Краситель для флуоресцентной микроскопии бактериальных клеток, осажденных на мембранном фильтре

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

Изобретение относится к микробиологической, фармацевтической и электронной промышленности. Цель изобретения - увеличение контрастности изображения бактериальных клеток в свете люминесценции в процессе микроскопирования. Краситель для флуоресцентной микроскопии клеток, осажденных на мембранном фильтре , содержит черную тушь, воду, многоатомный спирт и неионогенное поверхностно-активное вещество (ПАВ) при следующих соотношениях компонентов, мас.с.: черная тушь 1-1,5

вода 1-1,5

спирт 1-3

неионогенное ПАВ 0,058-0,13. В качестве неионогенного ПАВ краситель включает октилфеноксиполиэтоксиэтанол, октилполиэтоксиэтанол, феноксиполиэтоксиэтанол, а в качестве многоатомного спирта - глицерин, этиленгликоль, пропиленгликоль. Краситель дополнительно может содержать флуорохром для нуклеиновых кислот клеток в концентрации 10<SP POS="POST">-3</SP>-10<SP POS="POST">-4</SP> мас.ч. 3 з.п. ф-лы.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИК

А1 (19) (11) (51)4 (; 2 1 04

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К А BTOPCKOMY СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТНРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР (21) 4299296/30-13 (22) 21.05.87 (46) 15.07.89. Ыюл. Р 26 (72) (;.Ê.Êóýüìèí, Н.В.Чайка и С.М.Ыеэручко (53) 668.8 (088.8) (56) Утевский Н.Л. Микробиология с техникой микробиологических исследований. М.: Медицина, 1965, с.49.

Ыольшой практикум по микробиологии./Под ред. Г.С.Селибер.

Высшая школа, 1962, с.64. (54) КРАСИТЕ)1Ь ЛЛУ ФЛУОРЕСЦЕНТНОЙ

МИКРОСКОПИИ ЫАКТЕРИАЛЫП Ж КЛЕТОК, ОСАХ(ДЕ11НЬЛ НА МЕМЫРАННОМ ФИЛЬТРЕ (57) Изобретение относится к микробиологической, фармацевтической.и электронной промышленности. Цель изобретения — увеличение контрастI

Изобретение относится к технике микробиологических исследований, а именно к люминесцентной микроскопии, и может быть применено в фармацевтической, микробиологической, электронной промышленности и мониторинге окружающей среды.

Цель изобретения — увеличение контрастности изображения клеток в свете люминесценции.

Указанная цель достигается путем добавления к красителю неионогенногс поверхностно-активного вещества и многоатомного спирта.

ll р и м е р 1. Состав красителя для мембранных фильтров из смеси

2 ности иэображения бактериальных клеток в свете люминесценции в процессе микроскопирования. Краситель для флуоресцентной микроскопии клеток, осажденных на мембранном фильтре, содержит черную тушь, воду, многоатомный спирт и неионогенное поверхностно активное вещество (ПАВ) при следующих соотношениях компонентов, мас.ч.: тушь 1-1,5; вода 1- 1,5; спирт 1-3; неионогенное ПАВ 0,0580,13. В качестве неионогенного ПАВ краситель включает октилфеноксиполиэтоксиэтанол, октилполиэтоксиэтанол, феноксиполиэтоксиэтанол, а в качестве многоатомного спирта — глицерин, этиленглнколь, пропиленгликоль. Краситель дополнительно может содержать флуорохром для нуклеиновых кислот

-3 -4 клеток в концентрации 10 -10 мас.ч °

3 з и, ф лы, эфиров целлюлозы фирмы "Миллипор, мас.ч. диаметр пор 0,2 мкм — тушь-1, вода-1, синтанол0,128, глицерин-2; диаметр пор 0,45 мкм — тушь-1, вода,1, синтанол-0,08, глицерин-2; тушь-1, вода,1, синтанол-0,08; глицерин-3 ° тушь-1,5, вода-1,5, сннта-0,08, raHцерин-1; тушь-1, 1493673 частицы на черном фоне. При окрашивании клеток красителем, содержащим флуорохром, клетки приобретают специфическую окраску и могут быть легко отличимы от примесных частиц, не окрашивающихся флуорохромом.

Формула изобретения

Составитель Н.Костюнима

Техред A.Кравчук Корректор М.Демчик

Редактор М.Товтин

Заказ 4067/28 Тираж 500 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г.ужгород, ул. Гагарина,101 вода-1, синтанол-0,08, пропиленгликоль-2; тушь-1, вода-1, тритонх-1000,08, этиленгликоль-2.

11 р и м е р 2. Состав красителя для мембранных фильтров из .лавсановой пленки, мас.ч.: диаметр пор 0,5мкм — тушь-1, вода-1, синтанол-0,058, глицерин-2; диаметр пор 0,2мкм — тушь-1, вода"1, 15 синтанол-0,088, глицерин-2; тушь-1, вода-1, синтанол-0,088, глицерин-2, эти- 29 диум бромидЭх10 ; тушь-1, вода-1, синтанол-0,088, глицерин-2, акри- 25 диновый оранжевый - Зх10 ; тушь-1, вода-1, феноксиполиэтоксиэтанол-0,088, 30 глицерин-2, акридиновый оранжевый — 3х10

Пример 3. Предлагаемый краситель используют следующим образом.

На предметное стекло капают 4 капли красителя ° Затем на краситель кладут высушенный фильтр с осажденными на нем клетками (стороной с клетками— вверх), выдерживают 20-30 мин и прос- 40 матривают в люминесцентном микроскопе. Клетки наблюдают как светящиеся

1. Краситель для флуоресцентной микроскопии бактериальных клеток, осажденных на мембранном фильтре, включающий черную тушь и воду, о т— л и ч а ю шийся тем, что, с целью увеличения контрастности изображения, краситель дополнительно содержит многоатомный спирт и неионогенное

lIAB при следующем соотношении компонентов, мас.Х:

Черная тушь 1,0-1, 5

Вода 190-1,5

Неионогенное

ПАВ 0,058-0,13

Многоатомный спирт 1,0-3,0

2. Краситель по п.1, о т л и— ч а ю шийся тем, что в качестве неионогенного ПАВ содержит или октилфеноксиполиэтоксиэтанол, или октилполиэтоксиэтанол, или феноксиполиэтоксиэтанол.

3. Краситель по пп.1 и 2, о тл и ч а ю шийся тем, что в качестве многоатомного спирта содержит или глицерин, или этиленгликоль, или пропиленгликоль.

4 ° Краситель по пп.1-3, о т л и— ч а ю шийся тем, что дополнительно содержит флуорохром для нук— 3 леиновых кислот в концентрации 10

10 мас.ч.