Способ дифференциальной диагностики хронического гепатита у детей

Способ дифференциальной диагностики хронического гепатита у детей

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

Изобретение относится к медицине , точнее к педиатрии. Цель изобретения - повьшение точности способа. Для этого проводят поверхностную скарификацию кожи передней поверхности предплечья в верхней трети с целью определения содержания РНК в ядрах макрофагов. Скарификатором снимают слой эпидермиса до видимости петель капилляров. Скарифицированные участки покрывают стерильными стеклами. По содержанию РНК в препаратах клеток оценивают тяжесть поражения печени. S

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК

702 А1 (19) (И) OllHCAHHE ИЗОБРЕТЕНИЯ

К А ВТОРСНОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (2i) 3866193/28-14 (22) 13.03.85 (46) 23.01.88. Бюл. У 3 (71) Научно-исследовательский институт педиатрии, 2-й Московский государственный медицинский институт им. Н.И.Пирогова и. Научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им. почет, акад.

Н.Ф.Гамалеи (72) Ф.С.Харламова, Т.В,Чередниченко, М.Я.Кори и В.Ф.Учайкин (53) 616.089.9(088.8) (56) Блюгер А.Ф. Вирусный гепатит и

его исходы. Рига- М,, 1970, с. 272279. (gg) 4 G 01 N 1/28, А 61 В 10/00 (54) СПОСОБ ДЕФФЕРЕНЦИАЛЬНОЙ ДИАГНОСТИКИ ХРОНИЧЕСКОГО ГЕПАТИТА У ДЕТЕЙ (57) Изобретение относится к медицине, точнее к педиатрии. Цель изобретения — повышение точности способа.

Для этого проводят поверхностную скарификацию кожи передней поверхности предплечья в верхней трети с целью определения содержания PHK в ядрах макрофагов. Скарификатором снимают слой эпидермиса до видимости петель капилляров. Скарифицированные участки покрывают стерильными стеклами. По содержанию PHK в препаратах клеток оценивают тяжесть поражения печени.

1 1368702

Изобретение относится к области медицины, а именно к педиатрии.

Целью изобретения является повышение точности способа.

Пример 1. Ребенок П.,8 лет

В два года перенесла вирусный гепатит В. После выписки из стационара длительно сохранялись жалобы диспептического, астено-вегетативного характера, гиперферментемия. С 5 лет диагносцирован хронический гепатит.

При поступлении состояние средней тяжести, отмечались бледность, вя-лость, снижение аппетита, на коже проявления геморрагического синдро" ма в виде экхимозов,телеангиоэктазии и пальмарная эритема, гепатомегалия (1,5-2 см ниже реберного края), печень плотной консистенции. По другим органам патология не выявлена.

В биохимическом анализе крови отмечалось незначительное увеличение тимоловой пробы — до 11,4 ед (при норме 4 ед.), на фоне нормальных показателей билирубина и ферментов.

В общих анализах крови и мочи без патологии. В крови обнаруживался. HBS Ag. В иммунологическом статусе выявлено снижение показателей Т-лимфоцитов; Т-акт. до 13 (норма 20,87)

Т-общ. до 347. (норма 69,8 ), повышение уровня иммуноглобулинов IpG до 3000 мг% (при норме 1230 мг7), в пробе "кожного окна" снижение хемотаксиса макрофагов до 327 (при норме 757).

С целью определения содержания

РНК в ядрах.макрофагов проводят поверхностную скарификацию кожи передней поверхности предплечья в верхней трети, предварительно обработанной .этиловым спиртом. Скарификатором снимают слой эпидермиса в двух участках (размером 0,5õ0,5 см) до видимости петель капилляров (повреждение капилляров и кровотечение не допускаются).

Скарифицированные участки покрывают двумя стерильными стеклами, которые закрепляют лейкопластырем. Через 24 ч от начала реакции стекла снимают.

