Способ оценки лечения хронического катарального бронхита

Способ оценки лечения хронического катарального бронхита

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

Изобретение относится к медицине, в частности к терапии внутренних болезней. Целью изобретения является повышение точности и сокращение времени исследования. Для этого у больного проводят забор содержимого бронхов в течение всего курса лечения с интервалом в 2 дня. Затем в бронхоальвеолярном смыве определяют активность эластазы при PH среды 7,7-7,9 и соотношении субстрата к буферу, равном 1:12. Активность эластазы выражают в микромолях п-нитрофенола, освобожденного в результате гидролитического расщепления субстрата ферментом, содержащимся в 1 мл надосадочной жидкости за 1 ч инкубации в пересчете на 1 мг белка. При этом также учитывают разведение в инкубационной среде. При повышении уровня эластазы с 4 по 13 день относительно исходного в 4-17 раз с последующим постепенным снижением с 14 дня до исходного уровня оценивают лечение как эффективное, а при снижении ее уровня в 1,5-2,0 раза относительно исходного оценивают лечение как неэффективное. Предлагаемый способ позволяет сократить время оценки лечения больных хроническим катаральным бронхитом с 40 до 15 ч, а также повысить точность оценки до

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (51)5 G 01 N ЗЗ/68

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К А ВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР (21 ) 4330938/28-14 (22) 19.11.87 (46) 15.01,90, Бюл. II 2 (71) Институт иммунологии и Всесоюзный кардиологический научный центр

АМН СССР (72) В.А.Дроженников, И,И.Дыханов, О.Г.Оглоблина, А.М.Борисова, В.А,Ляшенко, 3 А.Маркарян и Е,А.Белякова (53) 616 ° 07 (088.8) (56) Kielke А,, Peter А., Kaiser G °

Aktualle Antiritat der RheumatoidArthritis aus den sicht der Gelukyunkthtanalyse. -Aktuel. diagn. Ieth.

Rheumatoli, Ьейфр 1978, Б !44

115 (Ъ). (54) СПОСОБ ОЦЕНКИ ЛЕЧЕНИЯ ХРОНИЧЕСКОГО КАТАРАЛЬНОГО БРОНХИТА (57) Изобретение относится к медицине, в частности к терапии внутренних болезней, Целью изобретения является повышение точности и сокращение времени исследования, Для этого у больного проводят забор содержимого бронИзобретение относится к медицине, в частности к терапии внутренних болезней, Цель изобретения — повышение точности способа и сокращение времени ис следов ания.

На фиг. 1-5 изображено изменение активности эластазы в процессе лечения больных.

Пример 1. Больной Б., 46 лет, находился на лечении с диагнозом хрохов в течение всего курса лечения с интервалом в 2 дня. Затем в бронхоальвеолярном смыве определяют активность эластаэы при рН среды 7,7-7,9 и соотношении субстрата к буферу, равном I:12. Активность эластизы выражают в микромолях п-нитрофенола, освобожденного в результате гидролитического расщепления субстрата ферментом, содержащимся в мл надосадочной жидкости за ч инкуба ции и пересчете на 1 мг белка. При этом также увеличивают раз.;.денпе в инкубационной среде. При повышении уровня эластазы с 4 по !3 день относительно исходного в 4 †!7 раз последующим постепенным снижением с !4 дня до исходного уровня оценивают лечение как эффективное, а при снижении ее урон— ня в 1,5-2,0 раза относительно исходного оценивают лечение как неэффек— тивное. Предлагаемый способ позволяет сократить время оценки лечения боль— ных хроническим катаральным бронхи— том с 40 до !5 ч, а также повысить точность оценки до l007. 5 ил. нический бронхит, стадия обострения.

Больной поступил на I5 сутки с начала обострения заболевания. Состояние больного характеризовалось наличием кашля с вязкой слизистой мокротой в большом количестве, одышкой при умеренной физической нагрузке. Аускультацией выявлено рассеянные сухие хрипы и жесткое дыханне над всеи поверхностью обоих л егк их, При функ циоиаль ном и бронхологическ,1м обследовании выяв1536316 лены изменения вентиляции легких по смешанному типу II степени с эндоскопической характеристикой в форме двустороннего диффузного эндобронхита

II степени с преимущественным поражением нижпедолевых бронхов. Терапия проводилась антибиотиком — метациклином, муколитиком-бромгексином, а также использовалиеь методы местного ле- 1О чения трахеоброихиального дерева: эндобронхиальные санации 17-ным рас твором диоксидина и инстиляции цефамезином, В ходе терапии на 1 сутки произво- !5 дили забор содержимого бронхов, Бронхоальвеолярный смыв (БАС) в объеме

