Питательная среда для культивирования почвенных нематод рода сернаlовus

Питательная среда для культивирования почвенных нематод рода сернаlовus

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

Изобретение относится к культивированию почвенных и фитопаразитических нематод в лабораториях при изучении биологии, экологии, биоэнергетики и способов борьбы с ними. Цель изобретения - повьшение выхода почвенных нематод рода Cephalobus. Среда для их культивирования содержит агар, глюкозу, отвар очищенного .картофеля. Для увеличения численности нематод в нее введен диоксид кремнияг Компоненты взяты в определенных соотношениях. 2 табл. (Л

СОЮЗ СОВВТСНИХ

СОЩИАЛИСТИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИН (5g 4 А 01 К 67/00

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К А ВТОРСКОМ .Ф СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ (21) 4041503/30-13 (22) 24.03.86 (46) 15.09.87. Бюл. 934 (71) Институт биологии Карельского филиала АН СССР (72) 3.С.Макаревская и Г.И.Соловьева (53) 632 ° 651 (088.8) (56) Судакова И.М., Петровская Э.С.

Черняк Э.К. Размножение нематод— представителей фауны хлопчатника в лабораторных условиях. Исследование возможности размножения нематод различных таксономических групп на грибах и проростках растений. — В кн.:

Проблемы биологии и экологии гельминтов растений. — Тр.ГЕЛАН, М.: Наука, 1965, т.16; с.133-135.

Судакова И.М. Микулина P.Â, Лабораторное размножение нематодмикогельминтов„ характерных представителей фауны хлопчатника. — В кн.:

Проблемы биологии и экологии гельминтов растений. — Тр. ГЕЛАН, М.: Наука, 1965, т. 16, с. 126.

Кирьянова С., Кралль Э.Л. Паразитические нематоды растений и меры борьбы с ними. Л. — : Наука, 1969, т. 1, с. 113-114.

Патент США Ф 4334498, 1982, кл. А 01 К 67/00.

„.SU, 13 7017 А1 (54) ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ КУЛЬТИВИ

РОВАНИЯ ПОЧВЕННЫХ НЕМАТОД РОДА

CEPHAL0BUS (57) Изобретение относится к культивированию почвенных и фитопаразитических нематод в лабораториях при изучении биологии, экологии, биоэнергетики и способов борьбы с ними.

Цель изобретения — повышение выхода почвенных нематод рода Cephalobus.

Среда для их культивирования содержит агар, глюкозу, отвар очищенного .картофеля. Для увеличения численности нематод в нее введен диоксид кремния. Компоненты взяты в определенных соотношениях. 2 табл.

1337017

Изобретение относится к фитонематологии, в частности к культивированию почвенных и фитопараэитических нематод в лабораторных условиях при изучении биологии, экологии, биоэнергетики и разработке новых способов борьбы с паразитическими нематодами, Цель изобретения — повышение выхода нематод рода Cephalobus °

Изобретение заключается в том, что питательная среда для культивирования почвенных нематод, включающая агар, глюкозу, отвар картофеля, е дополнительно содержит порошок диоксида кремния при следующем соотношении компонентов, г/л:

Агар. 15 — 20

Глюкоз а 15-? 0

Диоксид кремния 0,00004 вЂ,05

Отвар очищенного картофеля Остальное до

1 л.

Сравнительный анализ признаков предлагаемого и известных составов представлен в табл.1.

Из табл. 1 видно, что использование среды, содержащей агар, глюкозу, отвар картофеля и дополнительно порошок диоксида кремния в количестве

0,00004-0,05 позволяет сократить время культивирования и увеличить численность нематод, т.е. интенсифицировать процесс их культивирования.

Пример. Питательную серду готовят следующим образом. 200 г очищенного картофеля нарезают мелкими кусочками и кипятят в 1 л дистилированной воды в течение 30 мин, После фильтрации через тонкий слой гигроскопической ваты отвар доводят до 1 л дистиллированной водой и расплавляют в нем 15-20 r агара, растворяют 15-20 г глюкозы. Затем среду разливают в пробирки с предварительно развешенным диоксидом кремния из расчета 0,00003-0,055 г/л и автоклавируют при 0,5 атм 20 мин. При этом целесообразно использовать химически чистый диоксид кремния .в виде порошка с фракционным составом, равным не менее 0 55 мм. В кашеобразную среду и после остывания проводят посев нематод рода Cephalobus по титру—

100 нематод на 1 пробирку, Культивиа рование осуществляют при 20-25 С в течение 30 дней. Выделение нематод

40 выращивания гриба. Такий образом, 45

55 с, 10

35 проводят по модифицированному методу

Бермана.