Один из отпечатков после фиксации этанолом обрабатывают PHK-азой, затем оба отпечатка фиксируют в смеси абсолютного этилового спирта и ледяной уксусной кислоты в соотношении

3 1 в .течение 11-12 мин, Затем с целью удаления следов уксусной кислоты и предотвращения кислотного гидролиза нуклеиновых кислот препараты переносят в этанол на 5-6 мин. Фиксированные препараты доводят до

5 воды через серию спиртов понижающейся концентрации 96, 75, 50, 257), после чего помещают в

0,2 M ацетатный буфер рН 4,2 на 23 мин. В дальнейшем препараты окраши10 вают в рабочем растворе акридина оранжевого 1:10000 в 0,2 M растворе ацетатного буфера рН 4,2. Время окрашивания 2 мин с последующей отмывкой в ацетатном буфере рН 4,.2 и диффе15 .ренцировкой в растворе акридина оранжевого с абсолютным спиртом 1:100000 в течение 20 с. После обработки препаратов PHK-азо" PHK из ядер удаляется. Предварительно фиксированный

20 препарат (отпечаток эксудата с макрофагальными клетками с второго скарифицированного участка кожи) инкубируют в растворе PHK-азы в течение а

1,5 ч при 37 С, после этого проводят окрашивание акридином оранжевым. Окрашенные препараты микроскопируют в люминесцентном микроскопе и флюорометрируют. Содержание PHK в данном примере 0,20 ед, Диагностируют хрониЗ0 ческий пассивный гепатит.

Пример 2, Ребенок Т. 4 лет

11 мес., перенесла тяжелую форму вирусного гепатита, после которого сохранялись патологические симптомы.

35 При поступлении состояние ребенка средней тяжести, выражены: астения, снижение аппетита, печень .плотная и выступает из-под реберного края на

4-5-с/3, селезенка пальпируется у

40 реберного края, выслушивается систолический шум. В крови обнаружен НВ$А8, В биохимичсском анализе крови увеличение АлАт до 29 ед. (норма до 5 ед.) и фруктозо-1-фосфат альдолазы до

45 8 ед. (норма до 3 ед.). Снижение протромбинового индекса до 64, В иммунологическом статусе снижение Т-обш. лимфоцитов до 437. (норма 69,8%), хемотаксиса макрофагов до 357. (норма

50 757). Содержание PHK макрофагов асептической воспалительной реакции

0,15 ед. Диагноз: хронический агрессивный гепатит высокой степени активности, 55

Клиническая оценка текущего патологического процесса известным способом малосимптоматична в ряде случаев (как при персистирующем хрони68702

Со став итель М. По з ня к

Редактор Л. Гратилло Техред Л. Сердюкова Корректор C,Øåêìàð

Заказ 281/42 Тираж 847 Подписно е

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Иосква, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-полиграфическое предприятие, r. Ужгород, ул. Проектная, 4

3 13 ческом гепатите, так и при активном хроническом гепатите), а также субьективна с точки зрения врача в оценке симптомов. Биохимические методы оценки текущего патологического процесса не дают в сравнении с предлагаемым способом, достаточной продолжительности прогноза, так как регистрируют лишь слабо выраженный синдром цитолиза в период высокой активности патологического процесса

/ непосредственно в печени, кроме того, показатели биохимических тестов могут быть нормальными даже при активно текущем процессе в печени у больных с хроническим гепатитом.

Предлагаемый способ позволяет по содержанию РНК в препаратах клеток оценить тяжесть поражения печени.

Формула и з о б р е т е н и я

Способ дифференциальной диагностики хронического гепатита у. детей путем исследввания клеток, о т л и— ч а ю шийся тем, что, с целью повышения точности способа, контактным методом получают препарат клеток макрофагов кожи, окрашивают акриди- . новым оранжевым на РНК, по содержаЭ нию которой определяют активность процесса ипри содержанииРНК 0,19

0,03 ед. диагносцируют хронический пассивный гепатит, а при содержании

РНК О, 15 0, 01 ед диагносцируют хронический активный гепатит.