Способ определения воды в биологических объектах

Способ определения воды в биологических объектах

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

СОЮЗ СОВЕТСНИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК

151) с(G -01 N 24/I О

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К А ВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ (21) 4019670/31-25 (22) 1О. 02.86 (46) 23.05.88.Вюл. 11 19 (71) Институт проблем криобиологии и криомедицины АН УССР (72) В.А.Моисеев, С.Х.Межидов и О.А.Нардид (53) 538.113 (088.8) (56) Керова И.К. Применение мочевины в офтальмологической практике.

Вестник офтальмологии, 1965, Ф 6, с.65-68.

Авторское свидетельство СССР

И 830212, кл. G 01 N 24/10, 1981. (54) СПОСОГ> ОПРЕДЕ. 1ЕНИЯ ВОЛЫ В БИОЛОГИЧЕСКИХ ОВЬЕKTAX

„,SU„„! 397813 (57) Изобретение относится к биологии и может быть использовано для изучения влияния физико-химических факторов на биологические объекты.

Цель изобретения — определение изменения количества внутриклеточной воды. В контрольный и опытный образцы суспензии клеток вводят иминоксильный радикал в конечной концентрации

-3 -4

2 ° 10 — 10 моль/л и парамагнитную соль К )Fe(CN) g в конечной концентрации 0,09-0,1! моль/л, после чего регистрируют спектры ЭПР контрольного и опытного образцов и по соотношению интенсивностей спектров ради калов определяют изменение количества внутриклеточной воды.! 397813

Составитель А.Федоров

Редактор В.Данко Техред Л.Олийнык Корректор М,демчик

Заказ 2599/42 Тираж 847 Подписное

ВПИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно †полиграфическ предприятие, г, Ужгород, ул, Проектная, 4

Изобретение относится к биологии и может быть использовано для изучения влияния физико-химических факторов на биологические объекты.

Цель иэобр тения — определение чзменения количества внутриклеточной воды.

Способ осуществляют следующим образом. 10

В контрольный и опытный образцы

"суспенэии клеток вводят иминоксильный радикал 2,2,6,6-тетраметил-4-оксопиперидин-1-оксил в ко-э нечной концентрации 2 10

10 + моль/л и парамагнитную соль

К (Fe(CN) 1 в конечной концентрации

0,09-0,11 моль/л и снимают спектры

ЭПР. Затем сравнивают иптенсивность спектров в контрольном и опытном 20 образцах. Интенсивно.ть спектра ЭПР радикала пропорциона.|ьна кс-.ичеству радикала внутри клеток и, соответственно, количеству воды в них. Поэтому изменение количества воды опреде25 ляют по формуле

h-hr

O - — — — — — -100, .h где h,,h„ — интенсивность спектров

ЭПР радикала для контрольного и опытногo образцов, соответственно.

Пример. Суспенэию зритроцитов35 отмыли от лейкоцитов физраствором путем центрифугирования в течение

20 мин при 3000 об/мин. После этого к части суспензии добавили 1:1 раствор, содержащий 4 10 моль/л имино- 40 ф ксильного радикала 2, 2, 6, 6-тетраметил-4-оксопиперидин-1- оксила и

0,1 моль/л парамагнитной соли.

Образец в капилляре поместили в о резонатор спектрометра ЭПР и при 4 С сняли спектр контрольного образца.

Затем к другой части суспенэии в таком же соотношении добавили раствор, содержащий кроме иминоксильного радикала (4 ° 10 моль/л) и парамагнитной соли (0,1 моль/л) ЗОХ ПЭО-1500, и аналогичным образом сняли спектр

ЭПР радикала. Интенсивность спектра контрольного образца h 86 отн.ед., опытного h, 57 отн.ед. Таким образом, количество воды в клетке уменьшилось на ЗОХ.

Испытания показали, что предложенный способ позволяет определить изменение количества воды внутри клетки с достаточно высокой точностью (+15K) Формула изобретения

Способ определения воды в биологических объектах, заключающийся во введении в контрольный и опытный образ цы парамагнитной соли K> (F е (CN) ) и снятии спектров ЭПР радикалов, путем определения соотношения количества воды в контрольном и опытном образцах, отличающийся тем, что, с целью определения изменения количества внутриклеточной воды, в контрольный и опытный образцы, представляющие собой суспензии клеток, вводят дополнительно иминоксильный радикал 2,2,6,6-тетраметил-4-оксо-, пиперидин-1-оксил в конечной концентрации 2.10 — 10 моль/л, а парамагнитную соль К э )Fe(CN)< вводят в конечной концентрации 0,09

0,11 моль/л и по соотношению интенсивностей спектров ЭПР контрольного и опытного образцов определяют изменение количества воды.