Способ количественного определения флавоноидов в растительном сырье

Способ количественного определения флавоноидов в растительном сырье

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

Изобретение относится к фармации, а именно к фармацевтической химии, и может быть использовано для количественного определения флавоноидов в лекарственном растительном сырье. Цель изобретения - сокращение числа операций и времени анализа. Точную навеску лекарственного растительного сырья кипятят 20-30 мин с 30%-70%-ным спиртом при соотношении 1:(100-200) в колбе с обратным холодильником, охлаждают, доводят до первоначальной массы соответствующим спиртом, профильтрованную аликвотную часть экстракта обрабатывают алюминия хлоридом в 70%-ном спирте и измеряют при аналитической длине волны 410-415 нм оптическую плотность раствора на спектрофотометре на фоне пробы, не обработанной алюминия хлоридом, а подкисленной уксусной кислотой. Параллельно в тех же условиях проводят опыт с 1,5 мл 0,1%-ного раствора рутина. Расчет содержания флавоноидов в сырье осуществляют по формуле, приведенной в описании.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК

А1

„„SU„„1507 (р 4 А 61 K 35/78

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Н АBTOPCKCNY СВИ4ЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТНРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР (21) 4301201/28-14 (22) 25.08.87 (46) 15.09.89. Бюл. И- 34 (71) Всесоюзный научно-исследовательский институт химии и технологии лекарственных средств (72) В.В. Беликов и Н.Т. Колесник (53) 615.32 (088.8)

I (56) Romisch Die Pharmazie, 1960, Ф 1, 33. (54) СПОСОБ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ ФЛАВОНОИДОВ В РАСТИТЕЛЬНОМ СЫРЬЕ (57) Изобретение относится к фармации, а именно к фармацевтической химии,. и может быть использовано для количественного определения флавоноидов в лекарственном растительном сырье.

Цель изобретения — сокращение числа

Изобретение относится к медицине, а именно к фармацевтической химии, и может быть использовано для количественного определения флавоноидов в лекарственном растительном сырье.

Цель изобретения — сокращение числа операций и времени.

Сущность предлагаемого способа состоит в быстрой экстракции флавоноидов из растительного материала большим (не менее чем 100-кратным) избытком кипящего 30-70% водного раствора спирта, проведении реакции комплексообразования с хлоридом алюминия и спектрофотометрировании на фоне пробы, подкисленной уксусной кислотой. Такой способ спектрофотомет2 операций и времени анализа. Точную навеску лекарственного растительного сырья кипятят 20-30 мин с 30-70Х-ным спиртом при соотношении 1:(!00-200) в колбе с обратным холодильником,охлаждают, доводят до первоначальной массы соответствующим спиртом,профильтрованную аликвотную часть экстракта обрабатывают хлоридом алюминия в 707-ном спирте и измеряют при аналитической длине волны 410-415 нм оптическую плотность раствора на спектрофотометре на фоне пробы, не обработанной хлоридом алюминия, а подкисленной уксусной кислотой. Параллельно .в тех же условиях проводят опыт с с

1, 5 мл О, 17-ного раствора рутина.Расчет содервания фдавоноидов в сырье Щ осуществляют по формуле, приведенной в описании. рирования поЗволяет получать более точные результаты анализа, так как при этом исключается поглощение сопутствующих окрашенных веществ растений. Контрольную пробу подкисляют уксусной кислотой для переведения флавоноидов и сопутствующих нм веществ в недиссоциированную форму с целью улучшения воспроизводимости результатов.

Пример 1. Определение рутина в бутонах софоры японской.

0,5 г (точная масса) измельченного и просеянного сквозь сито с размером отверстий О, 5 мм сырья бутонов софоры японской помещают в колбу со шлифом вместимостью 200 мл, прибав1507394 ляют 100 мл ЗОХ-ного этилового спирта, взвешивают, присоединяют к колбе обратный водяной холодильник, содержимое колбы нагревают 20 мин на кипящей водяной бане, отмечая время с начала кипения, затем колбу отсоединяют, искусственно охлаждают, взвешивают и при необходимости доводят до первоначального веса соответствующим спиртом. В две мерные колбы вместимостью 100 мл помещают по 1 мл экстракта, в одну колбу прибавляют

4 мл 5 .-ного раствора хлорида алюминия, а в другую колбу — 0,1 мл 15

ЗОБ-ной уксусной кислоты, доводят объем в колбах водой до метки, перемешивают и через 10 мин измеряют оптическую плотность раствора с хлоридом алюминия на спектрофотометре 20 в кювете с толщиной слоя 1 см при длине волны 415 нм, применяя в качестве контроля раствор, подкисленный уксусной кислотой.

