Способ размножения растений

Способ размножения растений

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

Изобретение относится к области сельского хозяйства. Цель изобретения - повышение выхода растений, упрощение способа. На 4-14-й день от начала прорастания зерновок различных сортов яровой мягкой пшени1 г в стадии разрьша колеоптиля проводят морфологический анализ с целью отбора многозародьппевых форм. Зерновки высаживают в поле. Вычленяют пьшьнйки и культивируют их in vitro до получения взросль1х растений i Выход растений подсчитывают как среднее число растений на один высаженный пыльник и выражают в процентах. В группах сортов с процентом встречаемости многозародышевых семян вьшхе 0,1% выход растений (0,58 и 1,90%) превышает среднее значение выхода растений (0,38%) в 1,5-5 раз. По описанной методике проводят размножение растений стручкового перца из многозародьшёвых семян, 2 табл. СЛ

СОЮЗ СОВЕТСНИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (19) (11) (S1) 4 А 01 Н 3 00

gf jР ф214 Ус

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К А BTOPCHOMY СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ (21) 3868303/30-15 (22) 01.04.85 (46) 07.09.87. Бюл. Ф 33 (71) Саратовский государственный университет им. Н.Г.Черньппевского (72) А.С.Селиванов, В.М.Суханов и Н.И.Давоян (53) 581.143.6(088.8) (56) Шевченко С.В. К вопросу о полу чении гаплоидных растений в культуре пыльников. — Nicotiana tabacum 2. (Solanaceae) Ботанический журнал, 2977, т. 62, с. 1176-1179. (54) СПОСОБ РАЗМНОЖЕНИЯ РАСТЕНИЙ (57) Изобретение относится к области сельского хозяйства. Цель изобретения — повьппение выхода растений, упрощение способа. На 4-14-й день от начала прорастания зерновок различных сортов яровой мягкой пшеницы. в стадии разрыва колеоптиля проводят морфоло" гический анализ с целью отбора многозародьппевых форм. Зерновки высаживают в поле. Вычленяют пыльники и культивируют их in vitro до получения взрослых растений. Выход растений подсчитывают как среднее число растений на один высаженный пыльник и выражают в процентах. В группах сортов с процентом встречаемости многозародышевых семян вьппе 0,1 выход растений (0,58 и 1,90%) превышает среднее значение выхода растений (0,38%) в 1,5-5 раз.

По описанной методике проводят размножение растений стручкового перца из многозародышевых семян. 2 табл.

1335205

Изобретение относится к сельскому хозяйству и может быть использовано в производстве, в частности в семеноводстве и в селекции растений, для получения и ускоренного размножения ценного исходного материала.

Цель изобретения — повышение выкода растений, упрощение способа.

Пример 1. Размножение растений с использованием в качестве доноров особей сортов пшеницы (Triticum

aestivum L.).

Зерновки 30-ти различных сортов яровой мягкой пшеницы (по 4-19 тыс. зерновок каждого сорта) трижды промывают водопроводной водой, замачивают в водопроводной воде в течение

9 ч, снова трижды промывают водопроводной водой и раскладывают на помещенные в кюветы стекла, обернутые фильтровальной бумагой. В кюветы доливают водопроводной воды до верхнего уровня стекла, а сверху закрывают крышками.. Зерновки проращивают в тем ноте при комнатной температуре. Морфобиологический анализ с целью отбора многозародышевых форм проводят на 4-.14-й день от начала прорастания.

3а этот период все проростки достигают стадии разрыва колиоптиля. В течение этого периода подсчитывают число непроросших семян,. выявляют и подсчитывают число многозародышевых форм для каждого сорта отдельно. После окончания морфобиологического анализа подсчитывают процент многозародышевых форм на число проросших зерновок отдельно для каждого сорта.

Результаты размножения растений с использованием, в качестве доноров пыльников, особей у сортов и селекционных форм пшеницы (Triticum aesti vum Ь.), у которых процент встречаемости многозародьппевых зерновок варьи рует от 0,000 до 0 3007. приведены в табл.

По 100 зерновок каждого сорта высаживают в поле. В стадии трубкования проводят отбор побегов с колосьями.

