Способ количественного определения полипептидных компонентов средней молекулярной массы в крови

Способ количественного определения полипептидных компонентов средней молекулярной массы в крови

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

Изобретение относится к медицине, а именно к способам исследования крови при диагностике патологических состояний, и может быть использовано для количественного определения полипептидных компонентов средней молекулярной массы в крови. С целью ускорения способа за счет полного выделения из пробы полипептидных компонентов, осаждение сывороточных белков проводят обработкой пробы 1 М ацетатным буфером, рН 4,5-4,6, с последующей инкубацией на кипящей водяной бане в течение 2-3 мин. 1 табл.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛ ИСТ2 ВЕСКИХ

РЕСПУБЛИК

А1

092 012 (gI2 4 0 01 И 33/48

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

H A ВТОРСНОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТНРЫТИЯМ

ПРИ ГННТ СССР (2l) 4256437/28-14 (22) 02.06.87 (46} 30.12.89. Бюл. У 48 (71) Белорусский научно-исследовательский санитарно-гигиенический институт (72) А.М.Горчаков и Л.R.Þñóïîâà (53) 61?.015 (088.8 } (56.) Авторское свидетельство СССР

Р 931171, кл. А 61 В 10/00, G 01 М 33/48, 1980.

Изобретение относится к медицине, а именно к способам исследования крови при диагностике патологических состояний, и может быть использовано в ранней диагностике рака, при оценке эААективности лечения онкологических и почечных заболеваний.

Целью изобретения является ускорение способа.

Способ осуществляется следующим образом.

0„05 мл плазмы (сыворотки) крови разводят 0,90 мл физиологического раствора хлористого натрия, добавляют 0,05 мл 1 М ацетатного буфера (рН 4,5-4,6} и инкубируют 2-3 мин на кипящей водяной бане, охлаждают и центрифугируют 8-10 мин при

1500 об/мин. Иэ супернатанта отби2 (54} СПОСОБ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕ. НИЯ ПОЛИПЕПТИДН11Х КОМПОНЕНТОВ СРЕДНЕИ МОЛЕКУЛЯРНОЙ МАССИ В КРОВИ (57) Изобретение относится к медицине, а именно к способам исследования крови при диагностике патологических состояний, и может быт» использовано для количественного определения полйпептидных компонентов средней молекулярной массы в крови. С целью ускорения способа эа счет полного выделения из пробы полипептидных компонентов, осаждение сывороточных белков проводят обработкой пробы I М ацетатным буфером, рН 4,5-4,6, с последующей инкубацией на кипящей водяной бане в течение 2-3 мин. 1 табл. рают 0,1 мл, сменивают с реагентом

Bradford, спектрофотометрируют через 2-3 мин при длине волны 595 нм н по калибровочной кривой, построенной для человеческого сывороточного альбумина, рассчитывают количество полипептидных компонентов в плазме (сыворотке) крови, которое выражается в мг/1 мл плазмы (сыворотки) крови. таблице приведены результаты измерений количества полипептидных компонентов в сыворотке крови, рас-

< считанные по их содержанию в супернатанте в зависимости от условий обработки пробы: рН и времени инкубации на кипящей водяной бане, а также при использовании известного способа (прототипа}.

1532877

Формула изобретения tp

Увеличение времени.инкубации пробы на кипящей водяной бане мало влияет на степень осаждения сывороточных белков.

Использование предлагаемого способа количественного определения полипеПтидных компонентов средней моле- 20

Количество полипептидных компонентов в сыворотке крови,мг/мл

Сыворотки при рН

Время, мин

Х1 Т 1 1 Т

3,0 . 4,0 45 4,6 50 65

Не осаж.- 4,9 дались

3,8 3,9 4,5 Не осаж- 2,1 дались

4,3

2,9 3,0 4,1

Не осах- 4,2 2,8 2,8 3,5 Не осаждались дались

4,1 2,9 2,8 3,4

"Ланные прототипа

Составитель Л. Сабурова

Редактор О. Спесивых Техред Л. Олийнык Корректор Э.Локчакоаа

Заказ 8094/51

Подписное

Тираж 789

11НИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открьл иям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г.Ужгород, ул. Гагарина,101

Как видно из таблицы, для полного осаждения сывороточных белков оптимальным является добавление буфера с рН 4,5-4,6 с последующей инкубацией пробы íà кипящей водяной бане в течение не менее 2 мин.

Изменение рН бункера как в сторону увЕличения, так и в сторону уменьше1 ниф делает осаждение сывороточных беЛков менее полным, что приводит к пн вкению точности. кулярной массы позволяет при сохранении точности сократить время центрифугирования до 8- 10 мин.

Способ количественного определения полипептидных компонентов средней молекулярной массы в крови, включающий разведение пробы крови, осаждение белков, центрифугирование с последующим спектрофотометрированием супернатанта, о т л и ч а ю . шийся тем, что, с целью ускорения способа, осаждение белков проводят обработкой пробы 1 М ацетатным буфером рН 4,5-4,6 с последующей инкубацией на кипящей водяной бане в течение не менее 2 мин.