Параллельно в тех же условиях проводят опыт с 1,5 мл 0,1Х-ного раствора рутина.

Расчет содержания рутина в абсолютно сухом сырье проводят по формуле 30

D1ОО С,,100 ° 100

Х )

D Ч а (100-Ь) где D — - оптическая плотность спектрофотометрируемой пробы анели- 5 зируемого экстракта;

D, — оптическая плотность спектрофотометрируемой пробы раствора рутина;

С вЂ” содержание рутина в спектро40 фотометрируемой пробе в пересчете на сухое вещество,г; а — масса сырья, взятая для экстрагирования, г;

Ь вЂ” влага сырья, 7;

Ч вЂ” объем экстракта, взятого для спектрофотометрирования мл, Пример 2. Определение флавоноидов в листьях скумпии. 50

1 г (точная масса) измельченного и просеянного сквозь сито с размером отверстий 1 мм растительного материала помещают в колбу со шлифом вместимостью 200 мл, прибавляют

100 мл 50Х-ного этилового спирта,взвешивают, присоединяют к колбе обратный водяной холодильник, содержимое колбы нагревают 30 мин на водяной бане, отмечая время с начала кипения, затем колбу отсоединяют, искусственно охлаждают, взвешивают и при необходимости доводят до первоначального веса соответствующим спиртом.

Часть извлечения фильтруют, отбрасывая первые порции фильтрата. В две мерные колбы вместимостью 25 мл помещают по 2, О мл фильтрата, в одну колбу прибавляют 4 мл 57.-ного раствора хлорида алюминия в 70Х-ном спирте, а в другую колбу — 0,1 мл 307-ной уксусной кислоты, доводят объем в колбах 70Х-ным спиртом до метки, перемешивают и через 30 мин измеряют оптическую плотность раствора с хлоридом алюминия на спектрофотометре в кювете с толщиной слоя 1 см при длине волны

415 нм на фоне раствора, подкисленного уксусной кислотой. Параллельно в тех же условиях проводят опыт с

1, 5 мл О, 1Е-ного раствора рутина в

957-ном спирте. Расчет содержания флавоноидов в сырье в пересчете на мирицетин-3-рамноэид, проводят по приведенной в примере 1 формуле, однако, в знаменатель вводят коэффициент

1,27, полученный делением молекулярной массы рутина на молекулярную массу мирицетин-Ç-рамноэида, так как последний является основным компонентом флавоноидов листьев скумпии.

В таблице приведены результаты определения флавоноидов предлагаемым способом в различном растительном сырье.

Предлагаемый способ упрощает количественное определение флавоноидов в растительном сырье эа счет исключения операций упаривания, фильтрации, обработки аликвотной части извлечения четыреххлористым углеродом, уксусной кислотой, пиридином, а также в 1О раз сокращает время проведения анализа.

Формула изобретения

Способ количественного определения фпавоноидов в растительном сырье путем экстракции спиртом, обработки извлечения алюминия хлоридом и фотометрирования, отличающийся. тем, что, с целью сокращения числа операций и времени, экстракцию проводят кипячением в течение 20-30 мин с 30-70Х-ным водным раствором спирта

1507394 6 фоне прооы, подкисленной уксусной кислотой. при соотношении 1:100-200 с последующим спектрофотометрированием на

Растительный материал

Условия экстракции

Параметры спектрофотометрирования

ЭкстраВремя, Объем

1 макс ) нм гент мин

26,5

0,25* 0,5 415 1,00

30%-ный 20

415

1,27

2,0 скумпии

Листья

415 1,27

1,5 сумаха

Листья каштана

70

410 1,40 2,2

1,5

70%-ный спирт 30

410 1,40 0,6

Трава зверобоя

50%-ный спирт 30

1,14

410

5,1

Цветки ромашки

То me 20

2,5

415

1,00

2,0

П р и м е ч а н и е. Соотношение сырье — экстрагент 1:100 °

* По методике берут 1 мл экстракта на 100 мл спектрофотометрируемого раствора.

Составитель С. Фирсова

Техред А.Кравчук Корректор М. Самборская

Редактор Л; Веселовская

Заказ 5481/9 Тираж 643 Подписное ю

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г.Ужгород, ул. Гагарина,101

Бутоны софоры японской

Листья конского

Трава горца птичьего спирт

50%-ный 30 спирт

To me 30 экстракта для

25 мл пробы,мл

Концентрация спирта, %

Коэффициент пересчета рутина . а флавоноиды сырья

Найдено флавоноидов, %