1529086 - Способ количественного определения новокаина

Способ количественного определения новокаина

Иллюстрации

Показать все

Реферат

Изобретение относится к аналитической химии, в частности к способам количественного фотометрического определения новокаина -медицинского препарата, что может быть использовано в фармацевтической промышленности. Цель - повышение чувствительности и селективности способа. Пробу обрабатывают органическим реагентом - п-диметиламинокоричным альдегидом, растворенным в этиловом спирте, в присутствии додецилсульфата натрия при PH среды 3,0-4,0. Количество п-диметиламинокоричного альдегида в этаноле 4,5<SP POS="POST">.</SP>10<SP POS="POST">-5</SP>-4,5<SP POS="POST">.</SP>10<SP POS="POST">-4</SP>М, количество додецилсульфата натрия 4<SP POS="POST">.</SP>10<SP POS="POST">-3</SP>-4<SP POS="POST">.</SP>10<SP POS="POST">-2</SP>М. Способ позволяет повысить чувствительность определения новокаина в 5 раз и селективность за счет определения новокаина в присутствии большого числа лекарственных форм в определяемой пробе, а также за счет возможности определения новокаина в биологическом объекте - донорской крови. Нижний предел обнаружения 0,04 мкг/мл против 0,02 мкг/мл, т.к. окраска сигналов аналитической формы 5-8 ч против 5 ч. 8 табл.

СОЮЗ СОВЕТСНИХ

РЕСПУБЛИК (19 (И) (. 111 4 С 01 0 21/78

ГОСУДАРСТ8ЕННЫЙ HOMHTET

ПО ИЗОбРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

Я И ГКНТ СССР

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ -.

Н АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

l (21) 4312829/31-04 (22) 05.10.87 (46) 15,12.89 ° Был.1Р 46 (71) Научно-исследовательский институт химии Саратовского государственного университета им. Н.Г.Чернышевского и Саратовский государственный медицинский институт (72)Р.K.Чернова, К.Т.Бендер, Н.Н.Гусакова, О.М.Харитонова, Г.М.Борисова и Т.Н.Подзорова (53) 543. 42. 063 (088. 8) (56) Лукьянчикова Г.И., Бернштейн В.Н.

Фотоколориметрическое определение

ыгьекциониых растворов новокаина.

Сб. научных докладов. Изд-во Медицинского института. Всесоюзное химическое общество им. Д.И.Менделеева. Ставропольское краевое отделение. 1960, в. 1, с. 31-34.

Авторское свидетельство СССР

В 1415159, кл. G 01 N 21/78, 1988. (54) СПОСОБ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ НОВОКАИНА (57) Изобретние относится к аналитической химии, в частности к способам

Изобретение относится к аналитической химии, а именно к способам количественного определения новокаина, Цель изобретения вЂ” повышение чувствительности и селективности способа определения новокаина.

Пример l. Построение градуировочной характеристики для количественного фотометрического определения больших количеств новокаина. Точную

2 количественного фотометрического опре- деления новокаина вЂ” медицинского пре- парата, что может быть использовано в фармацевтической проюппленности.

Цель вЂ” повышение чувствительности и селективности способа. Пробу обрабатывают органическим реагентомвЂ” и-диметиламинокоричным альдегидом, растворенным в зтиловом спирте, в присутствии додецилсульфата натрия при рН среды 3,0-4,0. Количество идиметиламинокоричного альдегида в этаноле 4,5 10 -4,5 10 + N количество додецилсульфата натрия 4 ° 10

4 10 М. Способ позволяет повысить чувствительность определения новокаи- ф на в 5 раз и селективность за счет определения новокаина в присутствии большого числа лекарственных форм в определяемой пробе, а также за счет воэможности определения новокаина! в биологическом обьекте вЂ” донорской крови. Нижний предел обнаружения

0,04 мкг/мл против 0,02 мкг/мп, так как окраска сигналов аналитической формы 5-8 ч против 5 ч. 8 табл. навеску субстанции сухого препарата новокаина 0,00250 г помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл и растворяют в дистиллированной воде при нагревании на водяной бапе. Стандартный раствор содержит 100 мкг/мл новокаина. Для построения градуировочной характеристики в семь мерных колб емкостью 25 мл помещают 0,1 мл (10 мкг);

0,3 мп (30 мкг)р 0,5 мл (50 мкг);

1529086

0 8 мп (80 мкг); 1 0 мп (100 мкг)1

1,2 мп (120 мкг); 1,4 мп (140 мкг) стандартного раствора новокаина. Добавляют в каждую из колб IIQ 0,1 мл

