Способ определения подвижности неферментирующих грамотрицательных микроорганизмов
Иллюстрации
Показать всеРеферат
СОЮЗ СОВЕТСНИХ
СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ
РЕСПУБЛИК
ÄÄSUÄÄ 1382850 А1 (51)4 С 12 1 04
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ;,, К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ
ГОСУДАРСТ8ЕННЫЙ НОМИТЕТ СССР
ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (21) 4103384/28-13 (22) 07.08.86 (46) 23.03 ° 88. Бил.¹ 1! (71) Московский научно-исследовательский институт гигиены им. Ф.Ф.Эрис- мана (72) Г.М.Трухина, Н.Б.Комзолова и Г.П.Калина (53) 576 ° 8.093(088.8) (56) Лабинская А.С. Микробиология с техникой микробиологических исследований. — М.: Медицина, 1978, с.350, 60. (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ПОДВИЖНОСТИ
НЕФЕРМЕНТИРУМЩИХ ГРАМОТРИЦАТЕЛЬНЫХ
МИКРООРГАНИЗМОВ (57) Изобретение относится к медицинской микробиологии и может быть применено при диагностике заболеваний, обусловленных бактериями группы неферметируищих грамотрицательных
I микроорганизмов (НФГОМ) в патологическом материале, при гигиенических и эпидемиологических исследованиях окружавшей среды. Цель изобретения— .повышение точности способа. Способ характеризуется использованием в бактериологических чашках двухслойной среды, в которой нижний слой состоит из 1,?-1,8 мас.X агара в дистиллированной воде, а верхний слой — из
1,2-1,8 мас.l агара на мясном настое с добавлением 0,8-1,? мас.Х пептона, 0,75-1,?5 мас.Х хлорида натрия, 0,00018-0 00022 мас._#_ кристаллического фиолетового. При посеве уколом
12-18 испытуемых штаммов в одной чашке и инкубации при комнатной температуре 1-2 сут„неподвижные виды растут в виде небольшой колонии в месте укола диаметром 1 — 3 мм, а подвижные — в виде широких бляшек диаметром 12 — 20 мм. 2 табл.
138? 850
Изобретение относится к медицинкой микробиологии и может быть исользовано при диагностике заболеаний, вызванных неАерментирувщими грамотрицательными микроорганизмами.
Целью изобретения является повыШение точности способа.
Пример 1. Б простерилизован"
Нун бактериологическую чашку с двой- 10 ой крынкой (бумажной и стеклянной) ливавт 20-25 мл среды (нижний слой), содержащей, мас.l: агар 1,5; вода истиллированная остальное, простеризованной при 1 атм 20 мин. После 15
;застывания среды под бумажной крыш кой заливают верхний слой среды.
Верхний слой готовят следующим образом. Пептон (1,0 мас.X),, агар ,(0,35 мас.Х), МаС (1,0 мас.Х) вно- 20
,сят в мясной настой, доводят объем ,среды до 1 л, стерилизувт при 1 атм
20 мин. Отдельно готовят 0,017.-ный раствор кристаллического фиолетового ! в дистиллированной воде и вводят в 25 верхний слой из расчета 0,0002 на
1 л среды.
Полученную питательную среду в количестве 20-25 мл наслаивают на застывший нижний слой. После засты- 30 вания среды производят посев исследуемых культур или колоний с плотных сред уколом до дна чалки. На одной чалке можно одновременно производить посев до 12?18 лтаммов. После посева чашку закрывают поверх бумажной крышки стеклянной. Инкубирувт посевы при 20-22 С 12-18 ч (предварительный учет) и дополнительно 20-2? ч (окончательный учет). Зятем определяют зо- 40 ну посева.
Положительный результат: зона роста вокруг посева уколом в виде венчика диаметром от 12 мм и более.
Отрицательный результат: неболь- 45 шого размера колония или точечный рост в месте укола (диаметр 3 мм и менее).
Подвижность микроорганизмов показана в табл.1.
Пример ?. Осуществляют способ в соответствии с примером 1, но компоненты среды берут в следующих соотношениях, мас.X: нижний слой— агар 1,2, дистиллированная вода— до 1 л; верхний слой — агар 0,3; пептон 0,8; 11аС 0,75; кристаллический фиолетовый 0,00018, мясной настой до 1 л.
Пример 3. Осуществляют способ в соответствии с примером 1, но компоненты среды берут в следующих соотношениях, мас.Х: нижний слой — агар 1,8; дистиллированная вода— до 1 л, верхний слой — агар 0,4; пептон.1,?; МаС1 1,35; кристаллический Аиолетовый 0,00022; мясной настой до 1 л.
Сравнительные данные по определению подвижности у неферментирунщих грамотрицательных бактерий приведены в табл.2.
Использование предлагаемого способа позволяет повысить точность определения подвижности неферментирунщих грамотрицательных бактерий, Формула и з о брет ения
Способ определения подвижности неферментирунщих грамотрицательных микроорганизмов путем посева исследуемой культуры уколом в питательнув среду, содержащую мясной настой, пептон, 1aC(, агар, с последующим инкубированием посевов и определением подвижности по характеру роста микроорганизмов, о. т л и ч а н— шийся тем, что, с. целью повышения точности способа, используют питательную среду, состоящую из двух слоев, при этом дополнительный нижний слой содержит, мас.И:
Агар 1,2-1,8
Дистиллированная вода Остальное а верхний слой дополнительно содержит кристаллический Аиолетовый при следующем количественном соотношении компонентов, мас.Х:
Агар 0,3-0,4
Пептон 0,8 — 1,2
МаС 0,75-1,?5
Кристаллический
Аиолетовый 0,()0018 â€,0002?
Мясной настой Остальное инкубирование посевов проводят при .
20-22 С, а подвижность бактерий определяют по наличию широких бляшек диаметром от 12 до 20 мм в месте укола.
1382850
Таблица 1
НепоПодвижность
Вид бактерий движность
К.coli
Ps. aeruginosa
Klebsiella
pneumonia
Acihetohacter
caleoaceticus
Таблица 2
Вид бактерий предлаизвестного гаемого
1 сут 2 сут 1 сут 2 сут
Pseudomonas
aeruginosa
0
Acinetohacter. ярр. 320
Составитель А.Завадская
Редактор Н.Гунько Техред JI.Îëèéíûê Корректор И.Эрдейи
Тираж 520 Подписное
ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий
113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д.4/5
Заказ 1263/22
Производственно-полиграфическое предприятие, r.Óæãoðoä, ул.Проектная,4
С СгоЬас1ег ярр.
Entегоhacter ярр.
К1еЬяiе1а ozenae
Str. ?aecalis
Количество нтаммов
Правильный ответ, Е для способа
96 100
100 100