Способ неспецифической профилактики кишечных инфекций

Способ неспецифической профилактики кишечных инфекций

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

Изобретение относится к медицине и может быть использовано в профилактике кишечных инфекций бактериальными препаратами. Цель изобретения - снижение побочных эффектов за счет уменьшения токсичности бактериального препарата. Для осуществления способа используют штамм энтерококка STREPTOCOCCUS FAECIUM УДС<SB POS="POST">86</SB> (ВКПМ N В-4054) или S. FAECALIS Н<SB POS="POST">22</SB> (ВКПМ N В-4053). Для профилактики используют убитые культуры. Препарат вводят перорально по схеме: 1 раз в сутки в течение 5-7 дней в дозе 2<SP POS="POST">.</SP>10<SP POS="POST">11</SP>-5<SP POS="POST">.</SP>10<SP POS="POST">11</SP> микр.тел / кг массы. Токсических и других нежелательных проявлений при приеме препарата не выявлено, в то же время отмечено увеличение активности фагоцитов периферической крови.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (19) (И) (51) 4 А 61 К 35 74

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

1 (21) 4339546/28-13; 43723?4/28-13 (22) 09.12„87 (46) 23.07.89.Бюл. 1(- 27 (71) 2-й Московский государственный медицинский институт им. Н.И.Пирогова (72) В„M.Коршунов, Н.Н„Мальцева, M.N.Шкарупета, Н.П.Иванова и Б.В.Пинегин (53) 576.8,097 (ОЯЯ.Я) (56) 7.Immunopatholo, 1983, v, Я, N 4, р ° 496-497, (54) СПОСОБ НЕСПЕЦИФИЧЕСКОЙ ПРОФИЛАКТИКИ КИШЕЧНЫХ ИНФЕКЦИЙ (57) Изобрете ие относится к медицине и может быть использовано в профилактике кишечных инфекций бактеИзобретение относится к медицине и может быть использовано в профилактике кишечных инфекций бактериальными препаратами.

Цель изобретения — снижение побочных эффектов за счет уменьшения ток-сичности бактериального препарата, Для осуществления способа используют штамм Streptococcus faecium

УДС, депонированный под номером

ВКПМ 1(- В-4054, или Streptococcus faeca1is Н, депонированный под номером ВКПМ М В-4053, которые характеризуются следующими признаками, Штамм Streptococcus Гаес11ип УДСяб выделен иэ кишечника здорового человека.

Культурально-морфологические признаки.

2 риальными препаратами. Цель изобретения — снижение побочных эффектов за счет уменьшения токсичности бактериального препарата. Для осуществления способа используют штамм энтерококка Streptococcus faecium УДС а (ВКПМ )11 В-4054) или S.faccalis H (ВКПМ У В-4053), Для профилактики используют убитые культуры. Препарат вводят перорально по схеме: 1 pas в сутки в течение 5-7 дней в дозе 2 х

11 11 х 10 — S x 10 микр,тел/кг массы.

Токсических и других нежелательньпс проявлений при приеме препарата не выявлено, в то же время отмечено увеличение активности фагоцитов периферической крови„

Клетки кокковидной формы, располагаются в мазке попарно или короткими цепочками, грамположительны, спор и капсул не образуют, При росте в жидкой среде дают равномерное помутнение и осадок. На плотной, среде растут в виде непрозрачных сероватых колоний с ровными краями диаметром

1-2 мм„ Колонии легко снимаются с агара, равномерно змульгируются физиологическим раствором хлористого натрия„ На среде Калины растет в виде голубых непрозрачных колоний с ровными краями.

Физиолого-биохимические признаки.

Аэроб при культивировании в жидо кой среде при 37 С через 18-20 ч после посева в 1 мл среды вырастает

5x)0 — 1xl0 живых клеток. По мере

1494907

Физиолого-биохимические признаки.