0,2/-ного раствора 1,14-10 М идиметиламинокоричного. альдегида в этиловом спирте (Q-ÄÌÀÊÀ) по 1 мл 10 " M раствора додепилсульфата натрия (ДСНа) и доводят объем колб до метки цитратным буферным раствором с рН = 3,0. Оптические плотности полученных растворов измеряют на фотоэлектрокалориметре ФЭК-56М-У.4.1; с/ф II 6 в кюветах с толщиной погло- 15 щающего слоя 1 = 1 см относительно раствора сравнения, содержащего

0,1 мл 0,2/-ного раствора и-ДМАКА;

1 мп 10 M раствора QCNa и цитратный буферный раствор с pH = 3,0. V > = 20

= 25 мп. По полученным значениям оптической плотности строят зависиюсть А = f (С). Закон Бугера-Ламберта-Бера выполняется при концентрации новокаина 10-140 мкг/25 мл или 0,4- 25

5,6 мкг/мп.

П р и и е р 2. Построение градуировочной характеристики для количественного фотометрическоro определения малых содержаний новокаина. Стан- 30 дартный раствор новокаина 100 мкг/мп (раствор А) разбавляют дистиллированной водой в 10 раз и получают раствор новокаина с концентрацией

10 мкг/мп (раствор Б). В пять мерных колб емкостью 25 мл помещают 0,1 мл (1 мкг/мл); 0,3 ип (3 мкг); 0,5 мл (5 мкг)1 0,7 мл (7 мкг); 1,0 мл (10 мкг) раствора Б, добавляют в каждую колбу по 0,1 мп 0,2Х-ного раство- 40 ра д-ДИАКА в .этиловом спирте и по

1 мл 10 M раствора ДСЯа. После этого доводят объем в каждой колбе до

25 мл цитратным буферным раствором с рН - 3,0. Оптические плотности 45 полученных реакционных смесей измеряют на ФЭК-56М-У.4.1, с-ф У 6 в кюветах с толщиной поглощающего слоя

1 5 см. Раствор сравнения готовят аналогично примеру 1. Градуировочная характеристика прямолинейная в интервале концентрации 1-10 мкг/25 мп или

0,04-0,4 мкг/мл новокаина. Предел обнаружения новокаина 0,04 мкг/мл.

Табл. I показывает, что в реакционную смесь необходимо вводить 0,11,0 мп 0,2Х-ного раствора и-ДМАКА в этиловом спирте. Данные, приведенные в табл. 1, показывают, что ошибки определения новокаина при концентрации и ДМАКА О, I l 0 мл 0,2Х (С

М раб

= 4,5 10 вЂ” 4,5 10 М) не превышают

4, 5/.

Результаты определения содержания новокаина при различной концентрации реагента и-диметиламинокоричного альдегида (рН 3,0; С,4сяо = 1 мл;

10 М; С мак = О, 2 -ного р-ра; 1

1 см, Voaä„= 25 мл) приведены в табл. l .

Табл. 2 показывает, что в реакционную смесь необходимо вводить также

1 мл 1--10 вЂ” 1,0 M раствора додеципсульфата натрия.

Результаты определения содержания новокаина при различной концентрации додецилсульфата натрия (рН = 3,0, Сдммя = Оэ1 мл 02Х1 Ч„= 25 мл;

1 = 1 см) приведены в табл.2.

Диапазон определяемых содержаний новокаина (C+M<<> 0,1 мл 0,2Х-ного р-ра; Cp,cuba = 1 мп; 10 М, рН = 3,0;

Чо,„ = 25 мл) показан в табл.3.

Анализ экспериментальных данных, приведенных в табл.3 показывает, что при использовании кюветы с толщи! ной поглощающего слоя 1 = 1 см возможно определение новокаина в интервале концентраций 10,0-140,0 мкг/

/25 мл (0,4-5,6 мкг/мл) с погрешностью, не превышающей 2 6Х. При концентрациях новокаина больше 140,0 мкг/

/25 мл и меньше 10 мкг/25 мп ошибки определения новокаина возрастают до

16,0-)8,0 ° Определяемые содержания новокаина можно понизить, если в эксперименте увеличить толщину поглощающего слоя, т.е. использовать кювету толщиной 1 = 5 см. При этом условии становится возможным с ошибкой

+ 8,0Х определить 1,00-10,00 мкг/

/25 мл новокаина (0,04-0,4 мкг/мп).

Результаты определения новокаина в зависимости от рН среды (Cp qq =

= 0,1 мп 0,2 -ного р-ра; Сд я, 2 мл ° 10 М, Ч ) щ - 25 мпу 1

5 см) показаны в табл.4.

Дпя исследования селективности реакции выбран широкий круг лекарственных препаратов, которые используются совместно с новокаином,,Соотношение концентраций различных сопутствующих

1529086 компонентов (К) и новокаина (Н) составляет 1:1.

Результаты йсследовання влияния различных сопутствующих компонентов на результаты определения новокаина (рН 3,0;

Сд д д 0,1 мл 0,2Х-ного р-ра;

С 4,cNa мп ° 10 М, С С д 1;11

1 1 см) приведены в табл.5.

