Способ диагностики антракосиликоза

Способ диагностики антракосиликоза

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

Изобретение относится к медицине, в частности к пульмонологии. Целью изобретения является ранняя диагностика. Для этого определяют активность супероксиддисмутазы (СОД) эритроцитов по методу Е.Е.Дубининой. Принцип метода заключается в определении степени ингибирования восстановления нитросинего тетразолия в присутствии НАД<SP POS="POST">.</SP>Н и феназинметасульфата. Также определяют относительную индуцированную хемилюминесценцию гемоглобина (ИХЛ). Измерение ее интенсивности проводят на установке, состоящей из термостатирующей кюветы с перемешивающим устройством, в котором находится проба, коллимирующих оптических элементов с механическим затворомсветоотсекателем и фотоэлектронного умножителя, на фотокатод которого проецируется световой поток. При значении показателя СОД от 350 усл.ед./мл/мин и более и ИХЛ гемоглобина от 0,350 усл.ед. и более диагностируют антракосиликоз. Предлагаемый способ прост, существенно улучшает диагностику, обеспечивает высокую точность и позволяет не только осуществить дорентгенологическую диагностику антракосиликоза, что, в свою очередь, позволит проводить эффективную профилактику антракосиликоза на самых ранних стадиях развития, т.е. на стадии предболезни, но и является надежным дублирующим методом при постановке диагноза антракосиликоз 1 стадии.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИА ЛИС"ГИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИК (я) 4 G 01 N 33/483

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

1 (21) 3912211/28-14 (22) 21,06.85 (46) 15. 11.89. Бюл . Н 42 (71) Карагандинский государственный медицинский институт и Институт гигиены труда и профзаболеваний АН КаэССР (72) Л.Е. Иуравлева, Г.М. Пичхадзе и Л.А. Иажинский (53)" 616.07(088.8) (56) Федькина Л.Г. и др. Применение оксипроли н-глюкуронового T ес та при обследова нии бол ьных с ра элич ными

Формами пылевой патологии. - Гигиена труда и профзаболеваний. 1977, И 8, 28-30. (54) СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ АНТРАКОСИЛИ"

КОЗА (57) Изобретение относится к медици- . не, в частности к пульмонологии. Целью изобретения является ранняя диагностика. Для этого определяют ак" тивность супероксиддисмутазы (СОД) эритроцитов по методу E,Е. Дубининой.

Принцип метода заключается в определении степени ингибирования восстановления нитросинего тетразолия в присутствии НАД Н и ФеназиметилсульИзобретение относится к медицине, а именно к пульмонологии.

Целью изобретения является ранняя диагностика .

Способ осуществляют следующим образом.

У больных и здоровых людей берут кровь в общем количестве 1 мл с ан„„SU„„>5r21O3 А1

2 фата, Также определяют относительную и ндуци рова нную хемилюми нес ценцию гемоглобина (ИХЛ) . Измерение ее интенси вности проводят на уста новке, состоящей из термостатирующей кюветы с перемешивающим устройством, в котором находится проба, коллимирующих оптических элементов с механическим затвором - светоотсекателем и Фотоэлектронного умножителя, на фотокатод которого проецируется световой поток. При значении показателя СОД от 360 усл.ед /мл/мин и более и ИХЛ гемоглобина от 0,350 усл.ед. и более диагностируют антракосиликоз.

Предлагаемый способ прост в осуществлении, существенно улучшает диагностику, обеспечивает высокую точность и позволяет не только осуществить дорентгенологичес кую диа гности ку а нтракосиликоэа, что, в свою очередь, позволит проводить эффективную профилактику антракосиликоза на самых ранних стадиях развития, т.е. на стадии предболезни, но и является надежным дублируоцим методом при постановке диагноза антракосиликоэ.