Аэроб при культивировании в жидкой среде при 37 С через 18-20 ч пос- 45 ле посева в 1 мл среды вырастает

5x10 — 1,0xl0 живых клеток, По иере роста культуры снижается рН среды, кислотность по Тернеру за 24 ч культивирования достигает 250 о

260 Т. Штамм Н, сбраживает мальтозу, целлюлозу, сорбит, сахарозу, лактозу, маннит, салицин; не сбраживает арабинозу, рафинозу, рамнозу, глицерин, ксилозу, инозит, дульцит.

Не дает гемолиза при росте на кровяном агаре„. Штамм хорошо растет на средах с добавлением желчи„

Антагонис тические свойства„

50 роста культуры снижается рН среды, кислотность по Тернеру за 24 ч кульо тивирования достигает 250 — 270 Т.

Сбраживает мальтозу, целлобиозу,сахарозу, лактозу, маннит, салицин, маннозу, L-арабинозу; не сбраживает

D-арабинозу, сорбит, рафинозу,рамнозу, глицерин, ксилозу, инозит,дульцит, Штамм хорошо растет на средах 10 с добавлением желчи. Не дает гемолиза при росте на кровяном агаре.

Антагонистические свойства„

Штамм обладает антагонистической активностью по отношению к стафило- 15 кокку Klebsiella, Езсherichia coli

0„,, Salmonellа dublin, Shipellа

zonnae,,Proteus mirabilis.

Лабораторная проверка показала непатогенность штамма S. aecium УДС 20 для экспериментальных животных (мыmeA крыс, морских свинок), а также для людей.

Штамм Streptococcus faecalis Н выделен из кишечника здорового человека.

Культурально-морфологические признаки.

Клетки кокковидной формы, в мазке расположены попарно или короткими 30 цепочками, грамположительны, спор и капсул не образуют. При росте в жидкой среде образует рыхлый осадок и помутнение. На плотной среде растет в виде сероватых колоний с ровными краями диаметром 0,5-?,0 мм. Колонии легко снимаются с агара, равномерно эмульгируются н физиологическом растворе хлористого натрия, На среде

Калины растет в виде темно-красных 40 колоний с ровными краями.

Штамм обладает антагонической активностью по отношеHHlo к стафилококку Е.coli Оцi, Л.dublin, Sh.zon-.

nae, P.mirabilis.

Лабораторная проверка показала непатогенность штамма $.faecalis

Н для экспериментальных животных (мьппей, крыс, морских свинок), а также для людей.

Пример 1. Профилактика сальмонеллезной инфекции.

Беспородным мьппам весом 18-20 r вводят перорально убитые нагреванием энтерококки S.faecium УДС 6 в дозе 5xlO микр.тел (2,5 х 10" микр. тел/кг массы) на мьппь в сутки. Контрольной группе мышей вводят стерильный физиологический раствор. На

10-й день от начала эксперимента обе группы мышей заражают 10DCL Salmonella dublin перорально. Об эффективности защиты судят по выживаемости опытных и контрольных мьппей в течение 25 дн. после заражения штаммом сальмонелл.

В контрольной группе гибель 100Х мышей наблюдалась на 9-й день после заражения, в опытной группе выживаемость животных на этот срок 257..Данные эксперимента показывают, что пероральное введение убитых энтерококков перед заражением мьпней

lODCL S.dublin увеличивает процент выживаемости мьппей при экспериментальной сальмонеллезной инфекции.

Л р и м е р 2. Влияние препарата убитых S.faecium УДС на фагоцитарную активность лейкоцитов периферической крови человека.

