Способ определения веществ группы средних молекул в биологических жидкостях

Способ определения веществ группы средних молекул в биологических жидкостях

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

Изобретение относится к биохимии и может быть использовано в медицине для определения веществ группы средних молекул в биологических жидкостях. Целью изобретения является повышение точности способа. Цель достигается тем, что кислоторастворимую фракцию плазмы, лимфы или спинно-мозговой жидкости, полученную путем осаждения 0,6 М раствором хлорной кислоты и центрифугирования, дополнительно обрабатывают 70-80 %-ным этанолом для полного осаждения высокомолекулярных белков, гликопротеидов и серомуноида с последующей спектрофотометрией супернатанта. 2 табл.

СОЮЗ СОВЕТСНИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИН

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

И АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТНРЦТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР (21) 4323421/28-14 (22) 02.11.87 (46) 07.11.89. Бюл. ff - 41 (71) Минский государственный медицинский институт (72) В.N.ffoèí, В.В.Николайчик, В.В.Кирковский, Г.А.Лобачева и Л.И.Мазур (53) 612. 015 (088.8) (56) Лабораторное дело. 1987, N - 3, с. 221-224. (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ВЕЩЕСТВ ГРУППЫ СРЕДНИХ МОЛЕКУЛ В БИОЛОГИЧЕСКИХ

И1ДКОСТЯХ

Изобретение относится к биохимии, а именно к способам определения биологически активных веществ, и может быть использовано в биохимии и медицине с целью диагностики степени нарушения гомеостаза.

Цель изобретения — повышение точности способа.

Изобретение поясняется более тесной, в сравнении с прототипом, корреляцией результатов, полученных предлагаемым способом и базовым объектом — гель — фильтрацией и меньшйм содержанием в экстрактах биологических жидкостей высокомолекулярных примесей.

Поставленная цель достигается тем, что дополнительно высокомолекулярные примеси кислоторастворимой фракции осаждаются 70-80Я-ным этанолом.

„„SU„, .1520445 А 1 (51) 4 G 01 N 33/50

2 (57) Изобретение относится к биохимии и может быть использовано в медицине для определения веществ группы средних молекул в биологических жидкостях, Целью изобретения является повышение точности способа. Цель достигается тем, что кислоторастворимую фракцию плазмы, лимфы или спинномозговой жидкости, полученную путем осаждения 0,6 М раствором хлорной кислоты и центрифугирования, дополнительно обрабатывают 70-807,-ным этанолом для полного осаждения высокомолекулярных белков, гликопротеидов и серомуноида с последующей спектрофотометрией супернатанта. 2 табл.

Пример 1. К плазме крови, лимфе или спинно-мозговой жидкости

Эаа добавляется хлорная кислота до конеч- Ql ной концентрации 0,6 М/л, после 10- 1

15 мин экспозиции при комнатной тем- ( пературе пробы центрифугируются при ф»

90008 15-30 мин. Надосадочная ащ- р кость переносится в отдельную пробир- @. ку и нейтрализуется раствором карбоната калия в концентрации 2 М/л (контроль рН вЂ” универсальная инпикаторная бумага). Пробы выдерживаются на льду 20-30 мин для полного осаждения перхлората калия и центрпфугируются, К прозрачному супернатанту д бав— ляется абсолютный этанол до конечной концентрации 80 об,7. (1 объем сучернатанта и 4 объема этанола). Прсчч, оставляют на 10-30 мин при комнч» нс1й температуре, затем цен трифугируют

1520445.при 9000@. Супернатант разводится дистиллированной водой в 5 раз, измеряется абсорбция при 210 нм. Референтный раствор — 80K-ный водный раствор этанола, разбавлен, как и опытный образец, в 5 раз дистиллированной водой.

Оптическая плотность стандартных растворов ангиотензина и соответствующий ей калибровочный фактор приведены в табл. 1. способу и методу гель-фильтрации приведено в табл. 2.

Формула изобретения

Параллельное определение веществ группы средних молекул в биологических жидкостях согласно предлагаемому

Таблица 1 .

Фактор (коэффициент) С

Е о нм

Концентрация пептида, С ° 10 г/л

Оптичес кая плотность, " сонм

Таблица 2

Исследуемая жидкость Концентрация средних молекул, г/л

Предлагаемый способ Метод гельфильтрации

0,96

0.89

Плазма крови

Спинно-мозговая

0,92

1,41

1,27

0,90

1,37

1,16 жидкость

Плазма крови

Лимфа

Составитель Л.Сабурова

Техред И.Ходанич Корректор В. Кабаций

Редактор Н. Тупица

Заказ 6751/ч6

Тираж 789

Подписное

ВНИИПИ Г < суларствениого комитета и ) изобретениям и открытиям ири ÊÍÒ СССР

1!3035, Москва, 1Н-3">, Раушская иаб., л. 4

Производстт.ение — из,.".ат . тьский ко iëина г "Патент", г. Ужиiiiii ц, i . .l а гарина, 1 1!

0,100

0,190

0,405

0,611

0,798

1,010

1,160

1,270

1,310

Способ определения веществ группы средних молекул в биологических жидкостях путем получения кислоторастворимой фракции биологической жидкости с последующим спектрофотометрированием, отличающийся тем, что, с целью повышения точности способа, кислоторастворимую фракцию дополнительно обрабатывают 70-80Х-ным этанолом в течение не менее 5 мин.

О, 050

О, 052

О, 049

О. 049

О, 050

0, 049

О, 050

О, 056

О, 061