Способ качественного определения сарколизина и продуктов его гидролиза в крови и солевом водном растворе

Способ качественного определения сарколизина и продуктов его гидролиза в крови и солевом водном растворе

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

Рй 142075

Класс 42l, 3з4

СССР

"C "ÑO:O3i- й

ЯЩ".ЮТг! а

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

Подписная группа М 178

К. Ю. Хорунжая

СПОСОБ КАЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ САРКОЛИЗИНА И

ПРОДУКТОВ ЕГО ГИДРОЛИЗА В КРОВИ И СОЛЕВОМ

ВОДНОМ РАСТВОРЕ

Заявлено 18 августа 1960 г. за № 677001/31 в Комитет по делам изобретений и открытий при Совете Министров СССР

Опубликовано в «Бюллетене изобретений» № 20 за 1961 r.

Для лечения злокачественных опухолей наряду с хирургическими и лучевыми методами лечения приобретает значение химиотерапия пораженных тканей. В лекарственной терапии опухолей большое значение имеют способы быстрого и простого определения противоопухолевых препаратов, представляющих собой в основном группу хлорэтиламинов. Известные способы определения хлорэтиламинов, к которым относится и сарколизин, например, косвенный способ электрометрического титрования Н и Cl ионов, способ мгновенного определения гипосульфитного титра, способ меченых по углероду атомов, способ спектрофотометрического определения в сочетании с хромографией на бумаге трудоемки, продолжительны и рассчитаны на наличие значительного количества исследуемого вещества.

Предлагаемый способ качественного определения сарколизина и продуктов его гидролиза в крови и солевом водном растворе является экспресс-методом, причем чувствительность при его применении определяется гаммами. С целью упрощения и ускорения процесса определения, в исследуемую жидкость вносят трихлоруксусную кислоту, нингидрид и полученную смесь прогревают на кипящей водяной бане.

Пример 1. Определение сарколизина в крови, В одну пробирку наливают 1 мл контрольной плазмы, в другую—

1 мл плазмы исследуемой крови; в каждую пробирку добавляют по

0,2 мл 60 /,-ной трихлоруксусной кислоты и перемешивают смесь стеклянными палочками. В одну из пробирок приливают 1 мл 1о о-ного нингидрина и тотчас тщательно перемешивают. Затем добавляют 1 мл

1 Д -ного нингидрина в другую пробирку и также тотчас перемешивают.

Затем обе пробирки ставят в кипящую водяную баню на 10 — 15 мин, после чего сравнивают окраски смеси в пробирках. В опытной пробе

¹ 142075

Предмет изобретения

Способ качественного определения сарколизина и продуктов его гидролиза в крови и солевом водном растворе, отличающийся тем, что, с целью упрощения и ускорения процесса, в исследуему!с жидкость вносят трихлоруксусную кислоту, нингидрин и полученную смесь прогревают на кипящей водяной бане.

Составитель А. В. Нечайкин

Редактор А. К. Лейкина Техред А. А. Кудрявицкая Корректор М. И Козлова

Формат бум 70)(!08 /, Тираж 800

ЦБТИ при Комитете по делам изобретений и открытий при Совете Министров СССР

Москва, Центр, М. Черкасский nep., д. 2/6.

1 одп. и пе . 2.XI-Б! г

Зак. 10929

OR eì 0,18 изд л.

Цена 4 коп.

Типография ЦБТИ Комитета по делам изобретений и открытий при Совете Министров СССР. Москва, Петровка, 14. при наличии сарколизина появляется розоватое окрашивание смеси.

Таким образом можно обнаружить сарколизин при содержании его

0,02 мгlмл. Продолжительность анализа 15 — 20 мин. Значительный гемолиз (более 90 — 100 мг/%) может мешать качественному определению сарколизина в крдви.

Пример 2...;Определение сарколизина в солевом водном растворе.

На часовое стекло:микропипеткой наносят две одинаковые по объему капли солевого раствора: одна капля †контрольн проба (без сарколизина), другая — исследуемая на содержание сарколизина. 1 каждой из капель прибавляют по такому же объему 1%-ного раствора нингидрина, нагревают в течение около 30 сек над пламенем газовой горелки, затем дают остыть в течение 3 — 5 мин, после чего стекло вновь нагревают не менее 30 сек. В результате повторного нагревания в опытной пробе ясно вырисовывается интенсивно окрашенный коричневокрасноватый ободок. Незначительное окрашивание ободка может появиться и в контрольной пробе за счет некоторого окисления нингидрина, однако в опытной пробе ободок окрашен гораздо ярче в результате реакции нингидрина с фенилаланиновым остатком сарколизина. Предел чувствительности реакции равен 0,18 сарколизина в капле, что составляет открываемый минимум препарата порядка 0,009 ма/ил В случае работы с более концентрированными растворами сарколизина повторное прогревание проб может не требоваться.

Описанный способ проведен в Институте экспериментальной и клинической анкологии; по данным проверки установлено, что кроме сарколизина окрашивание получается и при взаимодействии нингидрина с продуктами гидролиза сарколизина в водном растворе.