Штамм бактерий еnтеrовастеr cloacae, используемый в качестве тест-объекта для санитарно-бактериологических исследований

Штамм бактерий еnтеrовастеr cloacae, используемый в качестве тест-объекта для санитарно-бактериологических исследований

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

Изобретение относится к санитарной микробиологии. Цель изобретения - создание штамма бактерий, обладающего длительной выживаемостью по внешней среде, селективными штаммоспецифическими свойствами, что позволяет упростить его вьщеление, идентификацию и повысить точность исследования. Штамм Е.cloacae депонирован в коллекции ГИСК им.Л.А.Тарасевича под номером 174. Штамм получен путем селекции и характеризуется длительной выживаемостью во внешней среде ,(9-10 сут на поверхности полимеров и стекла) и селективной штаммоспецифической устойчивостью к гексаметилентетрамину (МИК 15000 мкг/мл) и налидиксовой кислоте (МИК 700 мкг/мл), контролируемой хромосомньми нетрансмиссивными генами . Указанные свойства штамма позволяют повысить точность моделирования передачи возбудителей кишечных инфекций с длительным выживанием во внешней среде (брюшной тиф, сельмонеллезы) и упростить исследование, ввиду идентификации штамма.сопряженно с его выделением на селективной среде с гексаметилентетрамином и налидиксовой кислотой. Штамм может быть использован для изучения и контроля санитарного режима эпидемиологически важных объектов. ш (Л 4 4 а СП со

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИН

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

8. ! .

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ (21) 4254777/28-13 (22) 01.06.87 (46) 23.12.88. Бюл. И 47 (72) Е.П.Сиволодский и А.А.Клишин (53) 676.8.033. 1 (088.8) (56) О совершенствовании лабораторного контроля эа соблюдением дезинфекционного режима на эпидемиологически важных объектах, Информационно-методическое письмо. Утв. ИЗ

РСФСР Ф 09/18-969, 09.09.80. (54) ШТАИМ БАКТЕРИЙ ENTегоBACTER

CLOACAE, ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ В КАЧЕСТВЕ ТЕСТ"

ОБЪЕКТА ДЛЯ САНИТАРНО-БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКИХ ИССЛЕДОВАНИЙ (57) Изобретение относится к санитарной микробиологии. Цель изобретения - создание штамма бактерий, обладающего длительной выживаемостью по внешней среде, селективными штаммоспецифическими свойствами, что позволяет упростить его выделение, идентификацию и повысить точность исследования. Штамм Е.с1оасае депо„„SU„„1446153 А1 (51)4 С 12 N 1/20 С 12 Ц 1/02 нирован в коллекции ГИСК им.Л.А.Та. расевича под номером 174. Штамм получен путем селекции и характеризуется длительной выживаемостью во внешней среде,(9-10 сут на поверхности полимеров и стекла) и селектив" ной штаммоспецифической устойчивостью к гексаметилентетрамину (ИИК

15000 мкг/мл) и налидиксовой кислоте (YHK 700 мкг/мл), контролйруемой хромосомными нетрансмиссивными генами. Указанные свойства штамма позволяют повысить точность моделирования передачи возбудителей кишечных инфекций с длительным выживанием во внешней среде (брюшной тиф, сельмонеллезы) и упростить исследование, ввиду идентификации штамма сопряженно с его выделением на селективной среде с гексаметилентетрамином и налидиксовой кислотой. Штамм может быть использован для изучения и контроля санитарного режима эпидемиологически важных объектов.

144б153

Изобретение относится к микробиологии, в частности к санитарной микробиологии, и может быть использовано для изучения и контроля санитар5 ного режима эпидемиологически важных объектов (продовольственно-пищевых, водоснабжения и др.), выявления источников, путей и факторов передачи возбудителей бактериальных кишеч- 10 ных инфекций.

Целью изобретения является создание штамма бактерий, обладающего длительной выживаемостью во внешней среде и селективными штаммоспецифическими свойствами, что позволит уп.ростить его выделение, идентификацию и .повысить точность исследования.

Новый штамм Entегоhacter сlоасае

18, обладающий хромосомной нетранс-миссивной устойчивостью к гексамети лентетрамину и налидиксовой кислоте и длительной выживаемостью во внешней среде, получают из исходного штамма Entегоbacter сlоасае, выделен-g5 ного из кишечника здорового человека путем последовательной селекции на питательных средах с химиопрепарата" ми вначале мутанта, услойчивого к гексаметилентетрамину, а затем на его основе мутанта, дополнительно устойчивого к налидиксовой кислоте, Штамм Entегоbacter cloacae 18 сохра» няет видовые свойства исходного штамма Entегоbacter с).оасае, в т,ч,, длительную выживаемость во внешней среде, и приобретает дополнительные селективные штаммоспецифические свойства - хромосомную нетрансиис" сивную устойчивость к гексаметилентетрамину и налидиксовой кислоте.

Штамм Entегоbacter cloacae 18 депонирован в коллекции Государственного научно-исследовательского института стандартизации и контроля медицинских биологических препаратов им, Л.А.Тарасевича нод номером 174.

Штамм Entегоbacter cloacae 18 ха" рактеризуется следующими признаками.

Культурально-морфологические при» знаки. Клетки палочковидные, одиноч" 50 ные, размеры 1-2х0,2-0,3 мкм, грамотрицательные, не имеют спор и капсул.