1 стадии. тикоагулянтом. Забор крови производят натощак. Кровь центрифугируют

10 мин при 1000 об/мин для удаления плазмы. Эритроциты трижды промывают охлажденным фи зиологичес ки м раст вором, В эритроцитах определяют активностьь супероксиддисмута зы (СОД), Принцип метода заключается в определении степени ингибирования восстанов1522103 4 пения нитросинего тетраэолия в прис утст вии НАД. Н и фена айнмета сул ьфата. Кровь с одной каплей гепарина (берут 0,5 мл) центрифугируют 10 мин пои 10 тыс.об. в минуту, к осадку

5 эритроцитов добавляют 2 мл дистиллированной воды, встряхивают 5 мин и добавляют хлороформ (2 части) и этиловый спирт (1 част-ь), смесь центрифугируют при 1000 об/мин 30-40 мин, K супернатанту добавляют КН НРО„и оставляют на ночь при +4 С.

Определение фермента проводят на . спектрофотометре Сф-26 при длине вол15 ны 534 нм в кювете с ходом светового луча 10 мм. Инкубационная смесь со. стоит из 1,3 мл Фосфатного буфера (рН 8,3)), 1 мл нитросинего тетразолия (200 мкг/1 мл), 0,3 мл Феназинметасульфата (69 мкг/мл), 0,2 мл супернатанта и 0,2 мл НАДН (0„0002 И).

Контролем служат пробы.без НАДН .Пробы с НАДН g инкубируют 10 мин.

Расчет проводят по Формуле

Т-(100- -"

Т

"хP (\ где Т экстинкция пробы) Т/10 экс тинкция пробы. за 1 мин, Р - разведение, единицы измерения, ед.акт/мл эр/мин.

Индуцирова нную хемилюми нес ценцию (ИХЛ) гемоглобина измеряют на уста" новке, состоящей из термостатируемой кюветы с перемешивающим устройством, в котором находится проба, коллимиру" ющих оптических элементов с механи" ческим затвором - cBeTooTGBKGTpJleM u

Фотоэлектронного умножителя, на Фото" щО катод которого проецируется световой поток. Для соблюдения линейности характеристики напряжение на Фотоэлектронный умножител ь уста на вливают в области счетного "плато.". Возможно также использование серийных спектральных приборов, оснащенных Фотоэлек" тронными приставками типа ИСП-51,ДСФ24 и др.

0,02 мл эритроцитов гемолизируют в 5 мл дистиллированной воды. После приготовления раствора следует избе« гать попадания на него солнечных лучей. В кювету хемилюминометра вносят раствор гемоглобина в количестве

0,5 мл, а затем вводят 19х10 И раствор перекиси водорода. Регистрируют вспышку света B течение 5 минут, пл ощад ь под кри вой опр еделя ют вес овым методом. При проведении исследования следует строго контролировать концентрацию гемоглобина в кювете.

Предлагаемым способом обследовано

138 человек, из них 40 человек " контрольная группа по антракосиликозу " группа "К", 98 человек - с антракосиликоэом 1 стадии, в том числе с сопутствующими заболеваниями, а также 20 человек здоровых лиц - первичных доноров. У лиц с подозрением на антракосиликоз активность СОД изменялась от 350 до 450 единиц активности, ИХЛ гемоглобина ".от 0,350 до 0,450 по отношению к крови здоровых людей, у больных антракосиликозом 1 стадии эти показатели составили 500-700 единиц активности и 0,500-0,700 соответ" ст венно. Удоноров.показатели СОД и ИХЛ гемоглобина - 250-280 единиц активно" с ти и еди ни ца . Сопутст вующи е за болевания, например, хронический бронхит, не вызывали. отклонений, выходящих за границы предложенных критериев.

Пример 1. Горняк Х, 44 года, пылевой стаж 22 г, работал на должностях проходчика, забойщика, жалоб не предъявлял, направлен на обследо" вание с подозрением на антракосили" коз (после профосмотра) . При тщательном рентгенологическом обследова нии установлен усиленный рисунок легких.

Наши исследования показали увеличение активности супероксиддисмутазы до

350,0 усл. ед/мл эритроцитов/мин, а интенсивность индуцированной хемилюминесценции снижалась до 0,3 (при

180-250 усл.ед/мл эритроцитов/мин супероксиддисмутаэн эритроцитов и интенсивности индуцированной хемилюминесценции гемоглобина, принятой за 1, у здоровых людей).

Диагноз: контрольная группа по антракосиликоэу (стадия 0-1).