5 мл, полученный во время диагностической фибробронхоскопии, гомогенизировали в стеклянном гомогенизаторе при 3000об/мин в; течение 2 мин в бане со льдом. Гомогенат центрифугируют при 7000g 4 " в течение 15 мин. В 2 мнкропробирки вносили по 30мкл надосадочной жидкости и добавляли по 15 мкл 25

ЭДТА, В 3-ю пробирку вносили 30 мкл физиологического раствора с последующим добавлением 15 мкл ЭДТА. Смесь инкубировали при 25 С в течение 15 мин

После этого вносили по 135 мкл 0,2 И трис-HCl-буфера, рН 7, 8. Затеи в 1-ю и 3-ю пробирки вносили по 15 мкл

0,005 М раствора и-нитрофенилового эфира N-третбутилоксикарбонил-Е-аланина в качестве субстрата (соотношение субстрата к буферу 1:12). В 2-ю

35 пробирку вместо субстрата вносили водный раствор ацетонитрила, Смесь инкуо бировали в течение 15 мин при 25 С и измеРЯли оптическУю плотность (А4оо ) растворов на спектрофотометре при длине волны 400 нм. При расчете ферментной активности А о контрольных прОб вычитали из А400 ОпытнОЙ прОбъп

А4ооч = А4оооп — (А4оо наА +А4оо " ) где А4 q> — оптическая плотность, сооо ответствующая активности эластазы;

А on — оптическая плотность опытной

4оо пробы; А4 на — оптическая плотность контрольной пробы надосадочной жидкости; А4оос — оптическаЯ плотность контрольной пробы раствора .субстрата.

Найденное значение А о, отражающее активность эластазы, сопоставляли с калибровочной кривой и находили количество п-нитрофенола, освобожден- .

55 ного за 15 мин ферментом, содержащимся в 30 мкл надосадочной жидкости.

Окончательно активность эластазы выражали в мкмолях п-нитрофенола, ос1 вобожденного в результате гидролитического расщепления субстрата ферментом, содержащимся в 1 мл надосадочной жидкости за 1 ч инкубации в пересчете на 1 мг белка. При этом также учитывали разведение в инкубационной среде, Аналогичные заборы и определение активности эластазы проводили с интервалом в 2 дня. Полученные данные сведены в табл. 1, На основании полученных данных построили график, приведенный на фиг. 1, Как видно из фиг. 1, увеличение активности эластазы отмечалось с 4 дня лечения с достижением максимального значения на 13-й день и с последующей нормализацией показателя к 22 дню. Время, затраченное для определения активности эластазы при однократном заборе БАС, составляло 1,5 ч.

Было проведено 10 определений. Суммарное время исследования одного больного составило 15 ч.

Отмеченное кратковременное пикообразное увеличение активности эластазы соответствовало улучшению субъективного и объективного статуса больного с уменьшением проявлений основных клинических и эндоскопических признаков заболевания (табл. 2). При этом следует отметить, что положительная динамика в клинике больного наблюдалась начиная с 10--16 дней лечения, Динамика выраженности основных и патологических клинических, фиэикальных и эццоскопических признаков хронического бронхита при эффективном лечении приведена в табл. 2.

Пример 2, Больная Х., 41 год, находилась на лечении с диагнозом хронический бронхит, стадия клинических проявлений, Клиническое .состояние больной характеризовалось наличием кашля с отделением большого количества слизистой мокроты, одышкой при значительной физической нагрузке. Аускультацией выявлено жесткое дыхание над всей поверхностью обоих легких. При функциональном и бронхологическом обследовании отмечались изменения вентиляции легких по обструктивному типу

I степени с эндоскопической характеристикой в форме двустороннего диффузного эндобронхита -ТI степени. Больная получала бисептол, бромгексин, 5 153631 эндобронхиальные санации физиологическим раствором, Определение активности эластазы проводили аналогично примеру 1, По полученньи данным поI строили график, изображенный на фиг.2.

При заборе содержимого бронхов выявлено постепенное снижение уровня активности эластазы (фиг. 2). Указанные изменения уровня ферментной активности подтверждались отсутствием положительной динамики в субъективном и объективном статусе больной.

При этом по отдельным показателям быпо отмечено ухудшение состояния.

