Способ определения стадий острого перитонита у детей

Способ определения стадий острого перитонита у детей

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

Изобретение относится к медицине, в частности к хирургии, и может быть использовано для определения стадий острого перитонита у детей. Целью изобретения является повышение точности способа за счет возможности определения токсической стадии острого перитонита, а также упрощение способа. Для этого в сыворотке венозной крови определяют активность калликреина, предварительно отделяя его от остальных компонентов кининовой системы и других трипсиноподобных ферментов. После чего калликреин определяют в фильтре спектрофотометрическим методом по скорости гидролиза этилового эфира N-бензоил-L-аргинина. Свободный калликреин практически отсутствует в норме. Кровь больного центрифугируют. Для получения неадсорбированной фракции белков сыворотки крови 0,25 мл разводят в 3 раза фосфатным буфером, добавляют 2,5 мл сефадекса А-50, смесь перемешивают, добавляя 3,0 мл 0,02 М фосфатного буфера рН 7,0, содержащего 0,05 М NACL. Суспензию переносят на фильтр и фильтруют. Фильтрат переносят в мерную пробирку и доводят объем до метки 0,02 М фосфатным буфером. После чего к 1,0 мл фильтрата добавляют 1,0 мл 0,1 М трис - буфера рН 8,0 и 1,0 мл 1,5<SP POS="POST">.</SP>10<SP POS="POST">-3</SP> М р-ра БАЭЭ. В контрольную пробу берут 2,0 мл 0,1 М трис-буфера рН 8,0 и 1,0 мл 1,5<SP POS="POST">.</SP>10<SP POS="POST">-3</SP> М БАЭЭ. Активность калликреина определяют спектрофотометрически при длине волны 253 нм и 25°. При значении этого показателя 54,54 мед/мл и менее определяют реактивную стадию, при значении 58,18 - 90,90 мед/мл - токсическую, а при значении 94,54 мед/мл и более - терминальную стадию острого перитонита у детей. Применение способа в медицинской практике позволяет повысить точность диагностики за счет возможности определения токсической стадии острого перитонита. Кроме того, способ прост в исполнении и для его осуществления требуется 45 мин.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУВЛИН

„„SU„„1522!! 01

А1 (5Н 4 G 01 N 33/48

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Н ABTOPCHOMV СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОВРЕТЕНИЯМ И ОтНРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

1 (21) 4190639/28-14. (22) 04.02.87 (46) 15. 11. 89, Бил. 11 42 (75) К.С.Ормантаев, H.H.Aðûíîâ и A.Êàðàáåêîâ (53) 616.07(088.8) (56) Авторское свидетельство СССР

Р 118353, кл. А 61 В 10/00, 1982. (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ СТАДИИ ОСТРОГО

ПЕРИТОНИТА У ДЕТЕЙ (57) Изобретение относится к медицине, в частности к хирургии, и может быть использовано для определения стадий острого перитонита у детей. Целью изобретения является повышение точности способа за счет возможности определения токсической стадии острого перитонита, а также упрощение способа. Для этого в сыворотке венозной крови определяют активность калликреина, предварительно отделяя его от остальных компонентов кининовой системы и других трипсиноподобных ферментов. После этого калли-. креин определяют в фильтре спектрофотометрическим методом по скорости гидролиэа этилового эфира И-бензоил-L-аргинина. Свободный калликреин практически отсутствует в норме. Кровь больного

Изобретение относится к медицине, а именно к способам определения стадий острого перитонита у детей, и может быть использовано при определении степени тяжести воспалительного процесса при хирургических заболеваниях органов брюшной полости у детей.

2 центрифугируют. Для получения неадсорбированной фракции белков сыворотки крови 0,25 мл разводят в 3 раза фосфатным буфером, добавляют 2,5 мл сефадекса

А-50, смесь перемешивают, добавляя

3,0 мл 0,02 И фосфатного буфера рН

7,0, содержащего 0,05 И NaCI. Суспензию переносят на фильтр и фильтруют.