Пример 2. Горняк У,, 48 лет, пылевой стаж 26 лет, работал на долж" ностях забойщика, проходчика, горнорабочего очистных забоев, жалоб не предьявля.п, после профосмотра напра влен на обследование- с подозрением на антракосиликоз. Рентгенологическое обследование показало начальные проя вления и нтерсти циал ьного пневмоФиброза. Исследования выявили увеличение активности супероксиддисмутазы до 450 усл. ед/мл эритроцитов/

/мин, а интенсивность индуцировайной хемилюминесценции - 0,45 (при

1522

103 6

Ф о р и у л а и з о б р е т ения

Способ диагностики антракосилико" за путем биохимического исследования крови, отличающийся тем, что, с целью ранней диагностики, определяют активность супероксиддисмутазы в эритроцитах и относительную индуцированную хемилюминесценцию гемоглобина и при значении первого показателя 350 усл. ед/мл/мин и более и второго показателя 0,30 усл.ед. и более диагностируют антрокосиликоэ.

Составитель Л. Шилина

Техред Л.Олийнык Корректор И. Пожо

Редактор Н. Горват

Заказ 6953/41 Тираж 789 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Иосква, И-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", r. Ужгород, ул. Гагарина,101

180-250 усл.ед/мл эритроцитов/мин, и и нтенси вности и ндуци рова нной хемилюминесценции гемоглобина, принятой эа I, у здоровых людей). Диагноз: контрольная группа flo антракосиликозу, стадия (О" 1} .

Было обследовано 200 человек шахтеров, иэ них 100 человек с началь" ными проявлениями антракосиликоза, 100 - больные антракосиликозом 1 стадии. 1 группа обследованных лиц показала, что значение активности супероксиддисмутаэы не выходило из пределов 350-450 усл. ед/мл эритроцитов/мин, а интенсивность индуцированной хемилюми нес цен ции гемоглобина в пределах О, 3-0, 4 5 от э начения контроля, принятого эа 1. У шахтеров, больных антракосиликоэом 1 стадии, 20 указанные параметры изменялись по" другому: так, супероксиддисмутаза возрастала до 500-700 усл, ед/мин эритроцитов/мин, а интенсивность индуцированной хемилюминесценции гемогло- 2g бина - до 0,7-0,8, соответственно по сравнению с контролем .(здоровыми людь" ми — первичными донорами).

Для доказательства высокой специфичности предлагаемых показателей для. ранней диагностики антракосили" коза, был проведен эксперимент по моделированию антракосиликоза. Крысы были затравлены угольно" пылью (свежеобраэованной), исследовалась корреляция между показателями, супероксиддисмутаза и интенсивность индуциро" ванной хемилюминесценции гемоглобина и интегральными параметрами, характеризующими развитие фиброэного про- 40 цесса. Установлено, что до начала интенси вного колла генообра зова ния в легких опытных крыс, отмечается сильная корреляция между интегральными показателями развития фиброзного про- 4 цесса (массой легких, массой трахеобронхиальных лимфатических узлов, содержанием коллагена и общих липидов в легких) и супероксиддисмутазой, ин" тенсивностью индуцированной хемилюминесценции гемоглобина. Например, корреляция между супероксиддисмутазой и массой легких равна - 0,97,мас" сой трахеобронхиальных лимфатических узлов - 0,98, коллагеном - 0,84, o6", щими липидами - 0,89. Иежду интенсивностью индуцированной хемилюминесценции гемоглобина и массой легких0,92, массой трахеобронхиальных лиматических узлов — 0,98, коллагеном0,92, общих липидов - 0,85.

Полученные экспериментальные данные доказывают высокую специфичность предложенных параметров, а также и то, что они адекватно отражают процессы, происходящие в легких до ин" тенсивного коллагенообразования.

Предлагаемый способ предна.значен для выявления ранних стадий развития антракосиликоза, в связи с чем он не может быть использован для сравнения с прототипом, так как последний может быть использован только при развитом фиброзном процессе в легких, к тому же последний используется для диагностики ряда других патологий, связанных с соединительной тканью, не пылевой этиологии,