Динамика выраженности основных патологических клинических, физикальных и эндоскопических призна-. ков ХКБ при неэффективном лечении приведены в табл, 3. 2

Пример 4. Больная С., 43 r., находилась на лечении с диагнозом хронический бронхит, стадия клинических проявлений, Клиническое состояние больной характеризовалось умеренно выраженной одышкой при физической нагрузке, кашлем с отделением умеренного количества слизистой мокроты повышенной вязкости, потливостью, общим недомоганием, Аускультацией выявлено жесткое дыхание над всей поверхностью легких, рассеяные грубые сухие хрипы, При функциональном и брон0 хологическом обследовании отмечались изменения вентиляиии легких по смешанному типу 1 степени с эндоскопической характеристикой в форме двустороннего типа эндобронхцта диффуз25 ного 1-II степени с преимущественньи поражением нижнедолевых броцхов .

Лечение больной проводили бисептолом, отхаркивающей микстурой, эндобронхиальными санациями физиологическгм раствором с кнстилляциями мукосальвацином. Определение уровня ак— тивности эластазы проводили аналогично примеру 1. Как видно. из фиг. 4 и табл. 5, постепенное ухудшение сос35 тояния "îëüíîé сопровождалось постепенным снижением уровня активности эластазы. Время проведения 10 измерений составляет 15 ч °

Динамика выраженностиосновных патологических клинических, физикальных и эндоскопических признаков ХКБ при неэффективном лечении приведена в табл.5.

П р и и е р 5. Больной К., 30

45 лет, находился на лечении с диагнозом хронический бронхит, стадия обострения ° Больной поступил на 10 сутки с начала обострения заболевания.

Клинически состояние больного характеризовалось наличием кашля с вязкой слизистой мокротой в больном количестве, одышкой, Аускультацией выявлено рассеянные сухие хрипы и жесткое дыхание над всей поверхностью обоих

55 легких. При функциональном и бронхологическом обследовании выявлены изменения вентиляции легких по смеШанному типу ХТстепени с эндоскопической характеристикой в форме двусторонПример 3, Больная П., 18 лет, находилась на лечении с диагнозом хронический бронхит, стадия клинических проявлений. Больная поступила на 18 сутки со дня ухудшения состояния. Клинически состояние характеризовалось наличием кашля с отделением умеренного количества слизистой мокроты, Аускультацией выявлено жесткое дыхание над всей поверхностью легких, При функциональном и бронхологическом о бследова нии о тмечалис ь изменения вентиляции легких по смешанному типу I степени с энпоскопической характеристикой диффузного эндобронхита I степени. В ходе терапии больная получала бисептол, бромгексин, эндобронхиальные санации раствором диоксидина, эндобронхиальные инстилляции кефазолом, проводили забор содержимого бронхов. Определение активности эластазы проводили аналогично примеру 1, но при рН среды 7,9.

На основании полученных данных построили график, приведенный на фиг, 3.

Как видно из фиг. 3, увеличение активности эластазы отмечалось с 7-го по 10-й день от начала лечения, Отмеченное кратковременное пикообразное увеличение активности эластазы соответствовало улучшению субъективного и объективного статуса больной с уменьшением проявлений основных клинических и эндоскопических признаков заболевания, Положительная динамика по клиническим данным наблюдалась с

10-13 дня, Время, затрачиваемое для

10 измерений, соответствовало 15 ч.

6 6

Динамика выраженности основных паталогических клинических, физикальных и эндоскопических признаков ХКБ при эффективном лечении приведена в табл, 1536316 него диффузного эндобронхита II степени. Больному вводили метациклин муколитик-бромгексин, а также про, водили эндобронхиальные санации раствором .диоксидина и инстилляции цефализином. В ходе терапии на 1 сутки производили забор содержимого бронхов. Определение активности эластазы проводили аналогично примеру 1, но при рН среды 6,5. На основании полученных данных построили график, приведенный на Фиг, 5, Отмечалось кратковременное пикообраэное увеличение активности эластаэы, соответствующее. улучшению субъективного и объек1 тивного статуса больного. Время экспо1 зиции инкубационной смеси при одном, определении. составило 30 мин при рН 6 5 вместо 15 мин при рН 7,7 для до|

1 стижения одинакового уровня гидроли, .з а субстрата. Таким образом, время,, затраченное на одно определение сос тавило 1 ч 45 мин, Суммарное время исследования одного больного (10 ис- 25 следований) соответственно увеличи, лось на 2,5 ч по сравнению с оптимальным режимом, но все же ниже, чем в прототипе.

Таким образом, предложенный cIIQ соб оценки лечения хронического ката1, рального бронхита (ХБК) позволяет с

I высокой точностью (1081 ) и скоростью определить эффективность . лечения больных ХКБ.