Исследуют несколько питательных сред (табл.2). При этом в качестве контроля проводят культивирование нематод рода. Cephalobus на картофельном arape, не содержащем добавки диоксида кремния. Кроме того,,для сравнения проводят культивирование нематод рода Cephalobus на картофельном

arape и культуре гриба Alternaria

tenuis (по известному). Результаты культивирования отражены в табл.2, где представлены средние данные из

36 повторностей опыта. Результаты исследований обработаны на машине

"Минск-32". Проведен дисперсный анализ и оценка достоверности методом контрастов.

Из анализа данных, представленных

3 в табл.2, следует, что введение в питательную среду диоксида кремния менее 0,00004 г/л (состав 1) практически не увеличивает прирост численности нематод по сравнению с контролем. Введение диоксида кремния бо" лее 0,05 г/л (состав 6) нецелесообразно, так как при этом уменьшается запас питательных веществ в среде, что ограничивает прирост численности нематод.

Введение в состав питательной среды диоксида кремния в количестве

0,00004-0 05 г/л увеличивает выход нематод на 16-707 по сравнению с контролем и на 80-300 по сравнению с известным, а также сокращает затраты времени за счет исключения процесса предлагаемая питательная среда интенсифицирует процесс культивирования нематод.

Вводимая добавка (диоксид кремния) является дешевой и недифицитной, а предлагаемая питательная среда проста в изготовлении, что делает ее более доступной для массового культивирования нематод в лабораторных условиях .при разработке способов борьбы с паразитическими нематодами.

Формула изобретения

Питательная среда для культивирования почвенных нематод рода Cephalobus включающая агар-агар, глюкозу и отвар картофеля, о т л и ч а ю щ а1337017

Агар

Глюкоза

Диоксид кремния

Отвар картофеля

15-20

15-20

0,0004-0,0500

Остальное до 1 л

Таблица

Предлагаемая питательная

Известная среда

Признаки

Культивирование нв картофельном агаре в культуре гриба Alternari

tenuIs ультивирование на корнях проростков среда

Для культивирования нематод рода Cephalobus

Для культивирования flo÷ít Htlhtx нематод в том числе pott Cephalobus

Для культивирования почвенных нематод в том числе

Назначение

Агар-агарСахароза — 20

Отвар 500 г ,картофеля до 1 л

Ницелий гриба

Alternaria tenuis

Агар-агар 15-20

Состав среды, г/л

Внт. В, 0,0001

В, 0,0001

FP 0,0005

Гликонол- 0,003

Подготовка среды 1 день.

На остывиую среду высевают мнцелий грибов. После полного зарастання газона (7 дней) высакнвают иематоды.

Итого 8 дней.

Подготовка среды

1 день. Посев нематод сразу после остывания среды

Итого день.

Время> необходимое для подготовки среды к культивированию

Численность нематод чистая среда без добавки

S iO 191350 среда с добавкой

SiO» 250164-326450

Численность нематод на грибе Alternaria

tenuis 693

Численность нематод рода Cephalobus на на проростках хлопчатника 10000

Дост.нгае ый полокительный эффект

Т а б л и ц а

Состав !

I Г компоненты г!л

1 2 3 4 5 6 ., Известный

Контроль

Агар-агар

Глюкоза

15

20

20 20

20

15

20

20

Диоксид кремния

0,00003 0,00004 0,0005

О, 001

0 05

0,055 с фракционным составом 0,35-0,55мм

Культура гриба

Flternaria

tenuis

107222

Выход нематод, шт

191350

191826 250164 326450 297609 222377

192037

Процент х контролю, Х

100

IOO ° Э 130 ° 7 170,6 !55,5

116 ° 2 100,4 56, 1

Составитель О»Борисова

РедактоР M Недолуженко Техред M.Xîäàíè÷ КорректоР С Черни

Заказ 4063/3 Тираж 627 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва Ж-35, Раушская наб., д.4/5

Проиэно;!Стиеино-полиграфическое предприятие, г.Ужгород, ул.Проектная, я с я .тем, что, с целью повьппения выхода нематод, она дополнительно содержит порошок диоксида кремния при следующем соотношении компонентов, г/л:

Агар-агар 0,1 г/л (IX)

Иинсральная основа среды

Уайта; в

Са (НО,) 0,2 Nn SO» О, 004 5

N8SO» О, 36 ZnSO» 0 00!5

KNO» О ° 08 Н»ВО» 0,0015

KCl 0,065

Na SO» 0,2

NaH РО» 0,016

Fe. (Я(1,) 0,0025

KI 75, 10

Проросткн хлопчатника Сахароза - 20

Подготовка среды 1 день.

Стерилизация н выращивание проростков

5-6 дней. Высаяивание корней проростков и нематод 1 день. Итого. 7-8 дней