Способ исследования состояния сурфактанта при туберкулезе легких

Способ исследования состояния сурфактанта при туберкулезе легких

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

Изобретение относится к пульмонологии . Цель изобретения - интенсификация способа. Исследуемый материал помещают в делительную воронку, подкисляют соляной кислотой, экстрагируют хлороформом. Пробу экстрагируют повторно. Объединенные хлороформные экстракты упаривают. К осадку прибавляют ацетон и центрифугируют. Верхний слой ацетона декантируют и осадок подвергают метилированию.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК

„„Я0„„141 52

А1

I цр 4 С О1 N 33/48,-г. - ° у,.

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Н А ВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТ8ЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (21) 4063483/28-14 (22) 24.03.86 (46) 30.07.88. Бюл. У 28, (71) Киевский медицинский институт им. акад. А.А. Богомольца (72) Н.С. Пилипчук, P.Г. Процюк, Т.С. Брюзгина,. Э.Я. Кравченко и О.К. Усатенко (53) 616.07(088.8) (56) Терещук О.М., Немеровский В.И.

Сурфактанты легкого в норме и патологии, Киев: Наукова думка, 1983, с. 166-171.. (54) СПОСОБ ИССЛЕДОВАНИЯ СОСТОЯНИЯ

СУРФАКТАНТА ПРИ ТУБЕРКУЛЕЗЕ (57) Изобретение относится к пульмонологии. Цель изобретения — интенсификация способа. Исследуемый материал помешают в делительную воронку, подкисляют соляной кислотой, экстраги" руют хлороформом. Пробу экстрагируют повторно. Объединенные хлороформные экстракты упаривают. К осадку прибавляют ацетон и центрифугируют. Верхний слой ацетона декантируют и осадок подвергают метилированию.

1413528

Изобретение относится к медицине, в частности к пульмонологии.

Цель изобретения — интенсификация способа.

Способ осуществляют следующим образом.

Исследуемый материал помещают в делительную воронку, подкисляют 2-3 каплями соляной кислоты концентрацией 1:1 до рН 2, затем экстрагируют хлороформом в соотношении 1:5 в течение 5 мин (осторожно встряхивая) и оставляют на 30 мин при 4 С. Отделяют нижний хлороформный слой. Для полноты15 экстракции пробу экстрагируют повторно.

Объединенные хлороформные экстракты концентрируют упариванием воздуха о в токе азота при 45-50 С на водяной 20 бане ° К бсадку прибавляют ацетон в соотношении (1:10) и оставляют при о

4 С на 1,5-2 ч, затем центрифугируют при 1500 об/мин в течение 30 мин.

Верхний слой ацетона декантируют и оставшийся осадок подвергают метилированию по известному методу для проведения газохроматографического анализа и определения спектра жирных кислот фосфолипицов сурфактантов.

По процентному распределению жирных кислот при сопоставлении с нормой судят о качестве сурфактантов, характеризующих функциональное . состояние легких.Для осуществления способа требуется 6-8 ч.

Пример I. Больной О-ский, 43 лет, Поступил 9.02.85 с диагнозом: кавернозный туберкулез шестого сег. — 40 мента правого легкого; БК вЂ”, В

1983 г. выявили инфильтрат в правом легком в фазе распада. Проводилось лечение изониазидом 0,3 г 2 раза в день внутрь, стрептомицином 1,0 г 45 внутримышечно и этанбутолом 1,2 r внутрь. Злоупотреблял алкогольными напитками. Химиопрепараты принимал нерегулярно. В связи с неэффективнос тью лечения 20.12.85 произведена резекция шестого сегмента правого легкого. Из резецированного участка иссекли кусочек неизмененной паренхимы легкого, который отмыли от крови в

0,97-ном растворе натрия хлорида. Для 5 получения гомогената взяли 100 мг ткани, экстракцию проводили изотоническим раствором. Полученный экстракт . центрифугировали при 1500-2000 об/мин в течение 5-10 мин. Надосадочную жидкость использовали для анализа.

К 1 мл экстракта ткани легкого прибавили несколько капель соляной кислоты концентрацией I:l. Затем добавили 5 мл хлороформа и экстрагировали в течение 5 мин, осторожно встряхивая. Экстрагируемую смесь оставили на 30 мин при 4 С для разделения фаз. Отделили нижний хлороформный слой. Этап экстракции повторяли и объединенные хлороформные экстракты упаривали досуха в токе азота на водяной бане при 45-504С. К сухому остатку добавили 10 мл ацетона и оставили при 4 С на 2 ч, затем центрифугировали при 1500 об/мин в течение 30 мин.

