Способ определения резистентности эритроцитов

Способ определения резистентности эритроцитов

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

Изобретение относится к медицине, точнее к гематологии и экспериментальной медицине, предназначено для выявления распределения эритроцитов по резистентности. Цель изобретения - упрощение и ускорение способа при более точном выявлении распределения эритроцитов по резистентности. Способ осуществляют на установке, состоящей из кюветы 1 измерения, расположенной между фотоприемником 2 и монохроматором 3. Устройство имеет спектрофотометр 4 на пути проходящего света от :источника 5 света. Кювета измерения имеет термостат в и магнитную мешалку 7. Блок 8 подачи гемолизирующего агента соединен с кюветой измерения капиллярной линией 9. Графопостроитель 10 подключен к выходу блока 8 подачи и через дифференциатор 11 к ВЫХОДУ фотоприемника 2. К суспензии эритроцитов добавляют гемолизирующий агент непрерьшно с постоянной скоростью в соответствии с концентрацией и видом гемолитика, смесь перемешивают и фотометрируют, преобразуют световое излучение в электрический ток, который дифференцируют и регистрируют . Определение резистентности ведут в координатах объем гемолити ка - дифференцированный электрический ток. 2 ил. (Л

СОЮЗ СОВЕТСНИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИН

„„«И„„1411669 А 1 (5D 4 G 01 N 33/48

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Н А ВТОРСКОМ,Ф СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ (21) 4070604/28-14 (22) 07.04.86 (46) 23.07.88, Бюл.У 27 (71) Научно-исследовательский институт гематологии и переливания крови им. акад. Г.М.Мухадзе (72) И.Ш,Зедгинидзе, ОВ.Хулузаури и И.Л.Яковлев (53) 612.015(088.8) (56) Малый практикум по биофизике.

М.: Высшая школа, 1964 ° с,306-315 ° (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ РЕЗИСТЕНТНОС

ТИ ЭРИТРОЦИТОВ (57) Изобретение относится к медицине, точнее к гематологии и экспериментальной медицине, предназначено для выявления распределения эритроцитов по резистентности. Цель изобретенияупрощение и ускорение способа при более точном выявлении распределения эритроцитов по резистентности, Способ осуществляют на установке, состоящей из кюветы 1 измерения, расположенной между фотоприемником 2 и монохроматором 3. Устройство имеет спектрофотометр 4 на пути проходящего света от ,источника 5 света. Кювета измерения имеет термостат 6 и магнитную мешалку 7. Блок 8 подачи гемолизирующего агента соединен с кюветой измерения капиллярной линией 9. Графопостроитель 10 подключен к выходу блока 8 подачи и через дифференциатор 11 к выходу фотоприемника 2 ° К суспензии эритроцитов добавляют гемолизирующий агент непрерывно с постоянной скоростью в соответствии с концентрацией и видом гемолитика, смесь переме- ф шивают и фотометрируют, преобразуют световое излучение в электрический ток, который дифференцируют и регистрируют. Определение резистентности ведут в координатах объем гемолити» ка — дифференцированный электрический ток. 2 ил.

М®е4

1411669

Для дифференцирования сигнала, полученного от ФЭУ, используют лабораторный прибор йастольного типа для дифференцирования сигналов со следующими основными параметрами прибора: входной сигнал 0-2В, выходной сигнал

0-100 нВ, максимальное время дифференцирования 360 с.

Пример. Берут кровь в количе-. стве 0 1 мл из пальца больного с дефицитом В, на антикоагуляторе (гепарин 25 Ед/мл). Из цельной крови выделяют эритроциты путем центрифугирования (3000 об/мин, 5 мин на центрифуге ОПН-3) и промывают три раза физраствором. Разбавляют суспензию эритроцитов до оптической плотности D = 0,7 при длине волны

= 670 нм. Помещают суспензию в кюве- ту 1 измерения (длина оптического пути 20 мм) в количестве 4 мл и включают термостат 6 и магнитную мешалку 7; выводят стрелку измерительного пишущего графопостроителя 10 на нулевую отметку и при постоянной температуре t = 25 С, непрерывно перемешивая, в кювету 1 измерения блоком 8 подачи добавляют 0,01 М НС, приготовленный на физиологическом растворе с постоянной скоростью 0,625 мл/мин.

