Способ диагностики амилоидоза, сопровождающегося нефротическим синдромом

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

Изобретение относится к медицине и может быть применено в нефрологии, гематологии, биохимии, патофизиологии для диагностики амилоидоза при заболеваниях почек. Цель изобретения снижение травматичности, упрощение и ускорение способа. Способ заключается в том, что определяют активность активатора плазминогена в эуглобулиновой фракции крови и при ее величине 62 мм<SP POS="POST">2</SP> и более диагностируют заболевание. Точность способа 92%.

СОЮЗ СОВЕТСНИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК с51) 4 G 01 N 33/68

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Н АBTOPCKOMY СВИДЕТЕЛЬСТВУ

/ ,1.

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТНРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР (21) 4313425/28-14 (22) 31.07.87 (46) 30.04.89. Бюл. N 16 (71) МГУ им. М,В. Ломоносова (72) Г.В ° Андреенко, Л.В. Подорольская и Л.P. Полянцева (53) 612.0)5 (088.8) (56) Труды 1 MMH им. И.М. Сеченова, 1975, т. 83, с. 105-106. (54) СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ АМИПОИПОЗА, СОПРОВОЖДАЮЩЕГОСЯ НВФРОТИЧЕСКИМ

СИНДРОМОМ

Изобретение относится к медицине и может бйть использовано для диагностики амилоидоза, сопровождающегося нефротическим синдромом.

Цель изобретения — снижение транматичности, упрощение и ускорение способа:за счет определения активности активатора плаэминогена, содержащегося в эуглобулиновой фракции плазмы по методу Аструпа, Мюллертца.

Жособ осуществляюТ следующим образом.

К 0,4 мл плазмы крови добавляют

8 мл дистиллированной воды, подкисленной до рН 5,3, смесь центрифугируют при ?000 об ./мин в течение 10 мин, затем отделяют осадок и добавляют к нему 0,4 мл боратного раствора, 00 держащего 0,5%-ный тетраборат Ма и

4,5%-ный хлористый Na, и 0,03 мл полученной смеси наносят на фибриновую пластину, приготовленную из

0,3%-ного раствора фибриногена.

„„Я0„„1476387 А1 (57) Изобретение относится к медицине и может быть применено к нефрологии, гематологии, биохимии, патофизиологии для диагностики амилоидоза при заболеваниях почек. Цель изобретения . — снижение травматичности, упрощение и ускорение способа. Способ заключается в там, что определяют активность активатора плаэминогена . в эуглобулиновой фракции крови и при ее величине 62 мм и более диагностируют заболевание, Точность способа 92%.

0,03 мл этой же смеси наносят на прогретую при 86 С н течение 30 мин фибриновую пластину, обе пластины а инкубируют при 37 C в течение 18 ч и определяют зоны лизиса как произведение двух взаимно перпендикулярных диаметров, Разность между зонами лизиса на прогретой и непрогретой фибриноных пластинах характеризует активность активатора плазминогена.

Увеличение ее от 62 MM и более сви2 детельствуют о том, что нефротический синдром обусловлен амилоидоэом, в то время как при нефротическом синдроме, обусловленном хроническим гломерулонефритом, уровень активатор ра плазминогена не вьппе 20 мм

Пример 1. Больной Ч., 20 лет.

С 2-летнего возраста страдает хронической пневмонией с бронхоэктазами и частыми обострениями (ежегодно лечился антибиотиками), н течение последнего года стали появляться отеки

1476387 лица и голеней. стоп. В моче появился белок до 3,3 . К моменту поступления в клинику протеинурия достигла 6-8, .Поступил с развернутой карти- 5 ной нефротического синдрома (отеки, суточная протеинурия 6,9 г, общий белок крови 4,9, альбумин 1,8%, олестерин 405 Mr ).для уточнения диагноза нефропатии. У больного была взята кровь из вены для определения в плазме содержания активатора плазминогена. Ход определения следующий.

К 0,4 мл плазмы добавляют 8 мл дистиллированной воды, подкисленной до 15

РН 5,3, центрифугируют, к полученному осадку приливают 0,4 мл боратного раствора, содержащего 0,5 -ный раствор тетрабората Na и 4,5 -ный раствор хлористого натрия. 0,03 мл полу- 2Р ченной суспензии наносят на стандартную фибриновую пластину, приготовлен" ную из 0,3 .-ного раствора фибриногена, 0,03 мл суспензии наносят на прогретую при 86 С в течение 30 мин 25 стандартную пластину. Через 18 ч инкубации обеих пластин в термостате при 37 С определяют эоны лизиса как произведение двух взаимно перпенди,кулярных диаметров. Активность актива-3р тора плазминогена оценивают как разность между зонами на непрогретой и прогретой пластинах.

