель изобретения - ускорение и удешевление процесса отбора клонов oi -типа спаривания . Способ заключается в отборе oi-клонов, подавляющих ррст тестерного штамма oi -типа спаривания, сверхчувствительного к действию oi.-фактора, при посеве методом отпечатков анализируемых колоний на густой посев тестерного штамма. 2 табл. 00 00 со

СООЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУЬЛИН

А1 (19) (11) (51)4 С 12 N 15/00//(С 12 N 15/00, С 12 R 1:865) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К А ВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 3934386/31-13 (22) 17 .07. 85. (46) 30. 08. 87. Бюл. 11 32 (71) ЛГУ им. А.А.Жданова . (72) В.Н.Егорова (53) 663. 15 (088.8) (56) Захаров И.А., Симаров Б.В. Мутации в локусе типа спаривания и выведение высокогомозиготных линий Saccharomyces cerevisiae.,Ãåíåòèêà,1966, т. 2, 1(3, с. 118.

Читавинюс Д.Б., Инге-Вечтомов С.Г.

Множественные мутанты Saccharomyces

cerevisiae. Генетика, 1972, т. 8, N 1, с. 95.

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (54) СПОСОБ ОТБОРА UITAMMOB ДРОЖЖЕЙCAXAP0MHUET0B аС -ТИПА СПАРИВАНИЯ (57) Изобретение относится к микробиологической промышленности и касается генетико-селекционных работ с дрожжами-сахаромицетами. Цель изобретения — ускорение и удешевление процесса отбора клонов о(, -типа спаривания. Способ заключается в отборе о(.-клонов, подавляющих рост тестерного штамма М. -типа спаривания, сверхчувствительного к действию < -фактора, при посеве методом отпечатков анализируемых колоний на густой посев тестерного штамма. 2 табл.

13337

Изобретение относится к микробиологической промышленности и касается генетико-селекционных работ с дрожжами-сахаромицетами.

Цель изобретения — ускорение и удешевление процесса отбора штаммон дрожжей-сахаромицетов са -типа спаривания.

Способ заключается в том, что ис- 10 ходную культуру рассевают отдельными о колониями, которые переносят методом отпечатков на густой посев тестерного штамма о -типа спаривания, сверхчувствительного к действию «6 -фактора (Ssa+), визуально выявляют зоны подавления роста вокруг отпечатанных клонов и на исходном посеве отбирают клоны, подавляющие рост тестерного штамма, 20

Для увеличения выхода клонов М— типа спаривания исходную культуру обрабатывают дополнительно мутагеном.

В качестве тестерного штамма о -типа спаривания, сверхчувствительного 25 к действию < -фактора, (Ssa+) используют штамм ВКПМУ-614, а также другие

Таблица 1

Фенотип oL-клоКоличество отобКоличестно проанализиронанных колоний нов раиных оС-клонон

Leu

1О 2 роста вокруг отпечатанных клонов и с матричных чашек отбирают клоны, по давляющие рост штамма ВКПМ У-614. Все выделенные клоны представляют собой клоны о6 -типа спаривания. Гомозиготизация по локусу типа спаривания иногда сопровождается гомозиготизацией по генам thr4 и leu2, которые у

Saccharonyces cerevisiae также нахо" дятся в TTT хромосоме и сцеплены с локусом к -типа спаривания. Результаты приведены н табл.1.

Отбор клонов ос -типа спаривания у штамма Saccharomyces cerevisiae П5188 дан в табл.1.

6010

Количество отобранных

oL-клонов честно нализироых коло

П5199

3100

П5200

3-1 72

3-1 74

3-175

2630

2500

3420

3000 штаммы Вза Петергофской генетической коллекции дрожжей — 2Г-П3238, 27Б-П3238, 22J-П3238. 30

На отбор Ы. -клонов данным спосо-с бом требуется 5-6 дней. Способ позво- . ляет проводить отбор ос -клонов у культур различной плоидности и у прототрофов.

Изобретение иллюстрируется примерами.

Пример !. В качестве исходной культуры для отбора штаммов и†типа спаривания используют прототроф- 40 нйй диплоид Saccharomyces. cerevisiae

П5188 Петергофской генетической коллекции дрожжей, гетерозиготный по локусу Ф -типа спаривания. Суспензию облученных клеток (УФ лучи двух параллельных бактерицидных ламп ДБ-301, мощность дозы 2,5 Дж(м с), рас-севают на чашки с полноценной питательной средой РЕАРД (глюкоза 20 г, пентон 20 r, дрожжевой автолизат

10 мл, агар 30 r дистиллированная вода до 1 л) из расчета 200-300 колоний на чашку. Через 3 дня выросшие клоны пересевают методом отпечатков на чашки, засеянные густой суспензией 55 (10 -1О клеток на чашку) тестерного штамма BKIIM У-614, снерхчувствитель ного к действий ос -фактора (Ssa ) .

Через 2 дня выявляют зоны подавления

Пример 2. В качестве исходных культур для отбора штаммов о -ти" па спаривания используют два диплоида, гетерозиготные по локусу ot, -— типа спаривания, П5199 и II5200Ä а также три триплоида 3-172, 3-174 и 3-175 из той,же коллекции. Отбор а6 -клонов проводят по способу, описанному н примере 1.

Результаты сведены н табл.2.

Таблица 2

Составитель С. Лях

Техред M. Ходанич

Корректор А.Зимокосов

Редактор M. Недолуженко

Заказ 3926/24 Тираж 499 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул. Проектная, 4

3 13337 формулаизобретения

Способ отбора штаммов дрожжей-сахаромицетов о -типа спаривания, пред5 усматривающий рассев исходной- культуры отдельными клонами, пересев их на полноценную питательную среду мето- ° дом отпечатков на густой посев тестерного штамма м -типа спаривания с 10 последующим отбором клонов ы -типа спаривания, отличающийся тем, что, с целью ускорения и удешевления процесса отбора, в качестве тестерного штамма ос -типа спаривания используют штамм, сверхчувствительный к действию е -фактора, а отбор клонов ведут на исходном посеве путем выявления зон подавления роста тестерного штамма вокруг отпечатанных клонов.