Способ определения устойчивости растений к вирусу желтой мозаики фасоли

Способ определения устойчивости растений к вирусу желтой мозаики фасоли

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

Изобретение относится к сельскому хозяйству и позволяет ускорить и упростить способ. Вьщеляют изолированные хлоропласты с получением суспензии хлоропластов с концентрацией хлорофилла 60-120 мкг/мл. Суспензию инкубируют, перемешивая с очищенным вирусным препаратом с концентрацией вируса 50-200 мкг/мл в течение 1-2 ч в темноте при 2-4 С. Измеряют вьщеление хлоропластами кислорода на свету в присутствии феррицианида калия. Устойчивые сорта по сравнению с контролем быстрее ввделяют кислород, чем восприимчивые к вирусу. (О

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (19) (1!) А1 (5D 4 А 01 Н 1 04 ф(Р )1ГоЦР Р

i li3

БИБАВ " хЕА

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОбРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ (21) 4147891/30-15 (22) 17. 11.86 (46) 07, 07. 88. Бюл. Ф 25 (71) Университет дружбы народов им. Патриса Лумумбы (72) И.А. Чумиков, Ю.И. Помазков и М.А. Келдьпп (53) 631.52(088.8) (56) Палилова А.И. и др. Ультраструктурный способ определения вирусоустойчивости селекционного материала картофеля. Тезисы докладов VIII Всесоюзного совещания. — Вильнюс, 1984, с, 69-71. (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ УСТОФП4ВОСТИ

РАСТЕНИЙ К ВИРУСУ ЖЕЛТОЙ МОЗАИКИ ФАСОЛИ (57) Изобретение относится к сельскому хозяйству и позволяет ускорить и упростить способ. Вьщеляют изолированные хлоропласты с получением суспензии хлоропластов с концентрацией хлорофилла 60-120 мкг/мл. Суспензию инкубируют, перемешивая с очищенным вирусным препаратом с концентрацией вируса 50-200 мкг/мл в течение 1-2 ч о в темноте при 2-4 С. Измеряют выделение хлоропластами кислорода на свету в присутствии феррицианида калия.

Устойчивые сорта по сравнению с контролем быстрее выделяют кислород, чем Ж восприимчивые к вирусу.

1407457

Изобретение относится к сельскому озяйству и может быть использовано селекции сельскохозяйственных расений на иммунитет.

Цель изобретения — ускорение и

1 прощение способа.

Пример. Растения гороха в возрасте 4-6 недель двух различных го устойчивости к вирусу желтой моаики фасоли сортов Рамонский (восиимчивый) и Перфекшн (иммунный) ьдерживают в темноте не менее 24 ч. стья с растений измельчают в ступе или гомогенизаторе в среде сле ющего состава, г/л: сорбит 66, ерев 11,92, ЭДТА 0,756, MgC1 О;476, аС1 0,293, бычий сывороточный альин 1: рН 7,8, Соотношение листьев среды 1:10. Все операции выполняют

О

20 и 4 С . Гомог е на т фильтруют через а слоя капрона или нейлона и центу фугируют при 3000 об/мин. Осадок оропластов ресуспендируют в среде в деления мягкой кисточкой в 1/5 о первоначального объема среды и е е раэ осаждают при тех же условиях, Р суспендируют в том же объеме среды в деления без альбумина. Определяют с держание хлорофилла в суспензии оропластов по Ариону и доводят его с едой до 60 мкг/мл. Затем суспензию оропластов одного сорта гороха дел т пополам и в одну часть приливают с спензию вируса, в другую — равный о ъем раствора, в котором вирус рес спендирован (на 1 мл раствора берут с рбита 66,0 мг, Hepes-NaOH 11,92 мг, г, ицерина 1,0 мл, рН 8,5) .

Конечная концентрация вируса в сусцензии хлоропластов 100 мкг/мл.

Пф ученные смеси инкубируют B темнот в течение 2 ч при 4 С, перемешив;(я на магнитной мешалке, установленн< и на минимальной скорости. Затем хЛоропласты осаждают при 3000 об/мин и промывают один раз средой выделения без альбумина повторным центрифугированием. Определяют хлорофилл в каждой суспензии. Для определения скорости выделения кислорода содержание хлорофилла 60 мкг/мл. Скорость выделения кислорода определяют на полярографе ОН- 105 с использованием электрода Кларка В суспензию хлоропластов вводят 6 мг феррицианида калия K>Fe(CN)< и фиксируют скорость выделения кислорода на свету (20 тыс.лк). Результаты выражают в микромолях кислорода на 1 мг хлорофилла в 1 ч. Расчет ведут, учитывая скорость выделения кислорода за вторую минуту от начала выделения.

Устойчивые сорта по сравнению с контролем быстрее вьделяют кислород, чем хлоропласты восприимчивых, Предложенный .способ значительно ускоряет и упрощает оценку вирусоустойчивости при создании непоражаемых сортов и гибридов. формула и э обретения

Способ определения устойчивости растений к вирусу желтой мозаики фасоли, включающий вьделение изолированных хлоропластов и измерение показателей, корреляционно связанных с вирусоустойчивостью, о т л и ч а юшийся тем, что, с целью ускорения и упрощения способа, в качестве показателя используют выделение хлоропластами кислорода на свету в присутствии феррицианида калия, при этом вьделение изолированных хлоропластов. осуществляется с получением суспензии хлоропластов с концентрацией хлорофилла 60-120 мкг/мл, которую перед измерением инкубируют, перемешивая с очищенным вирусным препаратом с концентрацией вируса 50200 мкг/мл в течение 1-2 ч в темноте при 2-4 С.

Составитель Л.Марченкова

Техред A.Êðàâ÷yê Корректор M.Áàñèëüåâà

Редактор А.Мотыль

Заказ 3232/3 Тираж 661 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб,, д, 4/5 производственно-полиграфическое предприятие, r. Ужгород, ул, Проектная, 4