Анализ табл. 5 показывает, что совместно применяемые с новокаином лекарственные препараты не оказывают мешающего влияния на результаты его определения, ошибка определения новокаина не превышает 3. 2,0Х.

Пример 3. Определение содержания новокаина в сложных лекарственных формах. Анализируемые порошки сложных лекарственных форм, содержа- 20 щих новокаин, тщательно растирают в фарфоровой ступке. Точные навески количественно переносят в мерные колбы соответствующей емкости и растирают в дистиллированной воде. Далее 25 проводят определение новокаина указанным способом аналогично примерам 1 и 2.

Результаты определения содержания новокаина в сложных-лекарственных 30 смесях (рН 310;,Сп-дм д = 0,1 мп

0,2Х-ного р-ра; С <> ** l мл к

«10 М; 7 ш 25 мл) приведены в табл.б.

Пример 4. Определение содержания новокаина в крови. При подготовке крови в анализу белки крови осаждают трихлоруксусной кислотой. К пробе донорской крови 2,0-3,0 мл прибавляют 40 новокаин и сразу осаждают белок крови

2 мл 20Х-ного раствора трихлоруксусной кислоты. Смесь тщательно перемешивают стеклянной палочкой, центрифугируют

5 мин на центрифуге при скорости 45

3000 об/мии. Фильтрат аккуратно переносят в мерную колбу на 25 мл. Осадок промывают 2 мл буферного раствора с рН 3,0 и еще раз центрифугируют, Второй фипьтрат сливают в ту же мерную колбу на 25 мл. К объединенным фильтратам добавпяют 5-8 мп буферного раствора с рН 3,0; 0,1 мл 0,2Х-ного раствора и-ДМАКА; мп 10 И раствора

ДСНа и доводят до метки буферным раствором. Полученные смеси фотометрируют аналогично примеру 2. Содержание новокаина определяют по градуировочиой характеристике.

Результаты определения новокаина в донорской крови приведены в табл.7.

Результаты сравнения предлагаемого способа с известным приведены в табл.8.

Таким образом, предлагаемый способ более чувствителен при определении

Ъ новокаина и селективен при его определении в смесях с другими лекарственными формаин. Кроме того, показана воэможность определения ультрамалых количеств новокаина в крови, что черезвычайно важно для рационального применения указанного способа с лечебной целью.

Формула изобретения

Способ количественного определения новокаина путем обработки анализируемой пробы органическим реагентом в присутствии додецилсульфата натрия с последующим фотометрированием полученного раствора, о т л и ч а ювЂ” шийся тем, что, с целью повыпения чувствительности и селективности способа, в качестве органического реагеита используют раствор и-диметиламинокричиого альдегида в зтиловом спирте в количестве 4,5-10 вЂ”

4,5 ° 10 4 М,додецилсульфат натрия ис- пользуют в количестве 4,О Й !0

4,0 ° 10 М и обработку ведут при рН 3,0 - 4,0.

1529086

Таблица 1

ОтносиНовокаин, мкг тельная

Добавлено, С мп погрешность» " Ж

Найдено

Взято

2,28 10

4,56 10

2,28 10

4,56 ° 10

6,84-10

14,40

2,50

4,00

4,50

13,50

20,00

17, 10

20,50

20,80

19,10

22,70

0,05

0,10

0 50

1,00

1,50

Таблица 2

ДСКа

Относительная овокаин, мкг

Добавлено, p06. » 1 1 Взято по грешНайдено ность, 2 ° 10

4-10

2 ° 10

4 10

1,2.10

18,0

1,50

3,5

3,0

l3»O

16,4

20,3

20,7

19,4

22,6

20,0

0 5

1,0

5,0

10,0

3iO

Таблица

Взято ново" Найдено Относитель- Толщина каина, мкг новокаина, ная погреш- кюветы, мкг ность, «+ Х см