Ацетон декантировали, оставшийся остаток подвергли метилированию по известному .методу. Иетиловые эфиры жирных кислот фосфолипидов анализировали на газовом хроматографе. Состояние сурфактантов оценивали по про»".. центному распределению жирных кислот фосфолипидов при сопоставлении их с нормой.

Пример 2. Больная С-ва, 43 лет. Поступила 23.11.85, на обследование. Жалобы на постоянный сухой кашель. Для уточнения диагноза произведена бронкоскопия под наркозом. Эндоскопически установлен диагноз: туберкулез внутригрудных лимфатических узлов левого главного бронха, свищевая форма.

Во время бронхоскопии с помощью изотонического раствора натрия хлорида у больной были взяты бронхоальвеолярные смывы (лаважная жидкость), которую подвергли центрифугированию при 1500 об/мин в течение 10 мин, надосадочную жидкость использовали для анализа.

К 1 мл лаважной жидкости прибавили 2-3 капли соляной кислоты концентрацией I:I, затем добавили 5 мл хлороформа и экстрагировали в течение

5 мин, осторожно встряхивая. Экстрагируемую смесь оставляли на 30 мин о при 4 С для разделения фаз. Отделили нижний .хлороформный слой. Этап экстракции повторили и объединенные хлороформные экстракты упарили досуха в токе азота на водяной бане при 45о

50 С. К сухому остатку добавили

10 мл ацетона и оставили при 4 С на

2 ч, затем центрифугировали при

1500 об/мин в течение 30 мин. Ацетон

1413

Формула изобретения

Составитель Л.Конюхов

Редактор А.Огар Техред Л.Олийнык . Корректор С.Черни

Заказ 3777/47 Тираж 847 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам .изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб,, д. 4/5

Производственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул. Проектная, 4 декантировали, оставшийся остаток подвергли метилированию по известному методу. Метиловые эфиры жирных кислот фосфолипидов анализировали на ra5 зовом хроматографе. Состояние сурфактантов оценивали по процентному распределению жирных кислот фосфолипидов при сопоставлении их с нормой.

Пример 3. Больная К-ская, 42 лет. Поступила в клинику 22.10.85 с диагнозом: инфильтративный туберкулез первого и второго (S,-8 ) сегментов правого легкого в фазе распада; БК +. Заболевание выявлено впервые. Проводилось лечение изониазидом 0,3 r 2 раза в день внутрь, рифампицином 0,45 г внутрь и стрептомицином 0,75 г внутримьппечно.

24,01,85 у больной для исследования сурфактантов был взят конденсат выдыхаемого воздуха по известному способу.

К I мл конденсата выдыхаемого воздуха прибавили несколько капель со- 25 ляной кислоты концентрацией 1:1, затем добавили 5 мл хлороформа и экстрагировали в течение 5 мин, осторожно встряхивая. Экстрагируемую смесь оставили на 30 мин при 4 С для разделения фаз. Отделили нижний хлороформный слой. Этап экстракции повторили

528

4 и объединенные хлороформные экстракты упарили досуха в токе азота на водяной бане при 45-50 С. К сухому ос" татку добавили 10 мл ацетона и оставили при 4 С на 2 ч, затем центрифугировали при 1500 об/мин в течение

30 мин. Ацетон декантировали, оставшийся осадок подвергли метилированию по известному способу. Метиловые эфиры жирных кислоты фосфолипидов анализировали на газовом хроматографе.

Состояние сурфактантов оценивали IIO процентному распределению жирных кислот.фосфолипидов при сопоставлении их с нормой.

Способ характеризуется точностью и простотой -исполнения.

Способ исследования состояния сурфактанта при туберкулезе легких, включающий экстракцию липидных компонентов C .последующим анализом уровня жирных кислот фосфолипидов методом изохроматографического анализа, о тл и ч а ю шийся тем, что, с це" лью интенсификации способа, экстракцию липидных компонентов проводят хлороформом, а фосфолипиды из экстракта осаждают ацетоном при 4 С.