Способ определения и отбора морозоустойчивых сортов и селекционного материала озимых зерновых культур
Иллюстрации
Показать всеРеферат
Изобретение относится к сельскому хозяйству, а именно к способам вьивления и отбора морозоустойчивых сортов и селекционного материала. Цель изобретения - повьппение достоверности при упрощении. Проростки озимой пшеницы подвергают закаливанию, вьщеляют из них митохондрии, к суспензии которых добавляют 150-250 мкМ аденозиндифосфата (АДФ), и измеряют продолжительность периода его потребления митохондриями. В качестве морозостойких отбирают те сорта или тот селекционный материал, на потребление АДФ митохондриями которых требуется меньший промежуток времени. 3 табл. g (Л
СОЮЗ СОВЕТСКИХ
СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ
РЕСПУБЛИК (19) (11) (51) 4 А 01 G 7/00
ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР по делАм изОБРетений и ОткРытий
Фр.;-, „
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ ц
К АВТОРСКОМУ СВИ4ЕТЕЛЬСТВУ (21) 3793767/30-15 (22) 26.06.84 (46) 23.03.88. Бюл, у (71) Всесоюзный селекционно-генетический институт (72) В.И.Бабенко и Ф.Д.Нарийчук (53) 632.111.5 (088.8) (56) Карманенко Н.М. Энергетическая эффективность дыхания у зимующих растений озимой пшеницы. — Ботанический журнал, 1978, т.63, Р 7, с. 974977. (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ И ОТБОРА МОРОЗОУСТОЙЧИВЫХ СОРТОВ И СЕЛЕКЦИОННОГО ИАТЕРИАЛА ОЗИИЫХ ЗЕРНОВЫХ КУЛЬТУР (57) Изобретение относится к сельскому хозяйству, а именно к способам выявления и отбора морозоустойчивых сортов и селекционного материала.
Цель изобретения — повышение достоверности при упрощении. Проростки озимой пшеницы подвергают закаливанию, выделяют из них митохондрии, к суспензии которых добавляют 150-250 мкИ аденозиндифосфата (АДФ), и измеряют продолжительность периода его потребления митохондриями. В качестве морозостойких отбирают те сорта или тот селекционный материал, на потребление АДФ митохондриями которых требуется меньший промежуток времени.
3 табл.
1382439
Изобретение относится к сельскому хозяйству, а именно к способам выявления и отбора морозоустойчивых сортов и селекционного материала. 5
Цель изобретения — повышение достоверности при упрощении.
Пример 1. Исследованию подвергают разные генотипы озимой пшеницы:высокоморозоустойчивый сорт Одес- 10, ская 16 и слабоморозоустойчивый сорт
Без остая 1.
Семена тщательно калибруют и высевают в сосуды с почвой. Предварительное проращивание в течение 10 сут 15 осуществляют при + 20 — 22 С и нео прерывном освещении. Для дальнейшего прохождения первой фазы закаливания растения подвергают воздействию о температуры + 1 — 2 С при непрерывном 20 освещении в течение 10 сут. Вторую фазу закаливания продолжительностью в 5 сут растения проходят в темноте о при-3-4С.
Для выделения митохондрий используют нижнюю этиолированную-часть растений.
Функциональную активность митохондрий определяют полярографически 30 (определяют скорость поглощения митохондриями кислорода в полярографической ячейке объемом 1,6 мл с помощью совмещенного закрытого электрода Кларка). В качестве полупроницаемой мембраны используют полиэтиленовую плено ку толщииой 10 мкм. Температуру 26 С поддерживают с помощью водяного ультратермостата. Экзогенный субстрат ( фосфорилирования — аденозиндифосфат (АДФ) — вносят в отдельные пробы суспензии митохондрий в количестве
80, 150, 250, 300 мкИ. В препарате
АДФ предварительно определяют количество действующего вещества. Для оценки сортов известным способом определяют соотношение внесенного в полярографическую ячейку экзогенного АДФ и количество поглощенного кислорода, т ° е. определяют коэффициент
АДФ/0, характеризующий меру окислительного фосфорилирования. Интохондриальный белок определяют по Лоури.
Интенсивность поглощения кислорода выражается в наноатомах кислорода в минуту на 1 мг белка„ Для оценки сортов новым способом измеряют продолжительность периода потребления
АДФ (h) в секундах.
Влияние концентрации экзогенного
АДФ на скорость окислительной и фосфорилирующей функций митохондрий при закаливании сортов озимой пшеницы, различающихся по морозоустойчивости, показано в табл. 1.
