Способ определения этамбутола в сыворотке крови

Способ определения этамбутола в сыворотке крови

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

Для упрощения способа в пробу забавляют изоверин, проводят трифторацилирование. Смесь упаривают и растворяют в гептане. Вьщеляют анализируемое вещество на колонке с силикагелем PREP Silica (25-40 мкм), при этом элюирование проводят смесью гептан - изопропанол в объемном соотношении 88:12. 00 со 4ib

СОО3 СОВЕТСНИХ

РЕСПУБЛИК (1Ю (11) (511 4 С 01 N 33/48

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЭОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ (21) 3925109/28-14 (22) 04.07.85 (46) 30.08.87. Бюл. У 32 (71) Московский научно-исследователь- ский институт туберкулеза и Центральный научно-исследовательский институт эпидемиологии (72) Т.Н.Бессарабова,: Л.Ф.Линберг, С.А.Попов и А.С.Миримский (53) 612.015 (088.8) (56) J.Chromatograph, 1976, v.128,.

У 1., р. 188-192. (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЭТАМБУТОЛА

В CbIBOPOTKE КРОВИ (57) Для упрощения способа в пробу забавляют изовернн, проводят трифторацилирование. Смесь упаривают и раст-. воряют в гептане. Вццеляют анализируемое вещество на колонке с силикагелем PREP Silica (25-40 мкм), при этом элюирование проводят смесью гептан — изопропанол в объемном соотношении 88:12.

4084

Таблица 1

Влияние изменения соотношения в смеси гептан — изопропанол на конечный выход этамбутола

Соотношение гептан — изапропанол в элюирующей смеси, об. 7

Показатель

Г "Г85: 15 90: 10

-оОтносительное содержание этамбутола в элюате, 7

81

77 1

133

Изобретение относится к медицине и может быть использовано в клини-. ческой фармакологии при изучении метаболизма и фармакокинетики этамбутола, а также при выборе оптимальных доз при лечении туберкулеза .

Цель изобретения — упрощение способа эа счет того, что в пробу добавляют внутренний стандарт, выделяют анализируемое вещество, упаривают, проводят трифторацилирование с последующим гаэохроматографическим анализом, а также используют в, качестве внутреннего стандарта изоверин, выделение анализируемого вещества на колонке с силикагелем RSILPREP SILICA (25-40 мкм), при этом элюирование проводят смесью гептан — изопропанол в объемном соотношении 88: 12.

Способ осуществляют следующим образом.

В стеклянную ампулу вносят 0,02 мл сыворотки, 0,1 мп этанола с внутренним стандартом (0,05Х-ный раствор изоверина). После перемешивания смесь высушивают досуха в токе. азота. Добавляют 50 мкл ангидрида трифторуксусной кислоты, ампулу запаивают и проводят реакцию при 70 С 20 мин.

После этого содержимое упаривают в токе азота и сухой остаток растворяют в О, 2 мп гептана. Затем весь растворитель с содержащимися в нем трифторацильными производными ЭМБ переносят на микроколонку с 18+0,5 мг силикагеля RSIL PREP SILICA (2540 мкм) и продавливают через сорбент с помощью медицинского шприца на 2 мл. Затем на колонку наносят

0,2 мл элюирующей смеси гептан — изопропанол в объемном соотношении

88:12, продавливают через сорбент в чистую ампулу и 2 мкл вводят в хроматограф. Анализ проводят на набивной колонке длиной 1,8 м, внутренним диаметром 2 мм, наполненной сорбентом Chromosorb WAW 100-120 меш с жидкой фазой OV — 101 37., гаэ-носитель — азот, 20 мл/мин.

Хроматографические условия аналио за: Т инжектора 250 С, Т колонки

1б5 С, Т электронно-захватного детеко тора 350 С.

В табл.1 представлены данные, подтверждающие выбор оптимального соотношения в элюирующей смеси гептанизопр опанол.

Соотношение гептан-изопропанол

88:12 является оптимальным. При меньших количествах изопропанола ЭИБ не полностью элюируется с колонки, при больших количествах изопропанола элюирующая смесь становится более полярной и смывает с колонки наряду с. искомым соединением различные примеси, мешающие последующему хроматографическому определению. При этом относительное содержание ЭИБ в образ25 це снижается °

Способ позволяет при сохранении точности определения ЗМБ (табл.2) существенно упростить процесс.

Формула из обр ет ения зр

Способ определения этамбутола в сыворотке крови, включающий добавление в пробу внутреннего стандарта, выделение анализируемого вещества, упаривание, трифторацилирование с

ЗБ последующим газохроматографическим анализом, отличающийся тем, что, с целью упрощения способа, в качестве внутреннего стандарта ис4р пользуют изоверин, а выделение анализируемого вещества осуществляют на колонке с силикагелем RSIL PREP

БП.ТСА с размером частиц 25-40 мкм, при этом элюцию проводят смесью

45 гептан — изопропанол в объемном соотношении 88:12.

1334084

Та блица 2

Сравнение концентраций ЭМБ, определенных из

20 мкл сыворотки крови. больных по предлагаемому способу и способу-прототипу

Концентрация ЭМБ

Время взятия крови, ч

2-й больной

1-й больной

291 . 28

3 9

3,7

15,7

6,9

7,3

16,1

15,0

15,2

14,0

13 8

3,4

3,2

4,8

4,3

Составитель А.Агуреев

Техред Л.Сердюкова

Редактор А.Огар

Корректор А.Тяско

Заказ 3958/42 Тиразк 776 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий l13035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-полиграфическое предприятие, r. Ужгород, ул. Проектная, 4 редлага- Прототип мый спооб

Предлага- Прототип емый способ