Фильтрат переносят в мерную пробирку и доводят объем до метки 0,02 И фосфатным буфером. После этого к 1,0 мл фильтрата добавляют 1,0 мл О, 1 И трисбуфера рН 8 0 и 1,0 мл 1,5 -10 3 И р-ра

БАЭЭ. В контрольную пробу берут 2,0 мл

0,1 М трис-буфера рН 8,0 и 1,0 мл

1,5 10 3 N БАЭЭ.Активность калликреина определяют спектрофотометрически при длине волны 253 нм и 25 . При значении этого показателя 54,54 мед/мл и менее определяют реактивную стадию, при значении 58, 18 — 90,90 мед/мл — токсическую, а при значении 94,54 мед/мл и более — терминальную стадию острого leal перитонита у детей. Применение способа в медицинской практике позволяет повысить точность диагностики за счет возмож- у р ности определения токсической стадии острого перитонита ° Кроме того, способ прост в исполнении и для его осуществМий ления требуется 45 мин.

Целью изобретения является повышение точности и упрощение способа.

Способ осуществляют следующим образом.

После .установления диагноза острого перитонита производят забор венозной кроВи через силиконизированную иглу

1 522101 в полиэтиленовую или силнконизиронанную пробирку. Лктинность калликреина определяют следующим методом. Калликреин отделяют от остальных компонен5 тов кипиновой системы и других трипсипоподобных ферментов путем кратковременного контакта исследуемого материала с суспензией ДЭАЭ-сефадекса Л-50 в присутствии 0,02 М калий-натрий-фосфат-10 ного буфера рП 7,0. После отделения анионита фильтрованием калликреин определяют нфильтрате сцектрофотометрическим методом го скорости гидролиза этилового эфира N-бензоил-Х.-аргинина. 15

Свободный (актинный) калликреин прак= тически отсутствует в нормальной сыворотке крови. Кровь больного центрифугируют при 3000 об/мин 15 мин. Для получения неадсорбиронанной фракции бел- р

KOB CbIBOpOTICH I< p0I3H О, 25 MSI CbiBOpOTICH крови разводят в 3 раза. 0,02М фосфатным буфером рН 7,0 и добавляют 2,5 мл густой суспензии сефадекса Л-50, уравновешенного тем же буфером. Смесь осто- 5 рожно перемешивают 10 мин тонкой стеклянной палочкой, добавляют 3 0 мл

0,02 М фосфатного буфера рН 7,0, содержащего 0,05 M NaC1, перемешивают еще

2 мин. Переносят суспепзию на фильтр и фильтруют с небольшим отрицательным давлением. Фильтрат количественно переносят B мерную пробирку на 5,0 мл, объем фильтрата доводят до метки

0,02 М фосфатным буфером.

Для определения активности калликреина к 1,0 мп фильтрата добавляют

1,0 ил 0,1 М трис-буфера рН 8,0 и

1,0 мл 1,5 ""10 И раствора БАЭЗ в том же буфере. В контрольную пробу берут

2,0 мл 0,1 N трис-буфера .рН 8,0 и 1,0 мл 1,5 -10 М БАЭЭ (проба на споктанпый гидролиз эфира рН 8,0). Пробы переливают в к1оветы спектрофотометра и измеряют прирост оптической плотности при длине волны 253 нм и 25 .

15 мин, отсчеты делают через каждые

5 мин. Содержание калпикреина выражают в миллиединицах в 1,0 мл сыворотки крови и вычисляют но формуле:

3 . 5 -1000 — — — — — — д D 3636.

1,1 15 025 - 1

МЗ где д П „- прирост оптической плотности за 15 мин (при линейном ходе реакции), — Ю соответствующий образова.ппо 1 мкмоль о1-бензоип-L àðãèíèíà из БЛЭЭ в 1 мл пробы, 3 — объем пробы в кювете,мл, 5 — объем неадсорбированной фракции, мл, 0,25 — количество сыворотки крови взятого анализа,мл.

При активности калликреина,равной

54,54 мед/мл и менее, определяют реактивную стадию при значении 58,1890,90 мед/мл — токси тескую, при значении 94,54 мед/мп и более — терминальную стаджо острого перитонита у детей.