На питательном агаре, питательном агаре с налидиксовой кислотой 55 (100 мкг/мл) и гексаметилентетраМином (5000 мкг/мл) через 18-24 ч выращивания в аэробных условиях при

37 С образует колонии диаметром 24 мм, круглые, выпуклые, сочные, с гладкими краями, мутные, светло, ерые, На среде Эндо в тех же условиях растет в виде колоний диаметром 3-4 мм, бесцветных, гладких, мутных.

Физиолого-биохимические свойства.

Ферментирует с образованием кислоты и газа глюкозу, сахароэу, мальтозу, арабинозу, маннит, рамноэу, ксилоэу.

Не ферментирует лактозу, иноэит. Образует ацетилметилкарбинол (реакция

Фогеса-Проскауэра положительная).

Не продуцирует индол и сероводород.

Иочевину не расщепляет ° Не обладает лизиндекарбоксилаэой, фенилаланинде- заминаэой и три.

Утилиэирует цитрат натрия на среде

Симмонса, не утилизирует ацетат натрия. Подвижен, Факультативный анаэроб.

Непатогенен для человека, Выживает во внешней среде на поверхности изделий иэ полистирола в течение 9 сут, на поверхности изделий иэ стекла — 10 сут, Устойчив к гексаметилентетрамину (ИИК 15000 мкг/мп) и налидиксовой кислоте (MHK 700 мкг/мл). Гены устойчивости к указанным химио-препаратам имеют хромосомную локализацию и нетрансмиссивны путем конъюгации. Чув" ствителен к химиопрепаратам! ИИК, мкг/мл левомицетин 4, тетрациклин 8, рифампицин 16- стрептомицин 1; канамицин f.

П р и и е р. Использование штаммов Entегоbacter cloacae 18 и Escherichia coli M17-NR для санитарнобактериологического исследования с целью оценки состояния санитарного режима в столовой и выявление факторов передачи возбудителей бактериальных кишечных инфекций.

В мясном цехе столовой наносят ватным тампоном суспенэию (1 "10 живых микробных тел в 1 мл) бактерий штамма Entегоbacter cj oacae 18 на поверхность кусков сырого мяса, в овощном цехе наносят ватным тампоном суспензию (5 10 живых микробных тел в 1 мл) бактерий штамма E.coli И17НК на сырье неочищенные овощи, Через

4 и 24 ч делают смывы с рук персона" ла столовой, ручек дверей и объектов, подлежащих санитарно-бактериалогическому контролю (чистой. столоС ос тави тель Г. Смир нова

Редактор Н,Гунько Техред Л.Олийнык Корректор М.Максимишинец

Заказ 6706/30 Тираж 520

Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-полиграфическое предприятие, r. ужгород, ул. Проектная, 4 э 14 вой и кухонной посуды, разделочных столов и др,). .Тампонами,со смывами засевают в пробирках косячки со селективной средой для Е. с1оасае 18 (питательный агар с гексаметилентетрамином 5000 мкг/мл и налидиксовой кислотой 100 мкг/мл) и селективной средой для Е.coli М17-NR (среда

ЗНДО с рифампицином 100 мкг/мл и налидиксовой кислотой 70 мкг/мл). Че-. рез 18-24 ч инкубации при 37 С выявляют и идентифицируют штаммы

Е.cloacae 18 и Е.coli М17-NR по наличию роста бактерий на косячках селективной питательной среды, соответствующей штамму. Определяют процентное отношение выявленных загрязненных тест-культурамн объектов к числу обследованнь объектов, В данном исследован. :и г смывах через 4 ч штамм Е.cloacae 18 выделяют с 15Х объектов и рук трех работников столовой, штамм E.coli М17,NR : — с. 20Х объектов и рук .пяти рабоников столовой. В смывах черех 24 ч штамм Е.coli 18 выделяют с рук двух работников столовой, со стола и разделочных досок для сырого мяса, ручек двери .мясного цеха, штамм E;coli,М17-NR не выде.ляют. Полученные результаты указывают на роль сырого мяса и сырых ово" щей, как важного фактора передачи кишечной микрофлоры.

Приготовление питательной среды для выделения и идентификации бактерий Entегоbacter cloacae 18. В -1 л воды вносят 35 г сухого питательного

46153

4 агара из рыбного гидролизата, кипятят до полного. растворения, добавляют 5 r гексаметилентетрамина, 10 мл горячего раствора налидиксовой кислоты (готовят путем растворения

0,5 г невиграмона в 5 мл 1 N раствора УаОН добавления 45 мл дистиллированной воды и кипячения до полного растворения), перемешивают, разливают в стерильные чашки Петри или пробирки (по 4-5 мл с последующим скашиванием). Готовая среда сохраняет цвет исходного питательного агара, пригодна к использованию в течение

7 сут при хранении от +4 до +8 С.

На питательной среде обеспечивается рост только бактерий штамма E.cloacae 18, рост остальных видов и штаммов бактерий полностью подавляется.

Чувствительность питательной среды для штамма Е.cloacae 18,соответствует чувствительности исходного питательного агара.

Еффективность использования штамма .Entегоbacter cloacae 18 определяется комплексом его свойств: дли тельностью выживания во внешней среде, селективной штаммоспецифической устойчивостью к гексаметилентетрамину и налидиксовой кислоте, что позволяет упростить исследование и по" завысить их точность. .Формула изобретения

Штамм бактерий Entегоbacter cloa" сае ГИСК В 174, используемый в качестве тест.-объекта для санитарно-, бактериологических исследований.