Способ диагностики язвенной формы хронической пиодермии
Иллюстрации
Показать всеРеферат
Изобретение относится к медицине , касается диагностики кожных заболеваний . Цель изобретения - ранняя диагностика и повышение точности. Для этого пробу крови из локтевой вены помещают в 2,7%-ный р-р этилендиаминтетрауксусной кислоты, предотв ращая свертывание. Исследуют мононуклеары крови, выделенные центрифугированием в градиенте плотности фиколла - верографина. Затем две пробирки (одна - контроль, другая - с мононуклеарной суспензией) инкубируют 30 мин при 37 С, дважды отмывают центрифугированием при 200 д. С осадком лимфоцитов ставят реакцию спонтанного розеткообразования с эритроцитами барана. Подсчитывают число розеткообразующих клеток (Е-РОК), т.е. ядросодержащих клеток, окруженных тремя или более эритроцитами, на 100 клеток в каждой пробе. Розетки, образующиеся в присутствии теофиллина назьшают теофиллинустойчивыми или резистентными. При их уровне 350 клеток/мм и более определяют язвенную форму хронической пиодермии. 4 табл. i (Л с
СОЮЗ СОВЕТСКИХ
СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ
РЕСПУБЛИН (19) (111 .
А1 5ц 4 G Ol N 33/53
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Н АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ
ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССР
ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ (21) 4074071/28-14 (22) 05.05.86 (46) 23.07.88. Бюл. У 27 (71) Центральный научно-исследовательский кожно-венерологический институт (72) В.Н. Мордовцев, Н.M. Мазина, Ж.И. Авдеева, М.К. Балтабаев и Т.С. Куршакова (53) 616. 07(088. 8) (56) Гржебин З.Н., Цераидис Г. С.
Основы гистопатологии кожи М.: Медгиз, 1960, с. 95-96. (54) СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ЯЗВЕННОЙ ФОРMbI ХРОНИЧЕСКОЙ ПИОДЕРМИИ (57) Изобретение относится к медицине, касается диагностики кожных заболеваний. Цель изобретения — ранняя диагностика и повышение точности. Для этого пробу крови из локтевой вены помешают в 2,77-ный р-р этилендиаминтетрауксусной кислоты, предотв ращая свертывание. Исследуют мононуклеары кров и, выделенные цент рифу гиров а нием в градиенте плотности фиколла — верографина ° Затем две пробирки (одна — контроль, другая — с мононуклеарной суспензией) инкубируют 30 мин при
37 С, дважды отмывают центрифугированием при 200 д. С осадком лимфоцитов ставят реакцию спонтанного розеткообразования с эритроцитами барана. Подсчитывают число розеткообразующих клеток (Е-РОК), т.е. ядросодержащих клеток, окруженных тремя или более эритроцитами, на 100 клеток в каждой пробе. Розетки, образуюшиеся в присутствии теофиллина называют теофиллинустойчивыми или резистентными.
При их уровне 350 клеток/мм и более
3 определяют язвенную форму хронической пиодермии. 4 табл.
1411071
Изобретение относится к области медицины, в частности к диагностике
:кожных заболеваний.
Цель изобретения — ранняя диаг5 костика и повышение т;, ности.
Способ осуществляют следующим об разом.
Для исследования берут 5-7 мл кро .ви из локтевой вены в 0,7-1,0 мл 1О ,2,7 -ного раствора динатриевой соли этилендиаминтетрауксусной кислоты для, предотвращения свертывания. Объектом исслЕдования служат мононуклеары крови, выделенные методом центрифугирова-!5 ния в градиенте плотности фиколла-верографина (удельная плотность
1,077 г/мл). Для выделения мононуклеаров кровь разводят в 1,5 раза средой
199 и наслаивают на 2-3 мл фиколла- 20 верографина.
Кровь, наслоенную на смесь фиколла-верографина, центрифугируют при . 400 g в течение 30 мин. С интерфазной поверхности между слоями плазмы и фи-?5 колла-верографина собирают образовавшее кольцо из клеток в центрифужную пробирку и дважды отмывают раствором
Хенкса центрифугированием в течение
10 мин при 200 g. Осадок ресуспендируют в 1 мл среды 199..Число мононуклеаров доводят до конечной концентрации 2"10 клеток,в мл.
