Способ определения 1,5-диаминоантрахинона в крови лабораторных животных

Способ определения 1,5-диаминоантрахинона в крови лабораторных животных

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

Изобретение относится к медицине . Из сьшоротки крови удаляют белки и экстрагируют смесью бензолхлороформ (4:1). Экстракт отстаивают и спектрофотометрируют при длине волны 410 нм и толщине поглощаемого слоя 1 см. Изобретение повьппает чувствительность способа до 0,1мг/Л. 2 табл.

союз советсних

СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ

РЕСПУ БЛИН (51) 4 G 01 К 33/48

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К A BTOPCHOMV СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И OTKPblTHA (21) 4148131/28-14 (22) 17. 11. 86 (46) 23.09.88. Бюл. N 35 (71) Пермский политехнический институт -. (72) Н.В.Зайцева, А.В.Михайлов и С.А.Силла (53) 612.015 (088.8) (56) Методические указания по химическому анализу лекарственного растительного сырья. Пермь, ПГФИ, 1979, с.45..SU 1425545 А1 (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ 1,5-ДИАМИНОАНТРАХИНОНА В КРОВИ ЛАБОРАТОРНЫХ

ЖИВОТНЫХ (57) Изобретение относится к медицине. Из сыворотки крови удаляют белки и экстрагируют смесью бензолхлороформ (4:1). Экстракт отстаивают и спектрофотометрируют при длине волны 410 нм и толщине поглощаемого слоя 1 см. Изобретение повышает чувствительность способа до 0,1мг/и.

2 табл.

Изобретение относится к медицинским токсикалогическим исследованиям, н частности санитарной токсикологии и может быть использовано для коли" чественного определения 1,5-диаминоантрахинона н биологических жидкостях, например в крови.

Цель изобретения — повышение чувствительности способа.

Поставлеьная цель достигается тем, что при осуществлении способа определе п я 1,5-диаминаантрахинана в биологических жидкостях путем добавления к исследуемой пробе экстра| гента с .последующим фотометрирова-!, нием полученного при взаимодействии

1,5"диаминаантрахинона. с зкстрагентом окрашенного продукта, отличителвной особенностью является то„ что в качестве экстрагента используют смесь бензала с хлора ормом в соотношении 4:1, что позволяет повысить чувствительность способа до 0,1 мг/л. О количестве определяемого вещества судят по величине оптической плотности.. .".:.ри экстрагировании анализируемого вещества образуется красно-коричневый раствор. который затем фотометрируют при длине волны 410 нм и толщине поглощаю-= щего слоя 1 см.

Способ осуществляют "педующим образом.

У лабораторного животного (белая крыса весом 150-180 г) отбирают

3 мл крови. Пробу крови центрифуги-

1 руют в течение 15 мин на лабораторной центрифуге ОП, -3 са скоростью

3000 об/мин. Из пробы отбирают 2 мп сыворотки крови,„ к которой прибавляют 0,5 мл 10%-ного раствора хлористого кальция. Для свертывания и осаждения белков раствор центри- фугируют в течение 5 мин со скоростью 3000 об/мин. К 2 мл надосадочной жидкости прибавляют 4 мп бензола и 1 мл хлороформа, Смесь перемешивают и содержимое интенсивно встряхивают н течение 10 мин, Смеси дают отстояться до полного расслоения реагентов и исследуемой пробы. Затем бензольна-хлороформенный слой сливают в пробирку и через

15-20 мин после экстрагирования,измеряют оптическую плотность окрашен-ного раствора на спектрофотометре при длине волны 410 нм и толщине поглощающегo:"ëoè 1 см, По аналогич=!

16

26

36

3"

46

45 ной прописи определяют 1,5-диаминоантрахинон в других биологических жидкостях.

Пример. Анализируют пробы крови (3 мл) с содержанием 1 ° 5-диаминоантрахинона 0,0; 0,1; 0,5; 1,0;

3,0; 5,0 мг/л. Пробы крови центрифугируют в течение 15 мин на лабораторной центрифуге ОП„ — 3 со скоростью 3000 об/мин. Из каждой пробы отбирают по 2 мл сьпзоротки крови, к которой прибавляют 0 5 мл 10%-ного раствора хлористого кальция. Для свертывания и осаждения белков раствор центрифугируют в течение 5 мин со скоростью 3000 об/мин. К 2 мл насадочной жидкости прибавляют 4 мл бензола и 1 мл хлороформа. Смесь перемешивают и содержимое интенсивно нстряхивают в течение 10 мин.

Смеси дают отстояться до полного расслоения реагентов и исследуемой пробы. Затем бензольно-хлороформенный слой сливают в пробирку и через

15-20 мин после экстрагирования измеряют оптическую плотность окрашенного раствора на спектрофотометре при длине волны 410 нм и толщине поглощающего слоя 1 см.

Результаты определения 1,5-диаминоантрахинона при граничных запредельных и оптимальных значениях параметрон приведены в табл.1. Полученные данные с|зидетельствуют о там, что оптимальный эффект наблюдается при использовании в качестве реагентов смеси бензола и хлороформа в соотношении 4:1.

Сравнительные данные определения

1,5-диаминоантрахинона по известному и предлагаемому способам представлены в табл.2.

Как видна из табл.2, предлагаемьй способ определения 1,5-диаминоантрахинона является более чувствительным,, чем известный способ.

Формула изобретения

Способ определения 1,5-диаминаантрахинона в крови лабораторных животных, включающий получение сыворотки кровя, удаление белков, экстракцию органическим растворителем с последующей спектрофотометрией полученного раствора, о т л и— ч а ю шийся тем, чта, с целью повышения чувствительности способа, Т а б л и ц а 1

Не определено

0,0

0,5

1,0 — 18,0

Ф

7,0

3,54

3,0

5,35

5 0

Не определено

0,0

2 °

0,1

0 5

1,0

-21,0 — 9,0 — .3,2

1,21,3,27

3,0

5,16

5,0

3:1

0,0 о

Не определено

0,1

12,0

27, 0

16,7

+ — 5,0

0,56

0 5

1,27

1,0

3,0

3 5

5,25

5,0

Не определено

О, 108

0,0

4:1.. 8,0 4,0

-50

0,1

0,52

0,5

1,05

1,0

3,0

2,9

3,09 з 1425545

4 экстракцию проводят смесью бензол- отстаивают не менее 15 мнн, после хлороформ, взятых в объемном соот- чего спектрофотометрир.ют нри длине ношении 4: 1, полученный экстракт волны 410 нм.

1425545

Продолжение табл.1

5,08

1,6

5,0

5:1

О,О

Не определено

0,1

12,0

0,5

0,56

13,0

+ — 3,3

1,0

1,13

3,1

3,0

1,0

5 05

5 0

6:1

0,0

Не определено

0,1

1,21

1,0

3,08

5,12

5,0

Таблица2

Известный способ

Предлагаемый способ

Определяемая конЦентрация, (средняя пяти определений), мг/л

Погрешность определения, %

3 анная кон центрация, мг/л огрешность пределения

% аданная онцентрация, мг/л

Не определено

0,0

Не определено

0,0

0,1

0,11

0 5

0,51

". 16, О

1,06

1,0

1,0

11,8

3,0

3,40

3,09

3,0

5 О

5,25

5,7

5,0

Тираж 847 Подписное

ВНИИПИ Заказ 4761/40

Произв.-полигр. пр-гие, г. ужгород, ул. Проектная, 4 пр ед еля емая онцентрация средняя пяти пределений), мг/л

21,0

2,6

2,4

10,0

2,0

6,0

2,9 — 4,8