Способ моделирования эластолиза бронхолегочной системы

Способ моделирования эластолиза бронхолегочной системы

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

Изобретение относится к экспериментальной медицине. Лабораторному животному в просвет трахеи вводят инородное тело. Через 24-48 ч происходит 12-14-кратный рост эластолитической активности в легких. Изобретение сокращает сроки моделирования до 2-3 ч, а при развитии регистрируемого процесса до 1-2 сут, позволяет регистрировать именно эластазоподобную активность.

СОЮЗ СОВЕТСНИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИН (51 ) 4 G 09 В 23/28 »

» г»

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Н A BTOPCHOMV СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ (21 ) 3986610/28-14 (22) 25,10.85 (46) 07.05.88. Бюл. Р 17 (71) Ялтинский научно-исследовательский институт физических методов лечения и медицинской климатологии им. И.М.Сеченова (72) А.Б.Кубышкин (53) 615.476 (088.8) (56) Sloan В.et.а1. Amer. Rev.

Respirat. - Disease, 1981, М 3, р. 295-301.

ЛК 1394226 А1 (54 ) СПОСОБ МО)1ЕЛИРОВАНИЯ ЭЛАСТОЛИЗА

БРОНХОЛЕГОЧНОЙ СИСТЕМЫ (57) Изобретение относится к экспериментальной медицине. Лабораторному животному в просвет трахеи вводят инородное тело. Через 24-48 ч происходит 12-14-кратный рост эластолитической активности в легких. Изобретение сокращает сроки моделирования до

2-3 ч, а при развитии регистрируемого процесса до 1-2 сут, позволяет регистрировать именно эластазоподобную активность.

1394226

Изобретение относится к экспериментальной медицине, в частности к моделированию патологических процессов, и может быть использовано для моделирования эластолиза бронхолегочной системы у лабораторных животных.

Цель изобретения — приближение модели к естественной патологии за счет активации эластолитических ферментов in к чо.

Способ осуществляют следующим об5

10 разом.

Лабораторное животное наркотизируют и после фиксации через прокол иг- 15 лой в просвет трахеи в стерильных условиях вводят инородное тело (капроновая нить ) так, чтобы оно частично обтурировало просвет одного из главных бронхов или находилось на уровне 20 бифуркации трахеи. Фиксацию проксимального конца нити осуществляют к мышечной ткани в- районе, места прокола трахеи. Через 24-48 ч происходит

12-14-кратный рост эластолитической активности в легких. В сроки до 24 ч проведение исследований нецелесообразно, так как это время необходимо для развития эластолиза и изучения влияния на его развитие применяемых 30 факторов.

Пример. Белой беспородной крысе массой 200 r под эфирным наркозом в стерильных условиях обнажают участок трахеи и делают прокол инъек- 35 ционной иглой. Через отверстие в просвет трахеи вводят капроновую нить диаметром 0,2-0,3 мм и длиной

2,5-3,0 см. Через 24-48 ч животное забивают путем кровопускания, выделя-4р ют легочно-сердечный комплекс и производят бронхоальвеолярный лаваж путем 8-10-кратного промывания легких физиологических раствором в объеме

l0 мл. После центрифугирования смыва 45 при 5000 об/мин в нем производят измерение эластолитической активности по расщеплению синтетического субстрата и-нитрофенилового эфира N-бутилоксикарбонил-L-аланина (БАНФЭ).

Для его осуществления в термостатированной кювете спектрофотометра (25 С) смешивают 0,1-1,0 мл бронхоальвеолярного секрета с 0,05 М натрийфосфатным буфером (рН 6,5) до конечного объема пробы 2,9 мл. Пробу вьдерживают в течение 5 мин., после чего к ней добавляют 0,1 мл 0,01 М раствора БАНФЭ (6,2 мг БАНФЭ растворяют в 2,0 мл ацетонитрила). Прирост оптической плотности измеряют на спектрофотометре СФ-16 при 347,5 нм против контрольной пробы, содержащей только реактивы, делая отсчеты через

1-2 мин в течение 8-10 мин. Из линейного хода кривой накопления продукта реакции во времени находят прирост оптической плотности ЬА в

847 5 пробе за 1 мин.

Эластазоподобную активность (ЭПА) вычисляют по формуле А зев 546

ЭПА

К !

Фор.мула

1 и з о б р е т е н и я.

Способ моделирования эластолиза бронхолегочной системы путем активации эластолитических бронхолегочных ферментов лабораторного животного, отличающийся тем, что, с целью приближения модели к естественной патологии за счет активации эластолитических ферментов in viva в трахею вводят инородное тело и выдерживают 24-48 ч. где К вЂ” Объем, мл,. или количество белка, мг, бронхоальвеолярного смыва, взятого для анализа;

546 — коэффициент пересчета

ЬА „г,, нмоль гидролизованного БАНФЭ.

Результаты выражают в нмоль/мл или нмоль/мг белка смыва за 1 мин.

У пОДОпытнОГО жиВОтнОГО 6 А 4 составляет 0,0214 ед. ОП/мин, объем смыва равняется 0,5 мл, следовательно, ЭПА 23,37 нмоль/мл.мин, что в

14 раз превышает норму, которая по данным контрольной группы составляет

1,62+0,27 нмоль/мл мин/см, акт лабораторных испытаний.

При проведении моделирования затраты времени сокращаются с 3-5 дн. при осуществлении известного способа до 2-3 ч при осуществлении предлагаемого способа, а при развитии регистрируемого процесса с 1-2 мес. по известному до 1-2 сут по предлагаемому способу, Предлагаемый способ позволяет также приблизить модель- к моделируемому процессу, поскольку активация суммы эластолитических ферментов, участвующих в развитии эластолиза бронхолегочной системы, осуществляется in vivo и в конечном результате регистрируется, эластазоподобная активность.