В результате воздействия гемолизирую» щего агента эритроциты разрушаются, рассеяние света на эритроцитах умень" шается, вследствие чего увеличивается коэффициент пропускания суспензии на

670 нм, что отражается в увеличении сигнала, снятого с фотоприемника 2. Этот сигнал дифференцируется дифференциатором 11 и подается на Y координате графопостроителя 10 ° Дифференциал (прирост) сигнала пропорционален числу разрушенных эритроцитов в единицу времени, т.е ° скорости разdU йИ рушения эритроцитов (p- â€, где

N — число разрушенных эритроцитов;

U - -сигнал, поступающий в дифференциатор от фотоумножителя).. Одновременно на Х координате графопостроителя 10 регистрируется объем гемолизирующего агента, поступающего в суспен. зию эритроцитов. Таким образом, на графопос.троителе происходит запись дифференциальной кривой гемолиза в

dN dN координатах (— V) где — - число

at at

40 разрушенных эритроцитов, за единицу времени, измеренное в произвольных

Изобретение относится к области медицины, преимущественно к гематологии и экспериментальной медицине, и может использоваться для выявления распределения эритроцитов по резистентности.

Цель изобретения — упрощение и ускорение способа при более точном выявлении распределения эритроцитов -10 по резистентности.

На фиг.1 показана блок-схема установки для осуществления способа; на фиг.2 — кривая распределения эри". троцитов. 15

Схема состоит из кюветы 1 измерения, которая расположена между фотоприемником 2 и монохроматором 3 спектрофотометра 4 на пути проходящего света от источника 5 света. Кювета 20

1 измерения снабжена термостатом 6 и магнитной мешалкой 7. Блок 8 подачи гемолизирующего агента соединен с кюветой 1 измерения капиллярной линией 9. Графопостроитель 10 подключен 25 к выходу блока 8 подачи и через дифференциатор 11 — к выходу фотоприемника 2.

Блок 8 подачи гемолизирующего агента выполнен на .основе промьппленного дозатора ДАЖ-115-1 °

Для получения желаемой скорости подачи гемолизирующих агентов в конструкцию дозатора внесены следующие изменения: 35 используют синхронный двигатель

РД-09 с редуктором, который имеет ,1,75 об/мин; на корпусе дозатора закреплен

1 кронштейн с,держателем шприца от дозатора ДЖ-10; на ведущем валу подъемника поршня (на который подается усиление от двигателя) закреплены дополнительные валики для ременной передачи с диаметром 35 и 20 мм; с подъемником поршня шприца состыкован реохорд типа ППМЛ-И5 (связан с самописцем).

В результате модификаций блок подачи гемолизирующих агентов позволяет дозировать гемолизирующее вещество с малыми скоростями подачи (0,05, 0,10, 0,22, 0,45, 0,90, 1,35, 1,80 мл/мин), легко и быстро заменять гемолизирующий агент путем замены шприца с гемолитиком, регистрировать израсходованный объем гемолитика на самописце.

1411669 единицах; Ч - объем гемолизирующего агента, мл. Завершению процесса гемолиза соответствует возвращение стрелки графопостроителя на нулевую линию.

Как видно из кривой., на фиг.2 разрушение эритроцитов происходит по группам, На графике отчетливо выделяются 3 группы эритроцитов, различных по резистентности. Группа I составлена из самых нестойких эритроцитов, которые с постоянной скоростью разрушаются в области 0,7-1,8 мл;

II — эритроциты, разрушаемые в облас, ти 1,8-3,1 мл; III - эритроциты, разрушаемые в области 3 ° 2-3,6 мл.

Та же суспензия эритроцитов была > исследована известным способом. По графику, имеющему вид одиночного пика, нельзя выделить группы эритроцитов, различные по резистентности, что доказывает большую разрешающую способность предлагаемого способа.

Предлагаемый способ позволяет сократить время определения до 35 мин против 60-70 мин в известном способе.

Фо рмула изобретения

Способ определения резистентноСти эритроцитов путем добавления к суспен10 зйи эритроцитов гемолизирующего агента, перемешивания смеси, фотометрнрования, преобразования светового излучения в электрический ток.и его регистрации, отличающийся

15 тем ° что, с целью упрощения и ускорейия способа при более точном выявлении распределения эритроцитов по резистентности, гемолизирующнй агент добавляют непрерывно с постоянной

2Q скоростью в соответствии с концентра» цией и видом гемолитика, электричесKHH ток дифференцируют, а резистентность определяют в координатах объем гемолитика — дифференцированный

25 электрический ток.