Для исследования в две круглодонные пробирки приливают по 0,1 мл при-35 готовленной суспензии .мононуклеаров.
Затем к первой пробирке добавляют
О,! мл раствора теофиллина (30 мг препарата следует растворить в 10 мл среды 199 при нагревании), ко второй — 0,1 мл среды (контрольная проба). Пробы инкубируют в течение
30 мин при 37 С, дважды отмывают сре дой 199 центрифугированием при 200 g в течение 5 мин. С осадком лимфоцитов g5 ставят реакцию спонтанного розеткообразования с эритроцитами барана: к осадку приливают по 0,1 мл среды и
0 мл 0,5 .-ной суспензии эритроЦитов барана, смесь ресуспендируют, выдерживают при 37 С в течение 10 мин, центрифугируют при
200 g 5 мин и инкубируют при 4 С в . течение 1 ч. Затем осадок осторожно ресуспендируют, взвесь помещают на
55 предметное стекло, прикрывают покровным стеклом .и подсчитывают число розеткообразующих клеток (Е-POK) т.е. ядросодержащих клеток; окруженных тремя или более эритроцитами, на 100 клеток в каждой пробе. Абсолютное количество E-POK вычисляют умножением относительного числа E-POK (в Ж) на число лимфоцитов 1 MM крови. Розет3 ки, образовавшиеся в присутствии теофиллина, называют теофилин устойчивыми или резистентными (ТР-РОК). Разность между общим количеством Е-POK (в контрольной пробе) и количеством
ТР-POK после обработки теофиллином принимают за теофиллинчувствительные
E-POK.
Пример 1. Больной Б., поступил с распространенными высыпаниями язвенного характера в области голеней и бедер. Беспокоили боли в очагах поражений и обильное гнойное отделяемое. При обследовании со стороны артериальных и венозных сосудов обеих ног патологии не выявлено. Язвы продолжали увеличиваться в размерах. При неоднократном обследовании отделяемого язв на грибы диагноз глубокого микоэа был отвергнут. При иммунологическом обследовании периферической крови больного до лечения найдено повышенное содержание ТЧ-РОК (4бЖ и
В
850 кл/мм ), что дало основание поста-, вить диагноз хронической язвенной пиодермии. В дальнейшем диагноз был подтвержден на основании клинического наблюдения, гистологического исследования и результатами проводимой терапии.
Пример 2. Больной Б., поступил с распространенными кожными высыпаниями язвенного характера в клинику с предположительным диагнозом — глубокий микоэ. Гистологическое исследование биопсийного материала и неоднократные посевы отделяемого с поверхности язв на грибы не подтвердили вышеуказанный диагноз. При иммунологическом исследовании периферической крови больного до лечения процентное и абсолютное содержание ТЧ-POK (23X и 372 кл/мм ), что соответствовало
Э диагнозу хроническсгй яэвечной пиодермии. В дальнейшем диагноз подтвержден клиническим наблюдением и результатами проведенного лечения.
Пример 3. Больной О., поступил в клинику с язвенным дефектом кожи на тыльной поверхности левой кисти с диагнозом — хромомикоз кожин папилломатоэ кожи?
1411671
Т а б л и ц а 1
600
٠— н 579
493
С вЂ” в 867
533
Р— в 66
459
Д вЂ” и 913
Клинические обследования путем неоднократных биопсий кожи и посевов на грибы не подтвердили вышеуказанных диагнозов. Иммуиологическое же обсле5 дование периферической крови больного до лечения указало на наличие повышенного содержания теофиллинчувствительных клеток (36Х и 535 кл/мм ).
Специфическая терапия подтвердила 10 диагноз хронической язвенно-вегетирующей пиодермии.