Способ определения стадий острого перитонита был применен у 157 больных в возрасте от 1 мес до 15 лет.При этом в реактивной стадии острого перитонита было 43 ребенка, активность калликреина сыворотки крови составила 44,89+1,04 мед/мл, о = 7,54

Р С 0,5, B токсической стадии активность калликреина составила 76,24+

+О, 48 мед/Мл. Б = 4, 02, Р (0,05, В термйнальной стадии острого перитонита активность калликреина составила

103,55 0,81 мед/мл, ь= 4,05, Р 4 0,05, l

Пример 1.Больной К,, 1 год

5 мес. После клинико-лабораторного обследования установлеп диагноз: Острый деструктивный аппендицит, перитонит, реактивная стадия. 7 ля определения активности калликреина взят 1 MJI ненозной крови, Прирост оптической плотности составил dD, =- 0,015, а

15 содержание калликреина соответственно ДВ,, х 3636 = 0,015 х 3636

=- 54,54 мед/мл, что соответствует реактивной стадии острого перитонита.

Больному проведена предоперационная подготонка как при реактивной стадии.

Изменения, обнаруженные в брюшной полости но время операции, течение заболевания и динамика состояния больного в послеоперационном периоде подтвердили правильность устанонленного диагноза — реактивной стадии острого перитонита.

Пример 2, Больной Ю., 12 лет.

После клиника-лабораторного обследования установлен диагноз: перфоративная язва желудка, перитонит,реактивная стадия, Взят 1 мл ненозной крови для определения активности капли- 1 креина. Прирост оптической плотности о составил ЛВ zz,= 0,025, а содержание калликреина — 90,9 мед/мл,. что соот1522101

Формула изобретения

Способ определения стадий острого перитонита у детей путем исследований сыворотки крови, о т л и ч а юшийся тем, что, с целью повышения точности и упрощения способа,определяют активность калликреина и при значении этого показателя

54,54 мед/мл и менее, от 58,18 до

90,9 мед/мл и 94,54 мед/мл и более определяют соответственно реактивную, токсическую и терминальную стадии острого перитонита.

Составитель Н.Валеева

Техред Л.0лийнык Корректор З.Лончакова

Редактор Н.Горват

Заказ 6953/41 Тираж 789 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР i13035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г.ужгород, ул. Гагарина, 101 ветствует токсической стадии острого перитонита. Больному произведено предоперационнал подготовка, соответствующая токсической стадии перитонита.Иэ5 менения, обнаруженные в брюшной полости во время операции, тяжелое течение послеоперационного периода и медленная положительная динамика состояния больного подтвердили правильность установленного диагноза — токсической стадии острого перитонита.

Пример 3. Больной В., 16 дней.

После клинико-лабораторного обследования установлен диагноз: язвенно-не- 15 кротический энтероколит, септический перитонит, терминальная стадия. Взят

1 мл венозной крови для определения активности калликреина. Прирост оптической плотности ЛЭ = 0,026, а со- 20 держание калликреина — 94,54 мед/мл, что соответствует терминальной стадии острого перитонита. Ребенку проведена предоперационная подготовка, соответствующая терминальной стадии перито- 25 нита. Изменения, обнаруженные в брюшной полости во время операции, крайне тяжелое состояние и течение заболевания (ребенок через сутки после операции умер) подтвердили правильность 30 установленного диагноза.

П р и и е р 4, Больная Р., 4 года

8 мес. После клинико-лабораторного обследования установлен диагноз: пельвиоперитонит, реактивная стадия. У ре.бенка взят 1 мл венозной крови для определения активности калликреина.

Прирост оптической плотности составил d0 = 0,016, а содержание кал15 ликреина -- 58,18 мед/мл, что соответствует токсической стадии острого перитонита. Больной произведена предоперационная подготовка соответственно токсической стадии. Изменения,обнаруженные в брюшной полости во время операции, течение заболевания и динамика состояния больного подтвердили правильность установленного диагноза — токсической стадии перитонита. !

Применение способа в медицинской практике повышает его точность эа счет возможности определения токсической стадии острого перитонита.Способ прост в исполнении, для его осуществления требуется 45 мин, не требуется дорогостоящего оборудования и реактивов.