Способ определения повреждений клеток экстремальным физическим воздействием
Иллюстрации
Показать всеРеферат
Изобретение относится к радиобиологии , медицине, селекции, касается определения степени повреждения и относительной устойчивости к действию радиации и других экстремальных факторов; С целью упрощения и ускорения способа, а также для раннего определения степени повреждения нативных клеток радиацией и другими экстремальными воздействиями путем оценки их биоэлектрических показателей для повышения точности используют для определения минимальный ток смещения (1„им ) ядер и ядрьшек до и после воздействия и по изменениям показателя судят о степени повреждения и о различиях в устойчивости объектов в к экстремальшлм воздействиям . Способ позволяет значительно ускорить исследование клеток и тканей с помощью мнкроэлектрофореза. о $ (О
СОЮЗ СОВЕТСКИХ
СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ
РЕСПУБЛИК ц 4 С 01 N 33/48
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
К АВТОРСКОМ,Ф СВИДЕТЕЛЬСТВУ
ГОСУДАРСТЙЕННЫЙ КОМИТЕТ
ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ
ПРИ ГКНТ СССР (21) 4181250/28-14 (22) 14.91. 87 (46) 15. 0) . 89. Бюл. И 2 (71) Харьковский государственный университет им. А.М. Горького (72) В. Г.П1ахбаэов, Т.В.Колупаева, А.Л.Набоков, Ю. Г.Шкорбатов и В.Ю.Страшнюк (53) 611.015 (088.8) (56) Бочков Н.Б. Хромосомы человека и облучение. М.: Атомиздат, 1971. (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ПОВРЕЖДЕНИИ
КПЕТОК ЭКСТРЕМАЛЬНЫМ ФИЗИЧЕСКИМ ВОЗДЕЙСТВИЕММ (57) Изобретение относится к радиобиологии, медицине, селекции, касается определения степени повреждения
„„SU„„1451600 A 1 и относительной устойчивости к действию радиации и других экстремальных факторов. С целью упрощения и ускорения способа, а также для раннего определения степени повреждения нативных клеток радиацией и другими экстремальными воздействиями путем оценки их биоэлектрических показателей для повышения точности используют для определения минимальный ток смещения (?„„„) ядер и ядрьппек до и после воздействия и по изменениям показателя ? „„судят о степени повреждения и о различиях в устойчивости объектов в к экстремальным воздействиям. Способ позволяет значительно а ф ускорить исследование клеток и тканей с помощью микроэлектрофореэа.
1451600
Изобретение относится к радиобиологии, медицине, селекции и может быть использовано для определения повреждения и относительной устойчивос5 ти организма к действию радиации, и других экстремальных факторов.
Цель изобретения —. упрощение и ускорение способа, а также раннее определение повреждений клеток. 10
Цель достигается тем, что, в пробах нативных клеток до и после воздействия радиации и других повреждающих факторов в процессе микроэлектрофореэа определяют минимальный ток—
Т „„смещения 10 ядер и ядрышек и по изменениям показателя Т. „„судят о степени повреждения и о различии в устойчивости объектов к экстремальным во з дей ст виям. 20
Объектами оценки повреждения являются клетки человека, растений, животных
Способ осуществляется следующим образом, Для анализа берут соскоб клеток эпителия внутренней поверхности щеки, наносят его на покровное стекло с добавлением одной капли воды и накрывают вторым покровным стеклом. Все дальнейшие исследования провбдят in
vitro. Пробы клеток буквального эпи. телия, заключенные между двумя пок ровными стеклами, подвергают действию ! высокой температуры для чего помещаУ
35 ют их во влажную камеру и погружают в водный термостат (или облучают их гамма-лучами Со, или подвергают их бо действию УФ-излучения) . Далее препа рат помещают в камеру для микроэлект-4 рофореза, представляющую собой предметное стекло, на котором на расстоянии 20 мм друг от друга укреплены платиновые электроды. Камеру устанавливают под объективом микроскопа
МБИ-3 наблюдение ведут при увеличении х 400. Выводы электродов камеры подключают к прибору для электрофореза и включают прибор. Плавно увеличиВ ая TQK определяют минимальный ток
I «, при котором 10 клеточных
50 ядер или ядрышек начинают смещаться, Пример 1. Клетки буккального эпителия человека, двух доноров воз-
55 раста 20 лет и 40 лет прогревают в о течение 20 мин при 70 С. До прогрева минималь п. и ток смещения клеточных ядер со ст авля ет для перво го донора 70 мкА, для второго 100 мкА. После прогрева I „„ — 140 мкА и 190 мкА.
Пример 2. Клетки буккального эпителия тех же доноров подвергают
60 облучению гамма-лучами Со мощностью
8 мкр/с. В контроле I „„20-летнего донора 70 мкА, 40-летнего 100 мкА.
При экспозиции 1 мин минимальный ток смещения после облучения у первого донора составляет 240 мкА, у второго
310 мкА, при экспозиции 10 мин.
I у первого донора 420 мкА, у второго 500 мкА.
Пример 3. Эпидермис 7-дневных проростков гороха берут на расстоянии
10 мм от меристемы стебля. Определяют минимальный ток смещения ядрьппек в ядрах клеток эпидермиса до и после
20-минутного прогрева. проростков при о
40 и 42 С в водном термостате. До прогрева минимальный ток смещения ядрышек составлял 150 мкА; после прогрева — 340 мкА и 420 мкА.
Пример 4. Проростки гороха подвергают облучению гамма-лучами
Со мощностью 8 мкр/с. В контроле
I 150 мкА. При экспозиции 1 мин минимапьный ток смещения после облучения составляет 290 мкА, при экспозиции 10 мин и 60 мин 380 мкА и
460 мкА.Пример 5. Проростки гороха подвергают облучению УФ-лучами.. Источник излучения — лампа ПРК-2, мощностью 375 Вт, спектр лампы 220—
380 мм, Минимальный ток смещения ядрышек в контроле составляет 120 мкА.
При экспозиции 1 мин Т „„после облучения составляет 280 мкА, при экспозиции 5 мин и 10 мин — 420 мкА и
670 мкА.
Пример 6. Минимальный ток смещения клеточных ядер слюнных желез дрозофилы определяют и норме и после прогрева в термостате при 37
D и 40 С в течение 20 мин. До прогрева минимальный ток смещения ядер слюнных желез дрозофилы составлял
220 мкА, после прогрева — 300 мкА и
340 мкА.
Фор мула изобретения
Способ определения повреждений клеток экстремальным физическим воздействием, включающий микроскопирование до и после воздействия, о т л и ч а ю шийся тем, что, с целью упрощения и ускорения способа, Составитель С.Рыбалкин
Т ехр ед А. Кравчук Корректор М.Демчик
Редактор И. Сегляник.
Заказ 7073/42 Тираж 788 Подписное
ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР
113035, Иосква, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5
Производственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул. Проектная, 4
1451600 а также раннего определения поврежде- рой наблюдается смещение 10 ядер ний, в процессе микроскопирования и/или ядрьппек, и при увеличении ее клетки подвергают электрофорезу, ре- значения после воздействия определягистрируют величину тока, при кото- ют повреждение.