Предложенным методом проведено исследование активности эластазы у

22 больных ХКБ. Исследования проводили в динамике у каждого больного с забором материала от 7 до 10 раз с 40 интервалом 2 дня до, в течение и после лечения, 13 (59 ) больных ХКБ находилось до лечения в стадии обострения, у 9 (4IX)45 больных выявлены умеренные клинические проявления заболевания ° Таким обI разом, все обследованные больные поступили в период большей или меньшей степени активности ХКБ, имея до начала исследования и лечения длитель-. ность обострения От 1,5 до 3 недель, Терапия проводилась антибиотиками (метациклин, Олететрин, ампицилин, цефамезин), муколитиками (бромгексин, мукалтин); широко использовались методы местного лечения трахеобронхиального дерева — эндобронхиальные санации и инстиляции цефамезином, фурадонином» диоксидином, У 17 больных наблюдалось эффективное лечение, что подтверждалось кратковременным пикообразным увеличением активности эластазы в интервале с 4го по 13-й день с начала лечения. Как видно из графика, найденные средние значения Mkm для начала лечения составили 4,75+1,36; для пикообразного увеличения — 68,87 6,32; для окончания лечения — 11,0+3,48 ° Таким образом, уровень пикообразного увеличения активности эластазы достоверно отличается (pc0)001) От исхОднОГО и кОнечнО го уровней фермента в процессе лечения. формула и з О б р е т е н и я

Способ оценки лечения хронического катарального бронхита путем забора бронхоальвеолярного смыва с последующим его исследованием, О т л и ч а юшийся тем„что, с целью повышения точности способа и сокращения времени исследования, в процессе курса лечения определяют активность эластазы при рН

7,7-7,9 и соотношении субстрат: буфер 1: 2 и при повышении ее уровня с

4 по 13 день относительно исходного в 4-17 раз с последующим постепенным снижением с 14 дня до исходного уровня оценивают лечение как эффективное, а при снижении ее уровня в 1,5-2,0 раза. относительно исходного оценивают лечение как неэффективное, .1536316

1О

Таблица l

Расчет активности эластазы

Актив Нос ть фермента, Количество и-нитрофенола по калибровоч-. ной кривой, мк/моль

Умножение на коэффициент

858

Количес тво белка в пробе, мг/мл

Дни забора

БАС птичесая плотость мкмоль п-нитрофенола белка

19, 73

23, 75

37,75

20,60

188,76

1,75

I 1,27

12, 50

13,98

50,00

69,91

1,90

2,70

2,50

2,70

2,60! 77, О

45,0

41,18

2,40

17, 16

31,5

0,037

3,15

70,0

0,031

О 018

26, 60

15,44

7,49

3,55

3) 2,15

7,18 %

Коэффициент 858 включает разведение в пробирке «6,5 раз; пересчет на 1 мл экстракта «33 раза; пересчет на 1 ч инкубации х 4 раза.

Таблица 2

Ъ

II () t L)(Признаки

l 4 7. 10 3 16 14 22 25 28 34

Кашель

Количество мокроты

Одышка

+ + + + +

Физикаль ные данные (аускультация) Эндоскопия (выраженность эндобронкита) + + + + + +

Примеч ание.

",+ — уменьшение выраженности признаков (положительная динамика);

- отсутствие динамики.

0,080

0,096

О, 145

О,: 085

0,660

0,400

0,155

О, 122

О, 105

0,060

О, 023

О, 028

О, 044

О, 024

О, 200

0,136

0,048

+ + + + + + + +

+ + + + + + +

1536316

Таблица3

Признаки

Физикальные данные (аускультация) Эндоскопия (выраженность эндобронхита) П р и м е ч а н и е. и и — увеличение выраженности признаков; — отсутствие динамики.

Таблица4

Приз наки

1 4 7 !О 13 16 19 22 25 28

+ + + + + + +

Кашель

Количество мокроты

+ + + + + +

Одышка

+ + + + +

+ + + + . + +

Примеч ание.

"+ — уменьшение выраженности признаков, положительная динамика; — отсутствие динамики.

Кашель

Количество мокроты

Одышка

Физикальные данные (аускультация) Эндоскопия (выраженность зндобронхита) Дни лечения

4 7 10 13 16

1 19 22 25 28

Днн лечения

Г ) 1536316

14 fàблица5, Признаки

Кашель

Одышка

Примечание.

"-" — увеличение выраженности признаков; — отсутствие динамики.

Количество мокроты

Физикальные данные (аускуль-, тация) Зндоскопия (выраженность эндобронхита) 1) ГХ Г Г Г Г

1 4 7 10 13 16 19 22 2S 28

15363 !6

1536316 ф гп

Ф ф ф ю t8 6

Фю1 ч

Составитель Л. Шилина

Техред М, Ходанич

Редактор Л. Пчолинская

Корректор С.Черни

Заказ 106 Тираж 506 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям прн ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул. Гагарина, 101