Способ отбора перспективных рекомбинантов при скрещивании родов сiтrus и poncirus

Способ отбора перспективных рекомбинантов при скрещивании родов сiтrus и poncirus

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

Изобретение относится к селекции цитрусовых и может быть использовано в сельском хозяйстве. Цель изобретения - снижение трудоемкости и повышение точности отбора. Для получения потомства F<SB POS="POST">2</SB> у гибридов F<SB POS="POST">1</SB> измеряют процент нарушения мейоза и анализируют данные электрофореза белковых экстрактов. Отбирают гибриды F<SB POS="POST">1</SB> с нарушением мейоза меньше 20% и наличием изоферментных локусов GOT - 1, GOT - 2, PGI и JDH. Потомство F<SB POS="POST">2</SB> получают от самоопыления отобранных гибридов F<SB POS="POST">1</SB>. В гибридах F<SB POS="POST">2</SB> на стадии семян определяют наличие крахмала в семядолях. Для посева используют бескрахмальные семена, а в качестве перспективных рекомбинатов отбирают морозоустойчивые сеянцы F<SB POS="POST">2</SB>.

СОЮЗ СОВЕТСНИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИК

А1

„„SU„„1540741 (5!)5 А 01 Ц 1/04

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Н А ВТОРСНОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

Для электройореэа используют бел ковые экстракты листьев. Листья зали вают жидким азотом, растирают до го-—

Могенного состояния в ступке и экстрагируют ферменты в течение 18 ч при 4 С равным объемом буферного раствора. 0,05 M трис, 0,04 И аскорбиновая кислота, О, 005 И,, цистеин, 0,001 М ЭДТА, рН 7,2, включающего

20Х-ную сахарозу. Гомогенаты центрифугируют при -15000 об/мин в течение

30 мин. Электрофореэ проводят в вертикальном блоке полиакриламидного геля в трис-ЭДТА-боратной непрерывной буферной системе, рН 8,3.

OCVQAPC TBEHHblA HOMHTE7

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТНРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР (21) 4323931/30-13 (22) 4. 08.87 (46) 07. 02. 90. Бюл. !1- 5 (71 ) Институт общей генетики им, И. И.Вавилова и Сухумский Филиал

Всесоюзного научно-производственного объединения по чаю и субтропическим культурам (72) Б.И.Капанадэе, В.А.Шевченко и И, С. Капанадэе (53) 631. 521 (088.8) (56) Субтропические культуры, 1976, !! 1, с. 59-62. (54) СПОСОБ ОТБОРА ПЕ РСПЕКТИВ!!НХ .РЕК0МВННАНТ0В ПРИ CKPF! !ÈBAHÈÈ РОДОВ

CITRUS И PONCIRUS (57) Изобретение относится к селекции

Изобретение относится к селекции цитрусовых и может быть использовано в сельском хозяйстве.

Целью изобретения является снижение трудоемкости и повышение точности отбора.

Пример, Для получения потомства F отбирают гибриды F, с сравнительно упорядоченным мейозом - меньше 20Х нарушений и наличием иэоЬерментных локусов Got-1, Got-2, Pgi, Id H.

Мейоз изучают на давленных препаратах пыльников. Бутоны очищают от чащелистников и лепестков, фиксируют в смеси спирта с ледяной уксусной кислотой (3:1), Перед цитологическим анализом пыльники протравливают в 4Хном растворе железоаммонийных квас2

:цитрусовь х и мо ет быть использовано

1 в сельском хозяйстве, Цель изобретения — снижение трудоемкости и повышение точности отбора. Для получения потомства Г у гибридов F измеряют

1 проиент нарушения мейоэа и анализируют данные электрофореза белковых экстрактов. Отбирают гибриды F с нарушением мейоэа меньше 20Х и наличием изоферментных локусов (t-1, Got2, Ppi и Idh, Потомство F получают от самоопыления отобранных гибридов

F, . В гибридах F< на стадии семян определяют наличие крахмала в семядолях, Для посева используют бескрахмальные семена, а в качестве перспективных рекомбинантов отбирают морозоустойчивые сеянцы Fy . цов в течение 3-4 ч, затем окрашивают железным гематоксилином по Гейдангайну 4-5 сут.

E 540741

В случле использовлния Р гибри1 дов с нормально протекающим мейоэом и с указанными изоферментными локусами среди сеянпев Г, подвергнутых двойному отбору (морозоустойчивость и бескрахмальные семядоли), частота образования съедобных Ьорм 0,037 +

+0,015, В известном способе, где не проводился предварительный отбор Г гибридов и семян F, частота получения перспективных форм 0,000157

+0,000018 .

Формула изобретения

Корректор И.Эрдейи

Тираж 435

Подписное

Заказ 238

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, .Раушская наб., д. 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г.Ужгород, ул. Гагарина,101

Гистохимическое окрлщивлние bepментных систем проводят следующим об разом.

Глутлмлтоксллолцетяттрянсаминлзя, локусы Со!:-1 >< Got-2. 0,1 М трис-НС1, буфер pll 8,8 50 мл, 1.-лсплрлгиновая кислота 60 мг, кетоглутяровяя кислота 40 мг, прочный синий ББ соль

66 мг, гелевый блок инкубируют при lp

37 С 05ч.

Изоцитдегидрогеназа, покус Idh

0,1 11 трис-!!С1, буфер рН 8,0 50 мл, D,L-изопитрлт натрия 40 мг, НАДФ

20 мг, 0,2 И ИоС1 2,5 мл, ИТТ 10 мг, ФИС 3 мг, гелевый блок инкубируют при 37 С 1 ч.

Глюкозофосфлтизомерлза, локус Pgi °

0,1 И трис-НС1, буфер рН 8,0 80 мл, фруктоэа-6-фосфат (нлтриевяя соль)

100 мг, глюкозо-6-фосфатдегидрогеняза 80 ед, 0,2 М HnClg 2,5 мл, НАДФ

20 мг, ИТТ 10 мг, ФМС 3 мг, гелевый блок инкубируют при 37 С 20 мин.

Потомство Р получают от самоопы- 25 ленин. Цветки изолируют 2-слойной марлей, Для выявления крахмала вырезают маленькие фрагменты иэ хялязальной части семени. Присутствие крахмала I определяют иодным реактивом, Бескряхмальные семена проращивают в стерильном песке. По окончании вегетационного периода (!О мес ) сеяниы переносят в рефрижератор. Температуру понижают в следующем режиме, ч: 0 С о 35

72, -6 С 48; -12 С 24. Не поврежденные и мллоп оврежденные ра с тения !в

2 балла переносят в грунт.

Составитель Е.IЧкрадюк

Редактор О,Головач Техред Л.Олейник

Способ отбора перспективных рекомбинантов при скрещивании родов

Citrus и Poncirus, включающий измерение и анализ биологических показателей у гибридов Р„и F, по результатам которого выделяют перспективные гибриды, отличающийся тем, что, с целью снижения трудоемкости и повышения точности отбора, в качестве биологических показателей у гибридов FI измеряют процент нарушения мейоза и анализируют данные злектрофореза белковых экстрактов, для получения .гибридов Р отбирают гибриды F с нарушением мейоэя меньше 20Х и наличием иэоАерментных локусов Got=I, Got=2, Pgi и Igh, в гибридах F> на стадии семян определяют наличие крахмала в семядолях, для посева F используют бескрахмальные семена, а в качестве перспективных рекомбинантов отбирают морозоустойчивые сеянцы Р .