Способ предотвращения фаголизиса бактериальных культур

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

Изобретение относится к микробиологической промышленносуи, а именно к способам защиты бактериальных культур - продуцентов биологически активных соединений от фаголизиса. Целью изобретения является снижение токсичности. Для предотвращения фаголизиса при выращивании культуры Ervinia carotovora в кулътуральную жидкость вводят б-азацитццин в концентрации 1-50 мкг/мл.

СОЮЗ СОВЕТСНИХ

СОЦИАЛ ИСТИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИК (51) 4 С 12 N 1/00

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО-ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ

Н д ВТОРСНОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 3880275/31-13 (22) 09.01.85 (46) 23.11.88. Бюл. У 43 (71) Институт микробиологии и вирусологии им. Д.К. Заболотного и Институт молекулярной биологии и генетики

АН УССР (72) Я .Г. Кишко, В П. Чернецкий, И.В. Алексеева, Н.Я.Спивак, Н.П. Петухова, Ф.Ф. Солонтай и В.С; Митько (53) 576.858.9(088.8) (56) Bacttchefti et а1, Farmaco Ed

Sc. 1980, 53,6, 481-489.

Авторское свидетельство СССР

У 697562, кл. С 12 К 1/00, 1978.

„„SU„„1439121 А 1 (54) СПОСОБ ПРЕДОТВРАЩЕНИЯ ФАГОЛИЗИСА БАКТЕРИАЛЬНЫХ КУЛЬТУР (57) Изобретение относится к микробиологической промышленности, а именно к способам защиты бактериальных культур — продуцентов биологически активных соединений от фаголиэиса. Целью изобретения является снижение токсичности. Для предотвращения фаголизиса при выращивании культуры Ervinia carotovora в культуральную жидкость вводят б-азацитидин в концентрации 1-50 мкг/мл.

14391 21 предотвращение фаголиэиса с помощью гексаметилендииэоцианата (внесенного 0,1Х по объему) наблюдают почти полное подавление роста бактерий продуцентов L-аспарагиназы.

Формула изобретения

Составитель И, Тарееза

Техред N.Äèäûê

Корректор О. Кравцова

Редактор Н. Гунько

Подписное

Заказ 6041/25 Тираж 520

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д, 4/5

Проиэводстзеннополиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул, Проектная, 4

Изобретение относится к микроби ологической промышленности,, а именно к способам защиты бактериальных культур — продуцентов биологически активных соединений от фаголизиса.

Целью изобретения является сниже-. ние токсичности при выращивании культуры Erwinia. carotovora, Пример 1. В колбы объемом 300 мп вносят питательную среду— аминопептид с физиологиче.ким раствором в соотношении 1:1 и посевную дозу опытной культуры Erwinia carotovora, которую предварительно синхро15 ниэируют, выдерживая в течение 1 ч о при 4 С. B опытные колбы вносят также 6-азацитидин в концентрациях 1,5, 10, 50 мкг/мл. Колбы с материалом помещают на качалки и культивируют при о

30 С. Через различные промежутки времени после начала культивирования для определения динамики роста бактерий и присутствия спонтанно продуцнруемого культурой бактериофага отбирают пробы культуры. Динамику ро.; ста бактерий определяют по оптической ! плотности бактериальной суспензии и

; по количеству жизнеспособных микро1 организмов (серийные разведения мик., роорганизмов высевают на твердую пи— ! тательную среду). Количество свободных фаговых частиц в этих пробах ! определяют методом двухслойных агаровых слоев с помощью индикаторной культуры для фага. Спонтанный выход фаговых частиц почти полностью подавляется в присутствии 6-азацитиди-на по сравнению с контролем при незначительном снижении плотности кле4О точной популяции. В то же время при использовании известного способа

Пример 2. В аппараты непрерывного культивирования микроорганизмов с рабочим объемом 1,5 л, стерильной подачей воздуха 0,5 л/мин, скоростью вращения 200 об/мин вносят посевную дозу синхронизированной культуры Erwinia caroto rora (1/15 часть рабочего объема аппарата). и препарат — 6-азацитидин концентрации

50 мкг/мл. В качестве питательной среды используют смесь аминопептид и

0,15 М ИаС1. Через различные промежутки времени отбирают пробы культуральной среды для определения динамики роста бактерий и спонтанно продуцируемого культурой бактериофага. Полученные результаты свидетельствуют, что, как и в случае выращивания бактерий на качалках, данный препарат полностью подавляет спонтанный фаголиэис бактерий. В случае использования известного вещества отмечают почти полную инактивацию жизнеспособных бактерий.

Способ предотвращения фаголизиса бактериальных культур, включающий введение в культуральную жидкость протективного вещества, о т л и— ч а þ ù è é с я тем, что, с целью снижения токсичности при выращивании культуры Erwinia carotovora, в качестве протективного вещества используют 6-азацитидин в концентрации: 150 мкг/мл.