Штамм бактерий lастовасillus асidорнilus, используемый для приготовления бакпрепарата для нормализации микрофлоры при нарушении микробиоценоза влагалища

Штамм бактерий lастовасillus асidорнilus, используемый для приготовления бакпрепарата для нормализации микрофлоры при нарушении микробиоценоза влагалища

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

Изобретение относится к медицинской микробиологии, в частности к производству лечебных препаратов - зубиотиков. Для приготовления бакпрепарата используют штамм бактерий LACTOBACILLUS ACIDOPHILUS ЦМПМ В-3325. Цель изобретения - повышение адгезивной способности бактерий. Повышенная адгезивная способность штамма способствует ускорению нормализации микрофлоры при нарушении микробиоценоза влагалища. 2 табл.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИН (19) (11) 1 5 А1

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К А8ТОРСНОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР (21) 3922964/28-13 (22) 28,06,85 (46) 07.07.89. Бюл. Ф 25 (71) 2-й Московский государственный медицинский институт им.H,È.Пирогова (72) В,M.Коршунов, Н,Н.Володин, H.Ï.Èâàíîâà, Л,И.Кафарская и Б.В.Пинегин (53) 615.371 (088,8) (56) Тарасова Н.Б., Соколова К,Я.

Новый препарат лактобактерин для профилактики и лечения дисбактериозов кишечника. — В кн.: Материалы

XI Всесоюзного съезда эпидемиологов, микробиологов и инфекционистов, Тбн.иси, 1970, с.40, Патент США )" 3639666, кл, А 61 Х 3/08, С 12 К 3/08, 1970.

Изобретение относится к медицинской микробиологии, и частности к производству лечебньгх препаратов эубиотиков.

Целью изобретения является повышение адгеэивной способности бактерий, входящих в состав бакпрепарата.

Штамм бактерий 1.ассоЬасдllus acidophiIus получен из исходного штамма АЛ-28 путем селекции, Штамм депонирован в центральном Музее промышледных микроорганизмов института чВНИИгенетика под номером ЦМПМ

В-3325 и характеризуется следующими признаками, Культурально-морф«логические признаки. Клетки палочков»дной формы, длинные и тонкие, неспорообраэую(цие, (61) 4 С 12 N 1/20, А 61 К 31/47//

//(С 12 N 1/20, С 12 К 1:23) 2 (5u) ШТАММ БАКТЕPHA LACTOBACILLUS

АСIDOPHILUS ° ИСПОЛЬЗУЕМЬ1Й ДЛЯ ПРИГОТОВЛЕНИЯ БАКПРЕПАРАТА ДЛЯ НОРМАЛИЗАЦИИ М11КРОФЛОРЫ ПРИ НАРУШЕНИИ МИКРОБИОПЕНОЗА ВЛ тАЛИ)ЦА (57) Изобретение относится к медицинской микробиолс гии, в частности к производств. лечебных препаратов убиотиков. Для приготовления бакпрепарата испсчьэуют штамм бактерий

Lactobacillus a<:idophi1us ЦМПМ В-3325.

1 „ель изобретения — повышение адгезиви 1й способности бактерий. Повышенная а,;гезивная способность штамма способ=твует ускорению нормализации микрофчорн при нарушении микробиоценоэа ф влагалища. 2 табл, грампо(ожителт ные, располагаются беспорялочно. На плотной среде MPC образуют круглые колонии, профиль выпуклый, белые, гомогенные, легко снимаются петлей с поверхности агара, края ровные, непрозрачные, без блеска.

Пигмента не образует, В жидкой среде

МРС растет диффузно по всей пробирке (кроме зоны аэробиоза в верхних слоях питательной среды), на дне образуется осадок, легко разбивающийся при встря- хивании.

Обезжиренное молоко — на вторые сутки после посева молоко свертывается с образованием плотного сгустка и отделением сыворотки, На жидкой синтетической среде H,Haenel в виде равномерного помутнения и небольшого

1491885

2 г

200 мг

200 мг

2 г

5 г

20 r

37,9 г

10,0 г

К<НРО<

NgS0, Цистеин (HC1)

Цитрат аммония

Ацетат натрия

Глюкоза

Мп804

Пептон

Лрожженой автовизат (Di1 >) 50

5,0 r осадка; количество жизнеспособных

5 8 клеток при этом достигает 10 — 10 кл. /

/мл. Первые пассажи штамма дают обильный рост на жидкой среде Блаурокка для 5 бифидобактерий; в последующих пересевах рост штамма может истощаться. В полужидком (0,7K) агаре Блаурокка (при посеве в пробирки с 9 мп среды) образует слегка выпуклые дисковидные 1р колонии.

Физиолого-биохимические свойстна.

Анаэробны, на твердой среде растут после замены воздуха СО . Максимальный рост при 37 5 С. Оптимум рН 6,2- 15

6,4.