Т а б л и ц а 4 рН среды Новокаин, мкг тносиельная

Взято Найдено агрешость, 18,0

6,0

3,0

4,0

14,0

1,0 0,82

1,0 1,06

1,0 1,03

1,0 0,96

1,0 0,86

2,0

3,0

3,5

4,0

5 0

5,0

10»0

50 0

100iO

140,0

160 0

0 5

1,0

5,0

10,0

15,0

5,8

9,42

49,20

99 20

140,56

131,20

0,39

0,92

5,2

9,74

l7 1

16,0

5,8

l,6

0,8

0,4

18,0

22,0

8,0

4,0

2,6

14,0

Тв блица 5

1529086

Относительная

Сопутствующие Новокаин, мкг компоненты

Взято Найдено погрешность, +Х

49,2 l!6

50 0

2,0

50,0 51 0

50,85 1,7

49,7 0,6

48,0 2,0

50,2 0,4

50,0

50 0

5l,05 2,1

49,35 1,3

SO,S 1,0

49,8 0,4

50,8 1,6

51,0 2,0

50,0

50 0

50,0

50 0 49,5 1,0 кислота

Альбумин лнофи-. зированный

Мочевина

Борная кислота

Кофеина бензоат

Натрия бромид

Тальк

Трихлоруксусная кислота

Цинка сульфат

50,35 0,7

49,15 1,7

48,95 2,1

50,8 1,6

50,25 0,5

49,90 0,2

50 0

50,0

50 0

50,0

50,30 0,6

49,80 0,4

50,0

50 0

Таблица 6

«Г

ОтносиНавеска, г/

/Объем, мл

Состав лекарственной формыэ

Новокаин, г х+ х тельная ошибка, f.Х

Содержа- Найдение в но в навеске навеске

Новокаин 0,2

Цинка сульфат 0,05

Борная кислота 0,4

О 6500

0,2!!

t! !!

О, 211 О, 008

Новокаин 1,0

Глюкоза 5,0

С,Н ОН 50

6 О

l,0!! !

t! !!

1!05 0!026

1 О

200

0,2

Новокаин 0,2

Кофеин бензоат 0,8

Эуфиллни

Папаверина гидро хлорид

Строфантина сульфат

Димедрол

Дибазол

Дроперидол

Натрия оксибутират

Глюкоза

Калий хлористый

Окситоцин

Но-шпа

Этиоиамид

Глютаминовая

0,204

0,22

0,206

0,214

0,210

l,03

l 08

1 05

1,04

1,07

0,21

0!20

2,0

10,0

3,0

7,0

5 0

3,0

8,0

5 0

4,0

7,0

5 0

0,0

1529086

Продолжение табл.6

Навеска; г/

/Объем, мп

Новокаин, г тносн х+ дх ел ьная шибка, QX

Содержа- Найдение s но в навеске навеске

О, 204+01,007!

1 °

1,0

5 0

200

Новокаин 1,0

ЯаВт 4,0

1,02

11 !

1,03+0,035

0,1

0 3

Новокаин 0,1

Папаверина гидрохлорид 0,2

«и»

«11» и

0,10210,08

Та блица 7

Объем донорской крови мл

Новокаин

OTB0 CHTGJIh ная погрешВзято, мк Найдено, мкг ность, g Й

Т аблица 8

Показатели

Предлагаемы способ

Известный

0,04 мкг/мл

0,2 мкг/мп

0,4 - 5,6 мкг/мп

11см

0,04-0,4 мкг/мп

1 5см

2-20 мкг/мл

1a I,cM

Состав лекарственной формы, г

Ыикний предел обнаружения

Диапазон определяемых содержаний

2,0

5 0

5,0

5 0

l,88

2,20

1,94

l,80

1,98

5,05

4,80

4,65

5,10

4,75

0,194

0,216

0,198

1 06

1,02

0,991

1,090

1,030

0i 11

0,093

0,105

0,096

0,108

3,00

8,0

2,0

6,0

2,0

9,0

3,0

10,0

7,0

5,0

4,0

8,0

6,0

10,0

3,0

10,0

I 0

1,0

4,0

7,0

2,0

5 0

14!

529086 Продолзениа табл.8

Не мешает глюкоза, кофеин, С Н1 ОН, аВ

Не оказывают мешающего влияния: эуфиллин, папаверина, гидрохлорид, атропина суль фат, димедрол, дибазол, дроперидол, натрия оксибутират, глюкоза, KCl окситорен, но-шпа, этионамид, глютаминовая кислота, альбумин лиофизироваиный,i борная кислота, NaBr, тальк, ZnSOg

СС1

Цитратный раствор буферный 10X HCl

3-4

Окраска устойчива в тече- Окраска устойчива ние 6-8 ч в течение 5 ч

Селективность

Среда

Устойчивость сигналов аналитической формы

Объекты анализа

Сложные лекарственные Сложные лекарственформы, содержащие новокаин ные формы, содержащие

Определение новокаина в, новокаин присутствии параллельно применяемых сложных лекарственных форм

Биологическая жидкость крови и-диметиламинокоричный аль- Ванилин в присутствии дегид (n-ДМАКА) при концент- додецилсуль|ата натрия рации его в реакционной смеси 4,5"10 -4,5 10 М в присутствии 4 10 З-4 10 M додецилсульфата натрия

Органические реагенты

Со ст авит ель С. Хов анская

Техред Л.Сердюкова Корректор С.Черни .

Редактор С.Лисина

Подписное

Заказ 7633/38

Тираж 789

BN5GIH Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", r. Ужгород, ул. Гагарина, 101

Способ количественного определения новокаина

Патент 1529086