Срезают побеги, у которых влагалище предпоследнего листа (последний лист флаговый) находится на уровне центральной части колоса. Отобранные колосья вместе с листовой оберткой в асептических условиях операционной комнаты стерилизуют 5-7 мин водным раствором диацида (0,33 r этанол5

-45 50 меркулхлорйда; 0,60 г цетилпиридинийхлорида; О,1 мл Твин-20 на 1 л воды), после чего промывают тремя порциями стерильной, предварительно проавтоклавированной воды.

Колосья освобождают от листовых оберток. Для культивирования вычленяют пыльники иэ двух. нижних цветков

4-14-х -колосков средней части колоса.

В одну пробирку (диаметром 16 мм) с

10 мл питательной среды помещают по

15 пыльников. Среда для культивирования пыльников (среда № 1) содержит, мг/л: макро- и микросоли по Гамборгу (из среды В )1 тиамин 0,5; пиридоксин

0 5 мезоинозит 100; никотиновая 1,О; аскорбиновая 1,0; 2,4-дихлорфеноксиуксусная 0,25 кислоты; сахароза

110000; агар 7000. Перед автоклавированием рН среды доводят до 5,86,0. Пыльники инкубируют в темноте при 27+1 С и относительной влажности

70-80Х. Анализ культур пыльников осуществляют под стереоскопическим микроскопом, начиная с 25 сут от начала культивирования. Подсчитывают общее число структур всех типов, возникающих из пыльцы и отдельно эмбриоидов.

Эмибриоиды отделяют отпыльников и пересаживают в другие пробирки на среду для прорастания (среда ¹ 2), Среда ¹- 2 отличается от среды ¹ 1 тем, что в ней содержание Ре-хеллата составляет вдвое уменьшенную концентрацию; сахарозы 10000 мг/л 2,4-Д заменяется на 3-индолилуксусную кислоту в концентрации 0,2 мг/л.

На среде ¹- ? эмбриоиды выращивают в условиях периодического освещения (освещенность 2000 лк, фотопериод

16 ч в сутки) при 27+1 С и относительной влажности 70-80Х. В таких условиях некоторые эмбриоиды заканчивают дифференцировку и прорастают.

По мере развития растений и появления у них 3-5 листочков и корней, их пересаживают в почву и выращивают до конца вегетации. Выход растений подсчитывают как среднее число растений на один высаженный пыльник и выражают в процентах (табл.1).

Выход растений наблюдается для группы сортов, процент многозародышевых семян в которых находится в интервале 0,051-0,17.. Однако процент выхода растений-(0,23) остается ниже среднего значения выхода растений

1335205 (0,38) для всех исследованных сортов и селекционных форм (т.е. при отсутствии отбора доноров по признаку многозародьппевости семян). В группах сортов с процентом встречаемости многозародыневых семян выше 0,1 выход растений (0,58 и 1,90 ).превышает среднее значение выхода растений (0,38) (в 1,5-5 раз). Поэтому с це- 10 лью повьппения выхода растений в качестве донорных растений целесообразно использовать особи тех сортов, у которых процент встречаемости многозародышевых семян не ниже 0,1Х. 15

Пример 2. Размножение растений с использованием в качестве доноров особей стручкового перца (Capsicum annuum L.) из многоэародьпневых семян. 20

У перца (Capsicum annuum L.) по методике, описанной в примере 1, отбирают лишь многозародьппевую форму (АД-102 м), которая вегетативно размножается черенками, и у нее получают 25 семена после самоопыления. В качестве опытных растений — доноров используют растения многоэародышевой формы, а в качестве контрольных — растения из однозародьппевых семян того же ис- 30 ходного материала. В качестве изолированных частей используют пыльники, содержащие одноклеточную пыльцу. Цветочные бутоны стерилизуют диацидом, после чего из них вычленяют пыльники и по 5-6 шт. помещают в пробирки на питательную среду.

Питательная среда для культивирования пыльников перца (среда 3) содержит, мг/л: макро- и микросоли по 4д

Мурасиге и Скугу (концентрация всех солей относительно прописи авторов уменьшена вдвое); тиамин 0,5; пиридоксин 0,5; никотиновая кислота 5,0; мезоиноэит 100; сахароза 20000; агар 7000, Результаты размножения растений с использованием в качестве доноров особей перца (Capsicum annuum L.) из однозародьппевых и многоэародьппевых семян приведены в табл. 2;

Анализ культур пыльников осуществляют 3 мес. Подсчитывают среднее число растений, полученных на один куль- тивируемый пЫльник.