Представленные в табл. 1 данные свидетельствуют о том, что в присутствии 150-250 мкМ экзогенного АДФ скорость его потребления митохондриями достоверно коррелирует с морозоустойчивостью изучаемых сортов озимой пшеницы: во всех вариантах опыта продолжительность потребления АДФ митохондриями сорта Одесская 16 значительно меньше, чем у митохондрий сорта
Безостая 1.
Пример 2. Проводят опыты, аналогичные примеру 1.
Сопоставительные данные нового и известного способов оценки морозоустойчивости сортов озимой пшеницы представлены в табл. 2.
Из приведенных данных табл.2 видно, что изменение величины АДФ/О непропорционально изменению времени фосфорилирования. Например, у сорта
Сан-Пасторе величина АДФ/О 1,27 в одном случае соответствует времени фосфорилирования 181 с, в другом случае такая же величина АДФ/О соответствует 281 с. Аналогичная картина наблндается и у сорта Одесская 16.
Пример 3. Проводят сравнительное изучение новым способом сортов озимой пшеницы с известной морозоустойчивостью.
Результаты оценки морозоустойчивости сортов озимой пшеницы новым способом представлены в табл1 3.
Из приведенных данных табл. 3 видно, что наиболее мороэоустойчивый .сорт Одесская 16 утилизирует субстрат фосфорилирования в течение
142 с, в то время как слабоморозоустойчивый сорт Русалка — в течение
215 с ° Временная характеристика является надежным критерием отбора генотипов на морозоустойчивость.
Кроме того, способ требует минимальных трудозатрат. Проводить исследования может лаборант средней квалификации. При проведении анализов важно внести в суспензию митохондрий необходимые экзогенные субстраты, а в дальнейшем полученные данные автоматически фиксируются на самописце.
Данные сразу же можно читать и да1382439
Таблица 1
Сорт
Первая фаза закаливания
Вторая фаза закаливания
АДФ/О h c АДФ/0
h c
80 мкМ экэогенного АДФ
0,88
Безостая 1
0,92
130
150
Одесская 16 1,02
150
1,30
165
150 мкМ экэогенного АДФ
160
Безостая 1 1,30
Одесская 16 1,44
120
1 35
120
1,51
250 мкМ экэогенного АДФ
Безостая 1 1,78
Одесская 16 1,88
135
1,61
200
140
1,80
300 мкМ экзогенного АДФ
1,46
Беэостая 1
250
Одесская 16 1,91
1,68
120
150
Таблица 2
Показатель
Сорт
200 250
Одесская 16 АДФ/О
1,53
1,82
1,67 (высокоморозоустойчивый) h,с
134
142
156 вать оценку исследуемому материалу, в то время как получение полных данных по величине АДФ/О требует от исследователя высокой специальной подготовки и проведения целого ряда дополнительных сложных исследований.
Формула изобретения
Способ определения и отбора мороэоустойчивых сортов и селекционного материала озимых зерновых культур, включающий выращивание растений в условиях закаливания, выделение из них митохондрий, добавление аденозиндифосфата к их суспенэии, измерение их фосфорилирукщей активности и
5 отбор особей с наибольшей фосфорилирующей активностью митохондрий, о тл и ч а ю шийся тем, что, с целью повышения достоверности при упрощении, аденозиндифосфат добавляют в количестве 150-250 мкМ, а фосфорнлирующую активность измеряют по промежутку времени, за который он метаболизируется суспенэией митохондрий.
Экзогенный АДФ, мкМ
Г Т
1382439
Продолжение табл.2 азател
250
150
Сан-Пасторе АДФ/О
1,27
1,39
1,27 (слабомороз оустойчивый) h, с
281
216
181
Т,аблица 3
Морозоустойчивость
Продолжительность фосфорилирования, с
Сорт
142,0
153,0
Одесская 16
Мироновская 808
Максимальная
Снижение морозоустойчивости
То же
Одесская 51
Безостая 1
Грана
Русалка
Минимальная
1,5
НС Ро„
Составитель Л.Серова
Техред М.Дидик Корректор О. Кундрик
Редактор Н.Лазаренко
Тираж 661 Подпис ное
ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий
113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5
Заказ 1240/2
Производственно-полиграфическое предприятие, r.ужгород, ул.Проектная, 4
182,3
199,0
207, 6
210,3
Экзогенный АЦФ,. мкМ .Г" T