Пример 4. Больная Ч., поступила с обширным язвенным дефектом кожи левой голени с предварительным 15 диагнозом — трофическая язва. Клинически отмечалось наличие обильного гнойно-геморрагического зксудата на поверхности очага поражения. Больную беспокоили мучительные боли, усили- 20 вающиеся при ходьбе. При обследовании венозной и артериальной систем пораженной конечности паталогии невыявлено. Диагноз трофической язвы был отвергнут. При иммунологическом обследовании периферической крови больной до лечения было найдено повышенное содержание теофиллинчувствительных клеток (637. и 1147 кл/мм ), что
3 было характерно для язвенной формы 30 хронической пиодермии. Соответствующая терапия способствовала клиническому выздоровлению больной.
Различают следующие клинические формы язвенных пиодермий: язвенная, 35 язвенно-вегетирующая, вегетирующая гангренозная. Все указанные клинические формы представляют собой единый патологический процесс с различной степенью тяжести течения заболевания, 40
Для наглядной иллюстрации, что данный способ служит для диагностики всех форм язвенных пиодермий, клинические разновидности разделены на соответствующие 4 группы больных язвенной хронической (табл. 1), вегети рующей (табл. 2), язвенно-вегетирующей (табл. 3) и гангренозной.(фиг.4) пиодермией.
Таким образом, предлагаемый способ оценки чувствительности Т-лимфоцитов к теофиллину при язвенных формах хронической пиодермии может быть рекомендован в качестве диагностического способа при указанной патологии.
Предлагаемый способ прост, легко воспроизводим и не требует длительного времени (2 дня) в сравнении с известным, где исследование занимает 6-7 дней.
У 80-85Х больных предел колебаний
J теофиллинчувствительных Т-лимфоцитов лежит в области 23-46Х или 350э
850 кл/мм, что в 2-3,5 раза превышает уровень предела колебаний у здоровых лиц. формула и э о б р е т е н и я
Способ диагностики язвенной формы хронической пиодермии путем клиникогистологического обследования больного, отличающийся тем, что, с целью ранней диагностики и повышения точности способа, дополнительно в периферической крови определяют количество теофиллинчувствительных клеток Т-лимфоцитов и при их уровне
350 клеток/ммз и более диагностируют язвенную форму хронической пиодермии.
1411671
1347
В - в
850
p — - х 609
444
650
361
Б-в
903
1333
А - в
509
5814
514
К-ва
410
Б-ва
224
0-ва
521
Ю-и
1046
611 д — р . 2206
357
378
429
229
К-в!
334
823
Ч-в
850
1341
Б - в
200+19
12,О+1,0
Ра0,001
Р<0,001
Ф.И.О.
Т - ва 226
С вЂ” в 475
450
554
778
131
С-в
596
Н-ла 737
Контрольная группа и= 30
М исто рии б< лезни
Продолжение табл. 1
32 7 1 4 590+30
Т а б л и ц а 2
14) 1671
Контрольная группа а 30 кл/ми (абсолютное (ТЧ-POK) Ф.И.О.
У истории болезни количество) 372
36
555
799
446
375
598
144
К - в
592
534+64
29,1+2,3
Контрольная группа п 30
1147
352
С-ва 627
Б -в 740
0 вЂ,н 341
M - в 2144
Г - н 368
С - н 484
 — ва 856
Ч вЂ” ва 403
Б - ва 297
Лродолхение табл.2
28 362
29 2+2 9 548+87
12,0+1,0 200+19
Рс0,001 Р 0,001
Т а б л и ц а 3
12,0+1,0 200+19
Р<0,001 Р40,001
Т а б л и ц а 4
141 1.671
Продолжение табл.4
634
К вЂ” н 328
К вЂ” к 517
А — ва 3231
П вЂ” и 813
 — в 132
1021
351
1125
370
36+5,9 7141119
Конт12,0+1,0 200+19
Р 0,001 Р 0,001 рольная группа и* 30
Составитель Л. Шилина
Редактор А, Ворович Техред Л.Олийнык Корректор В. Гирняк
Заказ 3649/41 Тираж 847 Подписное
В1(ИИПЙ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий
113035, Иосква, )K-35, Раушская наб., д. 4/5
Производственно-полиграфическое пред()риятие, r. Ужгород, ул, Проектная, 4