Из табл. 2 следует, что растения из пыльцы получены только при использовании пыльников многозародьппевой формы, независимо от варианта фитогормонов. Поэтому с целью повьппения и стабилиэации выхода растений в качестве донорных необходимо испольэовать только растения из многоэародышевых семян и их потомства.

Формула изобретения

Способ размножения растений, включающий отбор растений-доноров, извлечение пыльников и последующее культивирование их in vitro до получения взрослых растений, о т л и ч а ю— шийся тем, что, с целью повьппения выхода растений, упрощения способа, в качестве растений-доноров используют растения, выращенные иэ многозародьппевых семян или из семян сортов, у которых встречаемость многоэвродьппевых семян более 0,1 .

1335205

СО еГ1 л

СО

Се) л ь

Ю

Ю л о о о л о о о л о ь

О е л

С") СЧ л ь

1 !

М о

О 01

СЧ

« л о ь о л о л Г л о л

° е ь л о

° е

С") Се1

О ) л

С 4

СО

СЧ

° е

СЧ с 4

1 л о о о л о а л

° е о

О\

° à

СЧ

Ch л

СЧ л л

D л о л о

К)

СЧ о л о

Ю

Щ л

I о

D о о

Се1 л ь

1 л

° е о

5 о 1

01 йМ о g

О 04

Й. Гт

СЧ о л о

I о о л о о о

Се) л

Ю

Ю

Ю л ь

Ю о л

I

3Г

D . л о о о о л о о б ь

С 4

Се

СЧ л о

Г1 О

СЧ Г1 л

Се1

СЧ

4О

Се)

Щ ь

СЧ о о ж

I Ре

Э } 10

g g о и

СЧ

СО

СЬ

С 1

° л

Е

Ре

Ф

И

° л

С0

01

С0 о

° л

С0

И

В

С4

Сч ж

° ее о

С0

С0

Х и

10 о

& с0

Ре

С0 и

С0 о

Е»

Р о и

Ц (ф ж

О

R

К О

<О О

И

V cd

10 ° 4 о Р

Х м

О

Р Й

° л х э е е

I (. 3, z o

М 1 С 1 Ц л

1 ее И

Р 01 01 ! й33!

° л.5 тл

СО V

СЧ Ц

Ф Л

V ел и

Ж СЧ

° л 0!

Я ° Ô

5Ю о

И елЕ

P,0I О и 2

° л

Й ck

un е0

0) 4О

Ж Се)

Л

-K

5м

cd ел

СО 00

С 1

С6 хи

СЧ

04 «! о

& М

cd cd

Р. 4

cd u

Cd СОЛ

О 4О

° ее се

4О cd Ц

О Р,а

- сб Х

cd u

М С4

° ее

И O IO

И СЧ д и ецио

Ц cd c0 10О

1О Иж

Й о х !.о

cd СО

° л Р, с 1 cd

cd

И

Z u О И

Д е ювао е0 С0 и

4йСО

Ch К

СЧ <6 и

С0

04 Ф

Q! Fc!

И и х о

1:4 СЧ

Е» СГ) ж

Р М

01 cd

cd

° л 1

СО

СЧ

Ц II

А1335205

Т а б л и ц а Z

Объект

Число пыльниВариант фитогормонов, мг/л

ыход растеий, Х ков

Capsicum annuum L

Местный:

Особи из однозародьппе: вых семян

Кинетин 0,2

АНУ 0,1

Кинетин 0,2

144

0,00

0,00

0,1

257

0,000

capsicum annuum Ь

Местный:

Особь из многозародьппевого семени и ее самоопыленное потомКинетин 0,2

2,4-Д 0,1

Кинетин 0,2

ИУК 0,1

2,4"Д 1,0

ИУК 0 5 ство

0,98

102

102

0,98

179

1,12

154

1,30

0,1

214

0,47

Составитель С.Куваева

Техред В.Кадар Корректор В.Бутяга

Редактор Н.Рогулич

Тираж 627 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Заказ 3991/4

Производственно-полиграфическое предприятие г. Ужгород ул. Проектная, 4