Сбраживает сахарозу, мальтозу, галактоэу, фруктоэу, лактоэу, раффинозу; не сбраживает ликсоэу, ксилозу, маннит, рамноэу, дульцит, цитруллин, 20 рибоэу, сорбит, Кислотообразование при выращивании в обезжиренном молоке 90 Т (по о Г ер неру) .

Лабораторная проверка показала 25 непатогенность L,acidophilus А-4 для экспериментальных животных и людей.

Пример 1, Штамм лактобактерий выращивают на жидкой среде MPC (pH 6,2-6,4) в течение 36 ч в термо- 30 стате в бактериологических пробирках, содержащих не менее 0-10,мп среды. о

Оптимальная температура 37,5 С. Посевная дозы 1 мл 36-часовой культуры, После этого взвесь микроорганизмов 5 центрифугируют при 300 об/мин в течение 15 мин. Осадок ресуспендируют в консерванте и полученную смесь разливают по ампулам,а затем подвергают лиофильному высушиванию.

Консервант — СЖ, содержащий 10Х сахарозы и 1Х желатина, рН 6,0.

После лиофильного высушивания в одной ампуле, содержащей 1 дозу препарата, должно содержаться не менее 45

10 жизнеспособных .клеток.

Состав среды МРС для выращивания лактобактерий:

Печен< вый

100,0 мл

1,0 мл отвар

Твин-80

Дистиллированная вода Ло 500,0 мл

Гидролиэат молока 500,0 мл рН 6,2

Стерилизация 20 мин при 0,5 атм.

На основе лиофильно высушенного препарата могут быть приготовлены вагинальные свечи.

Биомассу бактерий, содержащую

3 10 клеток, смешивают с 30 r масла какао и 2,0 r ланолина. Полученную гомогенную массу раскатывают и выкладывают в специальный металлический дозатор, с помощью которого из исходного количества биомассы может быть получено 30 свечей. Свечи хранят в целлофановых обертках н холодильнике, Кроме того, препарат можно применять

per vaginum с помощью тампонов или инстиляций. Содержимое ампулы при этом разводят 1-2 мл кипяченой или дистиллированной воды, а также физиологическим раствором.

Пример 2. Изучение влияния лактобактерий на нормализацию нагинальной микрофлоры у женщин.

Поц наблюдением находилось 16 женцин различного возраста с вагинальным дисбактериозом: уровень лактобактерий составлял от 10 до менее 102 кл./

/г, В то же время количество стафилококков составляло 10 -10 кл./г, дрок6 7 жей 1Ñ -10 кл. /г и энтеробактерий

4 5

10З кл./r 8 женщин получали Местно ежедневно в течение 10 дней по 1> ю 10 кл./г L,acidophilus Другие 8

9 женщин бактерийный препарат не получали. На 12-й день после начала лечения у женщин, получавших .Ь. асidophi1us, количество лактобактерий повысилось до 10 -10 кл./г (т,е. в 10 раз

7 8 5 и более). Число стафилококков, дрожжей и энтеробактерий, наоборот, снизилось в 100, 10 и 1О раз соответственно. У женщин, не получавших местно в процессе лечения L.auidophilus, выраженность вагинального дисбактериоэа н этот период наблюдения сохранялась на прежнем уровне.

Результаты приведены в табл.1 и 2.

Формула и з о б р е т е н и я

Штамм бактерий Lactobauillus acidophilus ЦМПМ В-3325 (Центральный Музей промышленных микроорганизмов институ»

1491885 е та "ВНИИгенетика"), используемый дня лизации микрофлоры при нарушении микприготовления бакпрепарата для норма- робиоценоза влагалища.

Т а 6 л и ц а 1

ИинимальЗона задержки роста на твердой среде,мм

Тест штамма

Антибиотик

Штамм

L. f ermentum (известный) Штамм

L. aeidophilus

А-4

16

1 6

50000

1000

Невиграмон

Гентамицин

Канамицин

Левомицетин

13

13

10000

0,5

0,5

Полимиксин

Линкомицин

Алепиокс

Ампицилин

Таблица2

Показатели адгезивности

Штамм лактобактерий

Эритроциты I гр, крови человека

Эпителиоциты из вл а г ал ища женщины ндекс фб дгеИндекс адгеэивности

Степень адгеэивности зивности

5,2

2,1

9,0

19,7

8,8

49,2

3,5

1э7

19,0

Степень адгеэивности — процент клеток (эритроцитов эпителиоцитов), на которых находились две и более лактобактерии. бб

Индекс адгезивности — среднее число лактобактерий на 1 клетку (эритроцит или эпителиоцит), взаимодействующую с лактобактериями, ные ингибирующие концентрации, мкг/мл, ед/мл

Исходный

L,acidophilus Ал-28

Штамм L. aci"

dophilus

ЦМПИ 8-3325

Штамм L.fermentum (известный) Е,coll 0

S,dublen С96

Kl.pneumoniae К 412

Pr,mirabilis 771

Staph,a1bus