У больного Ч. установлено содерй жание активатора плазминогена 110 мм при норме 5-18 мм . На основании

2 резко повышенного уровня активатора плазминогена был поставлен диагноз вторичного амилоидоза. При гистологическом исследовании биоптата поч- 4р ки обнаружено отложение амилоида по ходу базальнои мембраны капиллярных

l, петель клуб очков почки, что подтв ердило диагноз.

Пример 2. Больная И., 37 лет, 45 в течение двух лет, когда появились

1 и стали нарастать отеки тела, протеинурия с 0,66 до 3,3./.a, слабость в ногах, анемия (гемоглобин 64 ) лечилась с диагнозом хронический гломе- 5Р рулонефрит безуспешно, Поступила с клиникой Разя ернутого нефро тич еского синдрома (отеки, протеинурия 6, 2/„, общий белок крови 5,2 г .), альбумин

2,9 г ., холестерин 565 мг,) для уточ- 5 нения диагноза нефропатии.

У больной била взята кровь из вены, осуществлены операции, аналогичные примеру 1, установлено содержание активатора плазминогена 62 мм

z при норме до 18 мм . На основании повышенного содержания в плазме крови активатора плазминогена поставлен диагноз первичного амилоидоза. Через 1,5 r, произведена биопсия почки.

В биоптате гистологически выявлено отложение амилоида в стенке капиллярных петель клубочка, что подтвердило диагноз.

Пример 3. Больной E., 39 лет, с 10-летнего возраста страдает периодической болезнью (торако-абдоминально-суставная форма). В течение последних 4 лет отмечает появлению отеков, белок в моче до 1 /„,снижение гемоглобина до .50 ед., Поступил для уточнения диагноза нефропатии с клинической картиной синдрома (отеки степени анасарки, протеинурия до

25 г/сут, альбумин 2,4 г ., холестерин 320 мг ). Одновременно выявлены признаки хронической почечной недостаточности (азот мочевины 70 мг ., креатинин 10,6 мг%, клубочковая фильтрация 6 мл/мин). Установлено, что содержание активатора плазминогена в плазме крови методом, приведенным в примере 1 „ повышено до 65 мм на основании чего поставлен диагноз амилоидоза. При морфологическом исследовании биоптата десны выявлен амилоид, что подтвердило диагноз.

Предлагаемый способ по сравнению с прототипом имеет следукщие преимущества.

1. Точность предлагаемого способа не уступает таковой в прототипе. Она обусловлена тем, что фермент активатор плазминогена располагается в самом поверхностном внутреннем слое кровеносного сосуда - в эндотелии.

Поэтому субэндотелиальное отложение амилоида, свойственное амилоидозу, раздражая эндотелиальный слой, приводит к. освобождению ферментов эндотелия, в том числе активатора плазминогена, что вызывает резкое возрастание его активности в крови, регистрируемое методом Аструпа, Мюплертца.

Способ позволяет диагностировать амилоидоз у больных с нефротическим синдромом в 92, случаев, в то время как исследование биоптатов прямой кишки дает 80% правильных результа", тов, а десны — 30%.

14763

Составитель А.Агуреев

Редактор М.Петрова Техред Л.Олийнык Корректор М.Самборская

3 аказ 2150/45 Тираж 790 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г.ужгород, ул. Гагарина, 101

2. Нетравматичность способа. Отсутствуют необходимость взятия биоптата и нанесения при этом раны, что может привести к осложнениям в виде кровоточивости или тромбоза у больного.

3. Простота способа..Способ-прототип предполагает морфологическое исследование биоптата, микроскопичес- 10 кое изучение тканей, что удлиняет и усложняет процедуру. Предлагаемый способ представляет чисто биохимическое определение активности фермента активатора плазминогена, где продукт реакции оценивается визуально.

87 6

Формула из обре те ния

Способ диагностики амилоицоза, сопровождающегося нефротическим синдромом, путем исследования биологического материала, включающего определение уровня маркерного белка, о т— лич ающий ся тем, что, с целью снижения травматичности, упрощения и ускорения способа, в качестве биологического материала используют, эуглобулиновую фракцию плазмы крови, в которой определяют активность активатора лазминогена, и при ее значении 62 мм и более диагност тируют амилоидоз, сопровождакщийся нефротическим синдромом.