Способ определения пластической функции миокарда на гистологическом препарате
Иллюстрации
Показать всеРеферат
Изобретение относится к медицине. Целью изобретения является повышение точности определения пластической функции миокарда. Цель достигается окрашиванием биоптата миокарда в 50%-ном растворе нитрата серебра и выявлением в кардиомиоцитах гранул серебра в ядрышках. При снижении содержания гранул серебра в клетках ниже 6 на одну клетку определяют низкую пластическую функцию миокарда, а соответственно, и возможность развития ИБС или инфаркта.
СОЮЗ СОВЕТСНИХ
СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ
РЕСПУБЛИК
„„SU„,, 1569324
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
К А BTOPCHOMY СВИДЕТЕЛЬСТВУ
ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ
ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ
ПРИ ГКНТ СССР (21) 4249713/28-14 (22) 25.05.87 (46) 07.06.90, Бюл ° ¹ 21 (71) 1-й Ленинградский медицинский институт им. акад. И.П, Павлова (72) Н.Н. Мамаев, А.Я. Гудкова, Х.К. Аминева, О.В. Ковалева и И.С. Поликарпов ,(53) 616-0,89.9 (088.8) ,(56) Архив патологии, 1986, т. 48, И - 6, с. 3-8.
Изобретение относится к медицине, а именно к клинической и экспериментальной кардиологии.
Целью изобретения является повышение точности способа.
Способ осуществляют следующим образом.
Кусочек миокарда, который получают во время операции или при аутопсии, произведенной в течение 1 ч после констатации биологической смерти, помещают на подложке в жидкий азот.
Затем приготавливают криостатные срезы толщиной 10 мкм. Их высушивают на воздухе, фиксируют смесью метиловый спирт : ледяная уксусная кислота в отношении 3:1 в течение 10 мин, споласкивают дистилированной водой.
После высушивания препараты обрабатывают в 2 н, растворе муравьиной кислоты в течение 20 мин. по оконча(g))5 С 01 N 1/28 A 61 В 10 00
2 (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ПЛАСТИЧЕСКОЙ
ФУНКЦИИ МИОКАРДА НА ГИСТОЛОГИЧЕСКОМ
ПРЕПАРАТЕ (57) Изобретение относится к медицине. Целью является повышение точности определения пластической функции миокарда. Цель достигается окрашиванием биоптата миокарда в
507.-ном растворе нитрата серебра и выявлением в кардиомиоцитах гранул серебра в ядрышках ° При снижении содержания гранул серебра в клетках ниже б на одну клетку определяют низкую пластическую функцию миокарда, а соответственно, и возможность развития ИБС или инфаркта.
1 нии инкубации стекла споласкивают дистиллированной водой, высушивают на воздухе и окрашивают 50Х-ным раствором нитрата серебра, После окрашивания серебром препараты снова тщательно ополаскивают дистиллированной водой, высушивают на воздухе и в течение 40 с подкрашивают 1Х-ным раствором краски Гимза, приготовленной на фосфатном буфере с рН 6,8.
В окрашенных серебром препаратах ядра кардиомиоцитов легко отличаются
1. от ядер других видов клеток их укрупненным размером. Анализ последних осуществляют под иммерсионным объективом с увеличением 1000х . В каждом ядре кардиомиоцита оценивают общее число ядрышек и содержание в них гранул серебра. При этом показателем низкой белок-синтезирующей активности кардиомиоцитов считается уменьше1569324
Формула изобретения
Способ определения пластической функции миокарда на гистологическом препарате путем окрашивания ядрышек кардиомиоцитов, о т л и ч а ю щ и йс я тем, что, с целью повьппения точности способа, в ядрышках определяют аргентофильные гранулы, при этом в качестве красителя используют
50%-ный раствор нитрата серебра, а пластическую функцию кардиомибциатов определяют по содержанию аргентофнльных гранул.
Составитель Л. Стебаева
Редактор Н . Гунько Техред JI.Сердюкова Корректор Н. Король
Заказ 1425 Тираж 508 Подписное
ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР
113035,: .зсква, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5
Производственно-издательский комбинат "Патент", г.ужгород, ул. Гагарина„101 ние в них гранул серебра (ниже 6), а высокой — увеличение гранул серебра в ядрышке (выше 15), На основании анализа белок-синтезирующей готовности у 100-200 кардиомиоцитов рассчитывают среднее содержание гранул серебра в ядрышках одного кардиомиоцита, а также процентное содержание клеток с низким, высоким и нормальным количеством гранул серебра в ядрышках.
Пример 1. Больной, 49 лет, поступил в клинику с жалобами на приступообразные боли в области
1 5 грудины, проявляющиеся при ходьбе.
Болен в течение 6 лет. Два года назад перенес инфаркт миокарда, за
2 мес до поступления появилось учащцние приступов стенокардии, присту20 пЫ острой коронарной недостаточности.
На ЭКà — ритм синусовый, рубцовые
1 изменения на задне-боковой стенке левого желудочка. Данные коронарографии: полная окклюзия передней Me»me лудочковой артерии в проксимальной трети,стенозирование (25X) просвета огибающей артерии. На киновентрикулОграммах сокращение и опорожнение левого желудочка удовлетворительное, Взят кусочек миокарда для исследованйя во время операции наложения маммарно-венечного анастомоза из области верхушки,левого желудочка, которая снабжается кровью передней межжелудочковой артерии, Биоптат поместили в жидкий азот, далее приготовили криостатные срезы толщиной
10 мкм, высушивали на воздухе, профиксировали смесью метиловый спирт и лЕдяная уксусная кислота, обрабатывали в течение 20 мин в 2 н. растворе муравьиной кислоты, промыли дисстиллированной водой и высушили на воздухе. Срезы импрегнировали 50 -ным водным раствором нитрата серебра, 45 с-мешанным на стекле с 2 .-ным растворпм желатины. Окраску препаратов осуществляли во влажной камере при 69 С в течение 2 мин 30 с. После этого их тщательно споласкивали дистилированной водой и докрашивали 1%-ным раствором краски Гимза, В просмотренном препарате 65% кардиомиоцитов были низкоактивными, содержали 1-5 гранул серебра в ядрышках, а в остальных со держание гранул серебра не превышало контрольный уровень, что в целом определяло низкую белок-синтезируюшую и пластическую функцию миокарда.
Пример 2, Больной, 52 лет, поступил с жалобами на приступообразные боли в области грудины.
Коронарография не выявила окклюзионных изменений в питающей анализируемый участок миокарда передней межжелудочковой артерии, взят биоптат миокарда, среднее содержание гранул серебра в ядрышках кардиомиоцитов равно 12,7. При этом низкое содержание гранул серебра в ядрьппках имели место в 11% клеток, в 63% оно не отличалось от контрольного уровня, в
26 было вьппе 35 гранул серебра на ядро, что позволило определить высокую пластическую функцию кардиомиоцитов миокарда.
Способ позволяет повысить точность оценки пластической функции миокарда, прогнозировать вероятность развития инфаркта миокарда, на-. рушение ритма сердечной мьппцы, сердечной недостаточности,