Способ определения пригодности препарата "губка гемостатическая" к применению для осуществления гемостаза

Способ определения пригодности препарата "губка гемостатическая" к применению для осуществления гемостаза

Реферат

 

Изобретение относится к гемокоагулологии, а именно к способам оценки активности препаратов губки гемостатической. Цель изобретения - повышение точности способа. Способ осуществляется путем внесения препарата губки в стабилизированную кровь с последующей оценкой времени рекальцификации в опытной и контрольной пробах (без губки). При укорочении времени рекальцификации не менее, чем на 22% по сравнению с контролем судят о пригодности препарата для осуществления гемостаза.

Изобретение относится к медицине, а именно гемокоагулологии, и касается способа оценки препаратов губки гемостатической. Цель изобретения - повышение точности способа. Способ осуществляется следующим образом. Гемостатическую активность определяют путем внесения губки в стабилизированную кровь с последующей оценкой времени рекальцификации в опытной и контрольной пробах (без губки). При укорочении времени рекальцификации не менее чем на 22% по сравнению с контролем судят о пригодности препарата для осуществления гемостаза. Способ поясняется следующим примером. В центрифужную пробирку с полиэтиленовой пробкой производят забор крови с 3,8% -ным раствором цитрата натрия в соотношении 9: 1 и осторожно перемешивают. 0,015 г мелко измельченной губки помещают в пробирку вместимостью 10 мл, прибавляют 0,5 мл физиологического раствора хлорида натрия и 0,5 мл стабилизированной крови, встряхивают и инкубируют в водяном термостате при 37^оС в течение 10 мин, затем встряхивают и выдерживают еще 5 мин при комнатной температуре (18-20^оС). После окончания инкубации пробирку снова встряхивают и стеклянной палочкой удаляют на стенку разбухшие кусочки губки. Из пробирки со смесью после перемешивания переносят в другую пробирку 0,2 мл, инкубируют в водяном термостате при 37^оС 30 с, прибавляют 0,1 мл 0,045 М раствора кальция хлорида и определяют при осторожном наклоне пробирки на 45-60^о время образования плотного сгустка. Во время образования сгустка пробирку не встряхивают во избежание нарушения целостности сгустка. Контрольную пробу проводят аналогично опытной за исключением введения губки (0,5 мл физиологического раствора +0,5 мл той же крови). Расчет гемостатической активности (Х) по методу рекальцификации (% ) производят по формуле X = , где Т_о - время рекальцификации в контрольной пробе; Т - время рекальцификации в опытной пробе; Т_о - Т - разница во времени рекальцификации между контрольной и опытной пробами. Скорость осуществления гемостаза в организме исследовали у собак, у которых вызывали экспериментально венозные и артериальные кровотечения. При использовании препарата, имеющего гемостатическую активность менее 22% , гемостаз в организме составляет только 5-8 мин, что характеризует недостаточную гемостатическую активность, тогда как при других сериях губки с более высокой гемостатической активностью (22-66% ) достигается гемостаз в течение 0,5 - 2,5 мин. Для доказательства оптимальности значений отработанной in vitro нормы гемостатической активности по предлагаемому способу были поставлены эксперименты на 10 собаках, у которых с целью гемостаза использовали серии губки с различными значениями гемостатической активности, полученной in vitro по предлагаемому способу. Для этого у животных вызывали венозные и артериальные кровотечения, которые обычно связаны с черепно-мозговыми поражениями. В качестве контроля использовали марлевый тампон. Результаты определения времени гемостаза у экспериментальных животных приведены в табл. 1. Данные табл. 1 свидетельствуют о соответствии гемостатических свойств, определяемых in vitro по предлагаемому методу скорости осуществления гемостаза в организме. При использовании препарата, имеющего in vitro гемостатическую активность менее 22% , гемостаз в организме составляет только 5-8 мин, что характеризует недостаточную гемостатическую активность, тогда как при других сериях губки с более высокой гемостатической активностью in vitro (22-66% ) достигается гемостаз в течение 0,5-2,5 мин. Таким образом, отработанная норма гемостатической активности in vitro по укорочению времени рекальцификации в опытной пробе по сравнению с контролем и в пределах 22-66% является оптимальной. Точность метода оценивалась на основании результатов повторных определений гемостатической активности каждой серии губки с одной и той же порцией крови донора (не менее 9 определений) с подсчетом коэффициента вариации. Результаты повторных определений приведены в табл. 2. Ошибка метода определения гемостатической активности составляет 5-6% , что свидетельствует о высокой точности предлагаемого метода. При определении известным способом сгусток образуется и при полной инертности препарата (контроль не предусмотрен), т. е. метод является полуколичественным. (56) Губка гемостатическая коллагеновая, ВФС-42-180-72.

Формула изобретения

СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ПРИГОДНОСТИ ПРЕПАРАТА "ГУБКА ГЕМОСТАТИЧЕСКАЯ" К ПРИМЕНЕНИЮ ДЛЯ ОСУЩЕСТВЛЕНИЯ ГЕМОСТАЗА путем внесения испытуемого препарата в стабилизированную биологическую жидкость и определения времени образования сгустка, отличающийся тем, что, с целью повышения точности, в качестве испытуемого препарата используют антисептическую губку с гентамицином, в качестве биологической жидкости - кровь, время образования сгустка определяют путем рекальцификации в опытной и контрольной пробах и при ускорении образования сгустка не менее чем на 22% по сравнению с контролем судят о пригодности препарата для осуществления гемостаза.

РИСУНКИ

Рисунок 1

MM4A Досрочное прекращение действия патента Российской Федерации на изобретение из-за неуплаты в установленный срок пошлины за поддержание патента в силе

Дата прекращения действия патента: 05.04.2003

Номер и год публикации бюллетеня: 18-2004

Извещение опубликовано: 27.06.2004