Практически здоровому. человеку вводят препарат убитых энтерококков

S. aecium УДСВ s виде взве и в физиологическом растворе ежедневно, 1 раз в сутки, за 30 мин до еды в течение 6 дн. в дозе 5х10 микр. л тел/кг массы тела, В ходе эксперимента параллельно оценивают токсичность препарата: наличие диспептических расстройств, аллергических или токсических проявлений, лихорадки. Показатели оценивают на 0- и 10-й день от начала эксперимента. Активность фагоцитов периферической крови оценивают методом люминолзависимой хемилюминесценции, отмечено статически достоверное (p (О, 01 ) увеличение активности фагоцитов при приеме препарата убитых энтерококков на 10-й

10

5 14 день от начала эксперимента по сравнению с фоновым уровнем. Прием препарата не сопровождается аллергичес1 кими, диспептическими или токсическими проявлениями; температура тела и общее самочувствие остается нормальным на всем прот*жении эксперимента..

Таким образом, препарат убитых энтерококков S.faecium УДС8 обладает выраженным стимулируняцим эффектом на фагоцитарную активность лейкоцитов периферической крови человека. Прием препарата не сопровождается токсическими и другими нежелательными проявлениями.

Пример 3. Способ осуществляют в соответствии с примером 1, но в качестве бактериологического препарата используют взвесь убитых стрептококков $.faecalis Н в дозе 2,5х10 и микр.тел/кг массы.

Гибель 100Х мьппей в контрольной группе — на 9-й день после заражения, в опытной группе выживаемость мьппей на этот срок 41,7Х.

Таким образом, перорально введение убитых энтерококков штамма

Б. faecalis Н увеличивает процент выживаемости мьппей.

При сравнительных исследовании препаратов убитых энтерококков

S. Гaec ium УЧС 8< и липополисахарида (ЛПС) E.coli 055:В5 (прототип) установлено: среднее содержание иммуноглобулинсинтезирующих клеток в

1 мм lamina propria тонкой кишки мышей, получавших препарат убиТых энтерококков, равно 3472+ 81, в группе MbrmeA, получавших препарат

ЛПС 055:Â5, — 2626 -154, в контрольной группе животных — 2124 + 101 клеток в 1 мм

При анализе достоверности различий в содержании иммуноглобулинсинтезирующих клеток между группами животных выявлены следующие закономерности: уровень иммуноглобулинпродуцентов в тонкой кишке мьппей,получавших энтерококки, достоверно вьппе (р с0,01) аналогично показателя в группе мышей, получавших ЛПС Е.coli

055:В5 и животных контрольной группы (P (0,001), Аналогичные результаты получены при исследовании препарата убитых

94907 6 энтерококков .. "aecalis Н „: опытная группа — 3! 22<249 иммуноглобулинсинтезирующих клеток в 1 мм тонкой кишки, группа, получавшая ЛПС, ?533,2 125 клеток, контрольная группа 2112 - 34 клеток

Полученные данные подтверждают более высокий защитный эффект используемых препаратов по сравнению с известным.

Пример 4. Изучение стимули" рующего действия препарата убитых энтерококков S.Гаеса1iв Н проводят в соответствии с примером 2.

Отмечено статистически достоверное увеличение активности фагоцитов периферической крови при приеме препарата. Повышение температуры тела, диспептические, аллергические или другие нежелательные проявления не набпюдаются.

Таким образом, использование способа позволяет эффективно стимулировать общую антиинфекционную резистентность, местный иммунитет и фагоцитоз, не оказывая при этом токсичсского воздействия на организм в отличие от прототипа — ЛПС E.coli

055:В5.

Использование способа позволит снизить заболеваемость этой распространенной группой заболеваний и улучшить прогноз кишечных инфекций. Bosможно применение препарата убитых энтерококков у широкого круга амбулаторных больных из групп риска sadoлевания кишечными инфекциями, Формула и з о б р е т е н и я

Способ неспецифической профилактики кишечных инфекций путем перорального введения бактериального препарата, отличающийся тем, что, с целью снижения побочных эффектов sa счет уменьшения токсичности бактериального препарата, в качестве бактериального препарата используют инактивированный штамм

Streptococcus faecium ВКПМ У В-4054 или Streptococcus faecalis ВКПМ

У В-4053, препарат вводят один pas в су ки в течение 5-7 дней в дозе

2х10 - 5x10 микр.тел/кг массы.