Способ получения биомассы дрожжей candido тrорiсаlis к-1
Иллюстрации
Показать всеРеферат
Изобретение относится к общей и промышленной микробиологии. Цель изобретения - увеличение выхода биомассы дрожжей и упрощение процесса. Способ заключается в том, что в качестве стимулятора роста добавляют в питательную среду коммерческий препарат РНКазу BACILLUS INTERMEDIUS 7Р в концентрации 1<SP POS="POST">.</SP>10<SP POS="POST">-5</SP>-1<SP POS="POST">.</SP>10<SP POS="POST">-7</SP> мг белка/мл питательной среды. 4 табл.
СОЮЗ СОВЕТСКИХ
СОЯ4АЛИСТИЧЕСНИХ
РЕСПУБЛИК
КН,РО, 0,1
К НРО 0,13
Сахароза 20,0
Лиофилизированный дрожжевой ° экстракт 0,2
ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ
ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ
ПРИ ГКНТ СССР
1 (21 ) 4320515/31-13 (22 ) 26.10.87 (46) 15. 09. 89. Бюл. М - 34 (71) Казанский государственный университет им,В.И.Ульянова-Ленина (72) С.Ю.Егоров, С.А.Калина, А.И.Колпаков, Ф.Г.Куприянова, И.Б.Лещинская и Л.Г.Мусина (53) 663. 14 (088.8) (56) Авторское свидетельство СССР
Р 271470, кл. С 12 N 1/00, 1969.
Авторское свидетельство СССР
11 704173, кл. С (2 N 1/00, 1978.
Изобретение относится к способам культивирования дрожжей и может быть применено в различных областях микробиологической промьппленности, Цель изобретения — повьппение выхода биомассы дрожжей и упрощение процесса.
Способ заключается в том, что в качестве стимулятора роста используют бактериальную РНКазу в низких концентрациях 1 ° 10 -(IO мг белка/мл питательной среды. Рибонуклеаза — фермент, секретируемый споровыми бактериями Вас1(.lus intermedius 7 P..
H p и м е р 1. Суточную культуру С.tropicalis К 1 смывают с поверхности агари"ованной среды и ñóñпендируют в полусинтетической питательной среде Ридер следующего состава, г/л . (ИН ) SO 3 О
МКБ04 0%34
NaCl 5,0
CaN0 4H„0 0,575
„„SU„„1507788 А 1 (51)4 С 12 N 1/16//(C 12 N 1/16, С 12 R 1:72) 2 (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ БИОМАССЬ1 ДРОЖЖЕЙ CANDIDA ТЕОР?СА?,ХБ К-1 (57) Изобретение относится к об- . щей и промьппленной микробиологии.
Цель изобретения — увеличение выхода биомассы дрожжей и упрощение процесса.
Способ заключается в том, что в качестве стимулятора роста добавляют в питательную среду коммерческий препарат РНКазу Bacillus intermedius
7 Р в концентрации 1 ° 10 -1 -10 мг белка/мл питательной среды. 4 табл.
Полученную суспензию культивируют при 30 С в стационарных условиях до достижения лагфазы роста. Затем клетки отделяют центрифугированием и вно» сят в колбы Эрленмейера емкостью
100 мл, содержащие по 10 мп свежей питательной среды. При этом конечная концентрация клеток составляет 20 млн/мл. РНКазу В,intermedius в концентрациях (1 10 - 1 .10 мг/мл с разницей на порядок) вносят одновременно с инокулятом. B качестве контроля используют клетки, инкубированные в среде, не содержащей фермента.
О приросте биомассы судят по увеличению количества клеток за период
3-часовой инкубации при 30 С в вибро3 150778 терме. Количество клеток определяют путем подсчета в камере Горяева.
Результаты экспериментов представлены в табл, 1.
Пример 2. Процесс ведут аналогично примеру 1, но используют клетки экспаненциальной фазы роста,, Результаты экспериментов представлены в табл. 2.. 10
Пример 3. Процесс ведут ана— логично примеру 1, но используют клетки фазы замедления роста культуры.
Результаты экспериментов представлены в табл. 3. l5
Пример 4. Процесс ведут аналогично примеру 1, но используют клетки стационарной фазы роста культуры. Результаты экспериментов представлены в табл.4.
Таким образом, добавление бактериальной РНКазы в питательную среду в концентрации 1 10 — 1 10 мг/мл способствует увеличению количества клеток С.tropicalis на 30-407. по сравнению с контролем и в 1,5-2,2 раза по сравнению с прототипом, В результате добавления в питательную среду бактериальной рибонуклеазы обеспечиваются следующие преиму30 щества предлагаемого способа: РНКаза
В.Intermedius, используемая в качестве стимулирующей добавки к питательной среде, является дешевым и доступным препаратом микробной природы; 35 стимулирующий эффект проявляется независимо от фазы роста посевной культуры.
Формула и з о р е т е н и я
Способ получения .биомассы дрожжей 4о
Candida tropicalis К-1, предусматривающий культивирование их на питательной среде, содержащей источники угле- рода, азота, фосфора, минеральные соли и ферментный препарат в качестве 45 стимулятора роста, с последующим выделением целового продукта„ о т л и ч а ю шийся тем, что, с целью повышения выхода биомассы и упрощения процесса, из ферментных препаратов используют РНКаэу, секретируемую бактериями Bacillus intermedius 7Р в концентрации 1 10 — 1 10 мг белка/мл питательной среды.
Таблица1
Влияние РНКазы В.Intermedius на размножение дрожжей С.tropicalis npu использовании посевной культуры лагЙазы роста
Таблица 2
Влияние РНКазы В.intermedius, 7Р на. размножение дрожжей С.tropicalis npu использовании посевной культуры экспоненциальной фазы роста
Концентрация Количество кле- Стимуляфермента ток млн/мп ция % мг/мл
Таблиц а 3
Влияние РНКазы В. intermedius
7Р на размножение дрожжей С, tropicalis при использовании посевной культуры фазы замедления роста
Концентрация Количество кле- Стимуляфермента ток,млн/мл ция, Ж
Контроль
1 10
1.10
1 10
1 ° 10
Контроль
1 10
1 10
1 10
1 -10
Контроль
1 10-4
1 -10
1.10
1 -10
28, 3+О, 9
291 2+0> 6
31, 1+О, 7
37, О+О, 5
32, 4+О, 7
46,7+1,3
55, 110,9
65, О+1,6
67, 1+2,3
58,0+1,9
42,9 1,8 49,4+2) 1
55,8+3,4
56,3+2,9
54,5+2,2
3,2
9,8
30,7
14,4
17,9
24, 1
43,6
24, 1
15,1
30,0
31,2
27,0
1507788
Таблица 4
Влияние РНКазы В,Intermedius 7Р на размножение С.Tropicalis при использовании посевной культуры стационарной фазы роста
Концентрация Количество кле Стимуляфермента, ток, ция, 7 мг/мл млн/мл
Составитель В.Голимбет
Техред М.Моргентал Корректор Л.Бескид
Редактор Л.Пчолинская
Заказ 5516/29
Тираж 501
Подписное
ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям прн ГКНТ СССР
113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5
Производственно-издательский комбинат "Патент", r.Óæãîðîä, ул. Гагарина, 101
Контроль
1.10 4
1 10
1 10
1 10
42,2+2,1
47,4+1, 9
56,8+2,6
56,6+2,0
47,5+2,1
12,3
34,5
34,1
12,5