Способ определения закиси азота,выделяемой почвенными микроорганизмами

Способ определения закиси азота,выделяемой почвенными микроорганизмами

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

Изобретение относится к сельскому хозяйству, в частности к способам определения закиси азота, выделяемой почвенными микроорганизмами. Целью изобретения является повышение точности определения. Способ заключается в следующем: отбирают пробу почвенного образца, инкубируют на питательной среде в анаэробных условиях в присутствии ацетилена, отбирают газовую фазу, из нее удаляют углекислый газ путем пропускания через фильтрующий материал из гранулированного аскарита и в газовой фазе определяют закись азота газохроматографически. Способ позволяет повысить точность анализа и определить закись азота, вьщеляемую дрожжевыми культурами . 2 табл.

ф

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (19) (11) 14 А1

ВСЮ П з" > Я

13,, 13

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К А BTOPCKOMY СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР .ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (21) 4120953/31 — 13 (22) 17.06.86 (46) 30.01.88. Бюл. М 4 (71) МГУ им. М.В.Ломоносова (72) А.Л.Степанов, О.Г.Россихина и "1.M.Óìàðîâ (53) 576.8 (088.8) (56) Авторское свидетельство СССР

N 1117529, кл. G 01 N 33/24, 1982. (54 ) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЗАКИСИ АЗОТА, ВЬДЕЛЯЕМОИ ПОЧВЕННЫМИ МИКРООРГАНИЗМАМИ (57) Изобретение относится к сельскому хозяйству, в частности к способам определения закиси азота, выделя(5!) 4 С 2 N /00 С 12 1/00 емой почвенными микроорганизмами. Целью изобретения является повышение точности определения. Способ заключается в следующем: отбирают пробу почвенного образца, инкубируют на питательной среде в анаэробных условиях в присутствии ацетилена, отбирают газовую фазу, иэ нее удаляют углекислый гаэ путем пропускания через фильтрующий материал иэ гранулированного аскарита и в газовой фазе определяют закись азота гаэохроматографически. Способ позволяет повысить точность анализа и определить закись азота, выделяемую дрожжевыми культурами. 2 табл.

1370134

Изобретение относится к сельскому хозяйству, в частности к оценке биологической активности почвенных микроорганизмов, а именно к способам определения закисц азота.

Цель изобретения — повышение точности определения.

Способ осуществляют следующим образом.

Пример. Чистые культуры почвенных микроорганизмов выращивают в пенициллиновых флаконах объемом 15 мл, содержащих 5 мл соответствующей среды (Гильтая, сусло). После посева флаконы закрывают резиновыми пробками, вытесняют воздух над поверхностью среды аргоном и вводят ацетилен (10 об.7). Флаконы инкубируют при

28 С в течение 3 сут. Отбор газовой пробы (1 мл) проводят стандартным медицинским шприцом (прототип) и анализируют на газовом хроматографе.

Для сравнения в тех же культурах отбор газовой пробы на содержание

N О был проведен предлагаемым способом. Для этого чистые культуры почвенных микроорганизмов выращивают в пенициллиновых флаконах объемом 15мл, содержащих 5 мл соответствующей среды (Гильтая, сусло). После посева флаконы закрывают резиновыми пробками, вытесняют воздух над поверхностью среды аргоном и вводят ацетилен (10 об среды аргоном и вводят ацетил (10 об. X) .

Флаконы инкубируют при 28 С в течение 1 сут. Газовую пробу (1 мл) отбирают шприцом с прокладкой из аскарита толщиной 1 мм, весом 0,4 r (фракция

0,3-0,5 мм) и проводят газохроматографическое определение содержания в ней N О.

Результаты анализов газовых проб, отобранных двумя способами, представлены в табл. 1 и 2.

Как следует из табл. 1 и 2 в пробах, отобранных стандартным способом (1), закись азота не обнаружена, тогда как предлагаемый способ отбора газовой пробы (11) позволяет выявить значительное выделение эакиси азота бактериальными и дрожжевыми культурами.

Почвенные дрожжи рр. Cryptococcus и Lipomyces закись азота не вьщеляют, максимальное образование N О выявле l но у дрожжей рр.Hansenula и Pichia, обладающих активными ферментами каталаэой и пероксндазой : (табл. 1). Из

Куль тура

N О, мг/мп, среды х 10

I II

Hansenula polymorpha

2733

0 24,0

0 26,2 . О 4,8

2734

40 То же

Hansenula sp. 847

Pichia gui)lermondii

45 693

0 2,4

0 43,2

Pichia bovis 2435

Candida gui11ermondii

50 87

О 2,4

0 14,4

Candida tennu is 113

Cryptococcus lauren55 84

Lipomyces 1ipofer Л 6 О табл. 2 следует, что активность денитрификации у почвенных бактерий

Bacillus sp. снижается во время инкубации, поэтому определять ее целесообразно не позднее 2-3 сут выращивания культуры на питательной среде.

Таким образом, предлагаемый способ определения количества выделяемой микроорганизмами эакиси азота позволяет значительно повысить точность определения N>0, а также изучать этот процесс в динамике.

Формула и з обретения

Способ определения закиси азота, выделяемой почвенными микроорганизмами, предусматривающий инкубирование образца на питательной среде в анаэробньгх условиях в присутствии

20 ацетилена с последующим отбором газовой фазы и гаэохроматографическим анализом эакиси азота в ней,о т л и ч аю шийся тем, что, с целью повышения точности определения, инкуби25 рованию подвергают чистую культуру почвенных микроорганизмов, непосредственно в процессе отбора газовой фазы удаляют углекислый газ путем пропускания через фильтрующий мате30 риал из гранулированного аскарита.

Таблица 1

1370134

Продолжение табп. 2

Та блица 2

Время инку» бацын, сут

8 0 мг/мн, средм

«30

N>O мг/мл, среды 10

Время инкубации, сут (17,0

13,7

8,4

4,2

12,1

6,6

10,9

3,8

9,0

Составитель Т. Полянская

Редактор М.Недолуженко Техред M.Äèäûê Корректор И.Эрдейи

Заказ 372/23

Тиразк 520 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д.4/5

Производственно-полиграфическое предприятие, r,Óèãîðoä, ул.Проектная,4